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百奥莱博专业生产销*(代"售")SYBR Green Ⅱ核酸染料(10000×)厂家价格,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:SYBR Green Ⅱ核酸染料(10000×)厂家价格
编号:BTN140234
品Pai:百奥莱博
英文名:SYBR Green II nucleic acid dyes
产地:国产|进口
SYBR Green II染料是一种高敏感的核酸染色试剂,可以对RNA或者是单链的DNA进行染色。不传统的EB等染料相比,SYBR Green II染料具有灵敏度更高,低毒安全,可用于杂交前RNA质量的检测而不影响的转膜等显著优点。
产品特点:
1. 灵敏度高,信噪比高,样品荧光信号强,背景信号低。可检测出100pg RNA或者单链DNA。不EB相比,SRBR Green II -RNA 复合物所激发的荧光是EB-RNA 复合物激发荧光的7倍。在变性琼脂糖/尿素胶等条件下,SYBR Green II的灵敏度但仍高于EB,使用300nm 透射光显影,非变性凝胶中检测核酸的灵敏度可以达到5×10-7克。
2. 操作简单,无须脱色或冲洗。使用方便,丌影响其它修饰酶作用。完全可以代替银染,同时还兊服了银染实验过程复杂、操作繁琐、费时的缺点。
3. SYBR Green II 丌是特异性的结合RNA或者DNA 单链,其对单链的结合效率是双链的约2倍。不其他大部分核酸染料丌同,SYBR Green II 不RNA 结合的荧光量子产率和荧光范围高于不DNA 结合。
4.荧光范围广,可使用多种成像设备观测。ZD激发波长在497nm处,次激发波长在245nm 附近。发射波长在520nm处产生。
5.适用范围广,可适用于多种电泳分析、DGGE和SSCP 及RNA 质量分析实验。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
使用方法:
SYBR Green II染料检测核酸时即可用于预染也可电泳后染色。
1.预染实验
取1μL 贮存液加入1ml TE缓冲液或者灭菌双蒸水中混匀,再加入1ml的6×loading buffer上样缓冲液混匀(此时溶液为1:2000 稀释,即为工作液)电泳时取1-2ul工作液和5ul电泳样品混匀后直接上样。
2.电泳后染色
a.电泳后,在室温、避光的情况之下准备染色液。染色液要在塑料器皿中制备而丌要在玻璃器皿中,因为玻璃表层对该试剂有吸附作用。
b.染料取出后室温放置,恢复室温后简单离心混匀。
c.染色液使用1×TBE缓冲液进行1:10,000 稀释。如果是琼脂糖甲醛变性胶,用1×TBE做1:5000的稀释。由于SYBR Green II RNA染色液灵敏度高,所以要选用新鲜的1×TBE缓冲液进行稀释,以克缓冲液中残存的杂质产生背景,影响实验结果。注意:为提高染色的灵敏度,需要保证缓冲液的PH 值7.5-8 之间。
d. 把胶放在塑料的染色容器中,加入足够染色液使之覆盖整块胶。用铝箔遮盖或者是放在暗处避光。在染色之前没有必要先将胶中的变性剂如尿素和甲醛洗出来,因为本产品复合物发出的荧光在甲醛或者尿素存在时丌会猝灭。
e.在室温下轻轻摇晃凝胶。聚丙*(代"烯")酰胺凝胶的ZJ染色时间是10-40分钟,琼脂糖凝胶的ZJ染色时间是20-40分钟。染色时间也可能随着凝胶的厚度和浓度变化。由于其荧光本底很低,凝胶染色后无需脱色。染色工作放在2-8℃ 避光保存,可以重复使用3-4次。
注意:SYBR Green II RNA染色液丌影响RNA 向膜上的转移和northern中的后续实验。
3.染色胶显色和成像
本产品所激发的荧光可以使用300nm和254nm光波照射,通过Wratten 15滤光片检测。注意:由于荧光本底较低,所以可以通过适当延长曝光时间的方法检测痕量的核酸。
SYBR Green Ⅱ核酸染料(10000×)厂家价格极具性价比,此外,我公司正火爆促销以下产品:
·*蛋白酶YZ剂Ⅰ溶液(10mg/mL)
编号:BTN130537
英文名称:Calpain InhibitorⅠSolution
规格:10mL
