特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、YL及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产销*(代"售")柱式腐殖酸清除剂北京厂家现货,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:柱式腐殖酸清除剂北京厂家现货
规格:30次
产地:国产|进口
英文名:Column Humic Acid Scavenger
品Pai:百奥莱博
用绝大多数文献报道的方法从土壤或湖海沉积物中提取的DNA都含有棕黑色或黑色的腐殖酸的污染,用百奥莱博的土壤DNA提取试剂盒从泥碳(腐殖酸含量超过50%)等腐殖酸丰富的土壤样品中提取的DNA也有腐殖酸污染,它们往往对PCR等后续反应有极大的YZ作用。本产品专门用于从土壤DNA样品中清除腐殖酸污染。
产品特点:
1.去污染效果好,能使腐殖酸的浓度降低10倍以上。
2.DNA回收率高,一般都在80%以上。
3.操作过程简单快速,只需要10分钟。
4.扩容性好,可小规模操作,也可以大规模操作。
5.处理后的样品原液或稍微稀释后即可用于PCR。
试剂盒组成:
成分 | 规格 |
专用上柱液 | 9ml |
离心吸附柱 | 30套 |
通用洗柱液 | 30ml |
DNA洗脱液 | 10ml |
说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输及保存,有效期一年。
使用方法:1.将0.3mL专用上柱液与50μl或50μl以下的含腐殖酸的DNA溶液轻柔混匀。如果DNA溶液体积超过50μl,专用上柱液的体积需按1:6(DNA溶液:专用上柱液)的比例相应增加。不要剧烈震荡,否则DNA容易断裂。
2. 将离心管中的溶液转移到离心吸附柱中,套上收集管,放于离心管架上,静置3~5分钟,12000~15000g离心1分钟并倒掉收集管中的液体。若一次加不完,可分两次加入并离心。
3. 加入0.5mL通用洗柱液于离心柱中,12000~15000g离心1分钟,倒弃收集管中的废液。
4. 重复第3步操作1次。
5. 12000~15000g离心1分钟以去除离心柱中的残留液体。
6. 将离心柱置于一新的干净的离心管(自备)中,加入50μl通用洗脱液,静置3~5分钟,12000~15000g离心1分钟。
7.离心管底部所得溶液即为纯化的DNA溶液,可立即用于后续实验或者放冰箱长期保存。
使用效果:
图注:从泥碳(腐殖酸含量大于60%)中提取的DNA用本产品处理前(B)和处理后(A)的颜色对比。处理前OD340为4.0(4为所用分光光度计的上限,实际读数可能远高于4),处理后降低到0.3。处理前的原液、10倍和100倍稀释液均无PCR扩增,而处理后均可以扩增。
疑难解答:Q: 如何判断提取的DNA没有腐植酸污染?
A:方法一是目测法,即看得到的溶液是否无色。如果呈淡棕黑色或淡黄色,说明可能是少量残留的未除尽的腐植酸。方法二是检测ZD光吸收。注意:有腐植酸污染并不表示DNA不能使用,有的腐殖酸并不YZPCR扩增。
Q: 腐殖酸的ZD吸收波长是多少?
A:腐植酸(humic acid)是一大类呈棕黑色或黑色的物质,其结构千差万别,土壤中腐殖酸的组成和特点随土壤不同而不同,所以其ZD吸收波长也各不相同。有的土壤的腐殖酸的ZD吸收波长在260nm(见Appl. Environ. Microbiol.,63:4993,1997),有的则在340nm,所以用特定的波长测定OD值时波长的选定要根据土壤而决定。Sigma,Fluka等公司出售的腐植酸产品成分一般比较简单,其ZD吸收波长不能推广到成分更为复杂的土壤腐殖酸样品。
Q:是否腐植酸都会YZ后续的DNA反应?
A:否,因为腐植酸是一大类物质的统称,他们的结构和特性各不相同,所以是否对后续反应有影响通过实验来验证。如果用提取的DNA溶液原液进行反应而反应没发生,而对照样品(已知的不含污染的DNA)能够发生,说明可能有YZ作用。
Q:除本方法外,还有什么有效方法去除DNA样品中的腐植酸?
A:可以先电泳,然后用超大片段胶回收试剂Magic Gel DNArc(BTN60706)纯化DNA,如此得到的DNA原液一般可以直接扩增。
Q:本产品与柱式DNArc有何区别?
A:本产品由柱式DNArc改进而来,主要区别一是使用了不同的上柱液,减少了硅胶膜对DNA的非特异吸附,更适用于微量DNA样品;二是上柱液中含有腐殖酸去除试剂,适合于土壤DNA样品。
Q:在用土壤DNA进行细菌专一性PCR时,为何没加DNA模版的阴性对照有扩增产物出现?