本品为10mg/mL的甲醇溶液,工作浓度为17μg/mL。*蛋白酶YZ剂Ⅰ(N-acetyl-Leu-Leunorleucinal,Ac-LLnL-CHO),分子量是383.5,不溶于水。可以YZ*依赖性的中性半胱*酸蛋白酶活性。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期6个月(4℃稳定一周)。避免反复冻融。
·丽春红S染膜液
编号:BTN100924
英文名称:Ponceau S BlotStain
规格:250mL
本产品是基于丽春红S的蛋白印迹膜染液,用于对PVDF膜和NC膜上的蛋白质进行超快染色的试剂。
产品特点:
1.超快,整个过程只需要5分钟。
2.染色可逆,脱色后印迹膜可用于后续试验如免疫检测、ECL、Dot-ELISA。
3.灵敏度为50-150ng。
储存条件:常温运输和避光保存,有效期一年。
使用方法:
1.将印迹转移膜放在一干净的塑料盒中,用去离子水洗涤3次,每次5分钟。
2.用本产品染膜30-60秒。
3.用去离子水脱色数次,每次30-60秒,当背景呈现非常浅的粉色时,停色。转移到印迹膜上的蛋白质在淡红色背景上呈现红色的条带。
4.将印迹膜在空气中稍微放干,然后将印迹膜扫描或照相以保存染色的结果。也可用塑料包装膜或塑料袋覆盖在湿的印迹膜上,用铅笔或钢笔勾画出条带,以此直接在印迹膜上标记目的条带的位置。以适当的压力下压,使膜上形成性的压痕。
5.丽春红染色的印迹膜可以直接用于Western检测。
6.如果需要去除蛋白质条带中的丽春红S染料,可用自备的0.2mM的NaOH浸泡印迹膜1分钟。
7.用去离子水洗膜3次,每次5分钟,然后空气干燥。
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BTN130629 RecJf核酸外切酶 RecJf Exonulease
ARB12030 大鼠β细胞素(BTC)免费代测 Rat beta cellulin,btc ELISA KIT
胆固醇酯酶 Span 85 9026-00-0
PY02-433 改良MSRV培养基基础 250克
9048-71-9 葡聚糖凝胶G-50 Sephadex G-50medium
F030218 HRP标记兔抗猪IgG抗体 Rabbit Anti-Pig IgG*HRP
206752-36-5 苄眯 Benzamidine
ARB13526 兔Bcl-2相关X蛋白(BAX)尿液中含量检测 Rabbit bcl-2 assaciated x protein,bax ELISA KIT
BTN130413 肝素琼脂糖 Heparin Agarose
阿魏酸 HDCBS 537-98-4
NF-251 冻干羊抗人Tf血清
ARB12826 小鼠上皮中性粒细胞活化肽78(ENA-78/CXCL5)elisa测定使用说明书 Mouse epithelial neutrophil activating Peptide 78,ena-78 ELISA KIT
611-06-3 2,4-二*硝基*(代"*") 2,4-Dichloronitrobenzene
ARB13124 小鼠促卵泡素(FSH)酶联免疫定量检测 Mouse follicle-stimulating hormone,fsh ELISA KIT
BTN120676 Southern封堵液(NC专用) Southern Blocking Buffer(NC)
肌酸酶 Econazole nitrate 37340-58-2
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·柱式藻类RNA大量提取试剂盒
编号:BTN120504
英文名称:Algae RNA Column large-scale extraction kit
规格:5次
本试剂盒是在本公司柱式藻类RNA提取试剂盒(BTN120503)的大提升级产品,跟柱式藻类RNA提取试剂盒相比,它具有下列特点:
1.样品处理量大,最多可以处理50mL液体藻类培养物。
2. 操作简单快捷,整个过程只需要约30分钟。
3. RNA 纯度高,OD260/280一般都在2.0左右,可直接用于RT-PCR、Northern杂交、microarray hybridization、cDNA 合成等。
4. RNA产量高,一般在20-70μg/mL液体藻类培养物(约2.0×107个细胞)。非酶细胞破裂法,适用于各种形态的藻类和各个种属的藻类。
试剂盒组成:
成分 | 规格 |
溶液A | 50ml |
溶液B | 50ml |
溶液C | 150ml |
溶液D | 50ml |
大提离心吸附柱 | 5套 |
通用洗柱液 | 100ml |
RNA 洗脱液 | 10ml |
说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输,4℃保存,有效期一年。
使用方法:1. 将50mL液体藻类培养物在塑料离心管中5000-7,000rpm 4℃离心1分钟,并弃尽液体培养基(可以分多次离心)。
2. 加入10mL溶液A并充分吹打混匀。注意:溶液A存放时容易产生沉淀,如果有沉淀,用前请置于65℃融化并充分摇晃均匀。
3. 加入10mL溶液B,剧烈振荡30秒。
4. 65℃保温5分钟。注意:不要超过5分钟,否则RNA 容易降解。
5. 5000-7,000rpm 4℃离心3~5分钟,转移上清到一自备的、干净的50mL塑料离心管中。
6.在上清液中加入2mL自备的*仿,充分振荡30秒混匀。
7. 4℃ 5000-7,000rpm离心3~5分钟,转移上清液到一自备的、干净的50mL塑料离心管中。
8. 加入相当于上清液(约10mL左右)3倍体积的溶液C和1倍体积的溶液D,充分混匀。如果上清为10mL,则加入30mL溶液C和10mL溶液D。
9. 将混合液分多次转移到离心吸附柱中,每次转移后需要室温放置2-3分钟以让RNA跟吸附膜充分结合,然后5000-7,000rpm室温离心30-60秒,弃收集管中的穿透液,然后再加入后一批混合液,重复操作,直到混合液全部挂柱。
10. DY次洗涤:将10mL 通用洗柱液加到离心吸附柱中,室温离心半分钟,弃收集管中的穿透液。
11. 第二次洗涤:一次洗涤一般足够去除杂质,但如果样品OD260/280 比值不高,可以再用10mL 通用洗柱液重复上步洗涤一次。
12.室温离心空柱子(带收集管)半分钟。此步十分重要,否则残留的通用洗柱液会影响RNA的使用。
13. 将离心吸附柱转移到一自备的RNase-free 50mL塑料离心管中,加入1mL RNA 洗脱液。
14.室温离心半分钟,离心管中溶液即为RNA样品,可以立即使用或存放于-80℃待用。
15. RNA完整性的电泳检测:
注意:普通DNA上样液不含变性剂,更没经过去RNase处理,所以不要用于RNA电泳。
16. RNA产量和纯度产率测定:
将5-10μL RNA 溶于TE缓冲液中(pH7.5-8.2 之间)检测其在OD260的光吸收。通过光吸收可以得出RNA浓度(1 OD260的RNA=40μg/mL),进而计算出RNA的产量(浓度×体积)和产率(RNA产量/细菌用量)。注意不要将RNA 稀释在DEPC 水中检测OD260和OD280,否则光吸收比在TE中测得的低10%-15%;也不要稀释过度,使OD读数在仪器的有效范围之外,这样得到的OD 比值没有意义。
疑难解答:Q:上样孔里的红色荧光物一定是污染的基因组DNA 吗?
A:不是。用TAE或TBE电泳液和非变性胶电泳RNA时容易产生此现象,百奥莱博初步研究发现大部分红色荧光物是变性不充分的单链RNA 通过碱基互补或通过硼*(代"酸")络合(如果使用TBE作电泳液的话)形成的复合物,加RNase处理后,这些红色荧光物一般会消失。为避免此现象,建议使用甲醛变性胶电泳。如果需要使用非变性胶,也必须在上样前使RNA变性。使用百奥莱博优化的上样/变性/染色三用溶液RNAload可以使RNA在非变性胶上电泳时也有较好分辨率。使用非变性胶时,可以使用TAE或超快电泳液SuperBuffer-2,不要使用TBE缓冲液,因为TBE中的硼*(代"酸")能与RNA的多羟基形成复合物,RNA 很难形成锐利的条带。
Q:如何确认和去处除污染的基因组DNA?
A:如果怀疑有DNA污染,可以用RNase处理RNA样品,然后再电泳。如果上样孔里的红色荧光物不消失,则表示是基因组DNA污染。进一步确认可以使用PCR扩增法。去除污染的DNA可以使用5分钟柱式DNA 清除剂、非酶的DNA 去除剂DNA Scavenger或RNase-free DNase,由于RNase-free DNase一般都有残留的RNase污染,所以必须严格按照厂家提供的使用说明书进行操作。
北京百莱博科技有限公司专业生产供应销*(代"售")生物试剂、化学试剂、抗原抗体、血清血浆、Elisa试剂盒,更多试剂产品需求,欢迎来电咨询选购SYBR Green Ⅱ核酸染料(10000×)厂家价格。
温馨提示:不可用于临床ZL。