A:这是由于使用的Taq DNA聚合酶一般从E.coli表达菌株中提取,提取过程中污染了E.coli的基因组DNA,而使用的广谱细菌专一性引物可以识别所有细菌DNA基因组DNA模版,所以会产生扩增。建议使用高质量的Taq DNA聚合酶。
柱式腐殖酸清除剂北京厂家现货极具性价比,此外,我公司正火爆促销以下产品:
·一步法单菌落质粒DNA提取试剂盒
编号:BTN70804
英文名称:One-step single colony plasmid DNA extraction Kit
规格:50次
本试剂盒是在一步式质粒DNA提取试剂盒(BTN70301)基础上开发的、能够从单个菌落快速提取质粒DNA的产品。它之所以能够从单个菌落中提取到可以用常规电泳方法检测得到的质粒DNA是由于一步式细菌裂解技术能够使细菌释放出其几乎所有的质粒DNA。
试剂盒特点:1. 不需过夜培养细菌就可以提取质粒DNA,能为研究人员节约一天的宝贵时间。
2.快速,整个过程只需要不到十分钟(对一个样品而言)。
3.一步式裂解细菌,不使用强碱溶液,对DNA 损伤小。
4. 得到的质粒DNA 足够1-2次电泳或酶切实验,足够多次PCR、测序和细菌转化实验。
5.适用于高拷贝、中拷贝和低拷贝的质粒。
试剂盒组成: 成分 | 规格 |
溶液A | 5ml |
离心吸附柱 | 50只 |
离心吸附柱收集管 | 50只 |
通用预洗液 | 50ml |
通用洗柱液 | 100ml |
DNA洗脱液2.0 | 10ml |
说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输及保存(溶液A需要4℃保存),有效期一年。
使用方法:1. 用吸头挑取一个直径在2 mm以上的菌落到100μl一步法单菌落质粒DNA提取试剂盒溶液A中(溶液A用前摇匀),充分吹打或振荡裂解直到裂解液变澄清。
2. 直接将裂解液全部转移到离心吸附柱中,室温静置2分钟使质粒DNA与膜结合。室温12000~15000g离心半分钟,弃穿透液。
3.在离心吸附柱中加入0.7mL的通用预洗液,室温12000~15000g离心半分钟,弃穿透液。注意: 如果通用预洗液放置在低温产生了沉淀,用前需要加热到60℃左右使之融化,混匀后再用。
4. 再在离心吸附柱中加入0.3mL的通用预洗液,室温12000~15000g离心半分钟,弃穿透液。此步预洗别省略,否则DNA 纯度不高。
5.在离心吸附柱中加入0.7mL的通用洗柱液,室温12000~15000g离心半分钟,弃穿透液。
6. 再在离心吸附柱中加入0.7mL的通用洗柱液,室温12000~15000g离心半分钟,弃穿透液。此为第二次洗涤。
7. 再在离心吸附柱中加入0.4mL的通用洗柱液,室温12000~15000g离心半分钟,弃穿透液。此为第三次洗涤,如果不洗涤三次,ZH得到的质粒DNA的OD260和280的比值达不到1.8。
8.室温12000~15000g离心半分钟,甩干残留液体。注意:此步不能省略,否则残留乙醇会影响后续的电泳上样(DNA 沉不到加样孔里去)和酶反应。
9. 将离心柱置于一个新的1.5mL自备塑料离心管中,加入30-100μl DNA洗脱液2.0,室温放置2分钟。如果将DNA 洗脱液2.0预热到65-80℃,则效果更好。
10.室温12000~15000g离心半分钟,离心管底部溶液即为质粒DNA,可以直接用于后续实验或放冰箱长期保存。
柱式腐殖酸清除剂北京厂家现货关键词:Column Humic Acid Scavenger,BTN60801,柱式腐殖酸清除剂
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·MTT检测试剂盒
编号:BTN111105
英文名称:MTT Assay Kit
规格:500次
MTT广泛用于检测细胞生长,其原理是MTT可以被活细胞线粒体内的脱*酶还原生成深紫色的formazan结晶,而死细胞则无此活性。深紫色的formazan结晶被溶解后可以通过测定490nm波长的光吸收而测定出其浓度,并由此推测出细胞的活力,细胞增殖越旺盛,则吸光度越高;细胞毒性越大,则吸光度越低。其原理如下:
产品特点:1.采用独特的Formazan溶解液,可以充分溶解formazan,减少误差。
2.背景低,灵敏度高,线性范围宽,重复性好。
3.本产品为足够500次(5个96孔细胞培养板)微孔板检测。
4.可用于生物活性因子活性检测、抗肿瘤药物筛选、细胞毒性试验、肿瘤放射敏感性测定等。
试剂盒组成: 成分 | 规格 |
溶液A | 5ml |
溶液B | 50ml |
说明书 | 1份 |
储存条件:低温运输、-20℃保存(但溶液B也可以常温运输和保存),有效期一年。
使用方法:下面操作是检测细胞毒性的试验,其他应用跟此类似或更简单(如生长曲线试验),操作步骤可以以此为基础稍作修改即可,故不再赘述。
㈠、接种细胞
1.按常规胰酶消化法消化汇合的单层细胞,收集到含血清的培养基中。
2.200g离心5分钟收集细胞沉淀。
3.用培养基重悬细胞沉淀,制备成单细胞悬浮液并计数。
4.将细胞稀释到2.5×10³个/mL~5×10⁴个/mL之间(需要根据细胞的生长速度决定),如果不知道生长数度,一般可以稀释到1×10⁴个/mL。
5.将足够量的细胞悬液转移到培养皿中(便于用排枪取样)。一个96孔板的MTT检测需要约20mL的细胞悬液。
6.用排枪在96孔板除的第2-11列各孔正ZY加入200μL细胞悬液(对正常细胞)。如果是肿瘤细胞,则加入100μL肿瘤细胞悬液和100μL培养基(总体积为200μL)。注意:一定要把细胞加在孔的正中,否则细胞会聚集在孔的角落处,影响试验。
7.用排枪在96孔板除的第1和第12各孔中加入跟细胞悬液等体积的培养基。第1 列各孔将作为+培养基-细胞+MTT对照(用于测OD时调零),第12列加培养基的作用是减少边缘效应对第11 列反应的影响。
8.按常规细胞培养方法在37℃和5% CO2条件下孵育1-3天,使细胞进入指数生长期。
㈡、药物处理
9.用培养基将药物稀释到8个待测浓度(如果不知道待测浓度,则需要预试验确定),一般一种药物需要做3块平行板。
10.去除第2到第11列(共10列)各孔中的培养基(不要触动细胞),保留第1 列和第12列各孔中的培养基。
11.在第2和第11列(共2列)的各孔中加入200μL新鲜培养基,这些孔将作为+培养基+细胞-药物的对照。
12.在第3到第10列(共8列)各孔中加入8个浓度梯度的待测药物,每列加入一个浓度的药物。
13.按常规方法把96孔板继续放在在37℃和5% CO2条件下孵育一定的时间,此段时间即为药物处理细胞的时间,由用户自己决定。
14.处理结束后去除第2 到第11列(共10列,均含细胞)所有孔中的培养基,并再加入100μL新鲜培养基。
15.每天换培养使细胞数量扩增2-3倍(所需时间随细胞不同而不同)。
㈢、存活细胞计数
16.在生长末期,去除第1到第11列各孔中的培养基后,再加入100μL新鲜培养基和10μL溶液A(含MTT成分),用锡箔包裹住96孔板后放在37℃和5% CO2条件下继续培养4-8小时。注意:溶液A在低温情况下会凝固,使用前请室温放置或20-25℃水浴至全部溶解,摇匀后使用。MTT有致癌性,一定要带手套操作。
17.小心吸弃孔内培养基(含溶液A)。由于培养基可能会影响光吸收,尽可能去除。
18.每孔加入100μL溶液B,置摇床上低速振荡10分钟,使MTT形成的formazan结晶物充分溶解。
19.由于产物不稳定,故需要立即在酶联免疫检测仪上选择490nm测定吸光度。
注意:用第1 列各孔(+培养基-细胞+MTT对照)调零。
20.计数同样处理的各次重复的平均值。
21.以药物浓度为横轴,以吸光度为纵轴绘制曲线。由于各处理吸光度JD值差别很大,一般需将其转化成生长YZ率(以不加药物的第2和第11列各孔数据的平均数作为100%),这样便于计算出IC50,用于各种药物处理效果的比较。注意:如果测生长曲线,则以时间为横轴。正常生长曲线一般呈现S型,具有促进作用的则斜率加大。
柱式腐殖酸清除剂北京厂家现货关键词:Column Humic Acid Scavenger,BTN60801,柱式腐殖酸清除剂
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PY02-320 嗜盐性试验培养基 250克
9067-32-7 Sodium Hyaluronate 透明质酸*
62758-13-8 Resazurin sodiu*(代"m") salt刃天青
100684-32-0 肌球蛋白(肌红蛋白) Myoglobin
茜素蓝S N-Acetyl-D-tryptophan 66675-89-6
ARB13424 鸡一氧化*(代"氮")(NO)尿液中含量检测 Chicken nitric oxide,no ELISA KIT
ARB10885 人抗流行性出血热病毒抗体IgG(EHF)免费代测 Human anti-epidemic hemorrhagic fever virus igG antibody,ehf igG ELISA KIT
ARB10629 人血清总补体(CH50)Elisa定量检测 Human 50% complement hemolysis,ch50 ELISA KIT
71-30-7 胞嘧啶 Cytosine
ARB11844 人凝血因子X(FX)酶联免疫定量检测 Human coagulation factor x,fx ELISA KIT
PY02-015 硫乙醇酸盐流体培养基 250克
BL0456 MOPSO 3-(N-玛啡啉)-羟基丙磺酸
ARB13094 小鼠毒性休克综合征毒素1(TSST-1)ELISA代测服务 Mouse toxic shock syndrome toxin,tsst-1 ELISA KIT
薄荷脑 CM Sepharose CL-6B 2216-51-5
F030308 胶体金标记兔抗人血清白蛋白抗体 Rabbit Anti-HSA*GOLD
三癸酸丙三醇酯 Lysine Sepharose 4B 621-71-6
ARB12309 大鼠抗凝血酶受体(ATR)免费代测 Rat anti-thrombin receptor,atr ELISA KIT
ARB11808 人鼻咽癌(NPC)Elisa分析 Human nasopharyngeal carcinoma,npc ELISA KIT
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温馨提示:不可用于临床ZL。