2×pfu PCR MasterMix北京现货促销

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、YL及其他非科研用途。

北京百奥莱博主要从事生物试剂的生产和销*(代"售")，产品线涵盖2×pfu PCR MasterMix北京现货促销在内的分子生物学试剂产品，还包括PCR及荧光定量PCR、核酸提取试剂盒类、样本核酸保护试剂、核酸提取、克隆与转化、蛋白纯化、蛋白检测、免疫组化、细胞凋亡与抗体等。

名称：2×pfu PCR MasterMix北京现货促销
编号：RFT093
产地：国产|进口
本品包含pfu DNA聚合酶、dNTPs、Mg2+、反应缓冲液、PCR反应的增强剂和优化剂以及稳定剂，浓度为2×。使用时，只需补加实验所需的引物和模板后即可进行PCR反应，可ZD限度的减少人为误差，具有快速简便、稳定性好等优点。用于高保真的DNA片段的扩增。使用该产品得到的PCR扩增产物为平滑末端，不可以直接用于TA克隆，要通过平滑末端克隆法进行克隆。以50μl PCR反应体系为例，每次使用25μl 2×MasterMix，500μl可做20次 50μl PCR反应。

质量控制：以λDNA为模板，可以很好扩增5kb的DNA片段；以水稻基因组为模板，可以很好扩增3.2kb的DNA片段。

使用方法;
1、冰浴中彻底融化2×MasterMix，混匀后Minispin将溶液收集到管底。
2、按照下表在0.2ml PCR管中制备反应体系：

 

	50μl反应体系	终浓度
2×MasterMix	25μl	1×
上游引物 10μM	1-5μl	0.2-0.8μM
下游引物 10μM	1-5μl	0.2-0.8μM
模板	×μl	10pg-1μg
水	补至50μl

3. 快甩离心将反应液收集到管底。
4、PCR仪如果没有热盖加热的话，补加25μl矿物油。
5、PCR仪上执行以下程序：

步骤	温度	时间	循环数
初始变性	94℃	5 min	1
变性	94℃	30 sec	25-40*
退火	Tm-5℃*	30 sec
延伸	72℃	0.5kb/min
ZH延伸	72℃	5 min	1

注： PCR 反应条件视模板、引物等的结构条件不同而各异。在实际操作中需根据模板、目的片段的大小、碱基序列和引物的长短等具体情况，设定ZJ的反应条件(温度、时间等)。
6、电泳检测。
注：使用含染料的2×MasterMix可以直接上样；不含染料的2×MasterMix要与6×loading buffer混合后上样。

储存条件：-20℃，避免反复冻融。

除2×pfu PCR MasterMix北京现货促销外，我公司正在打折促销以下产品：
二安替比林甲*(代"烷") Adenosine 1251-85-0
BTN70801 非酶DNA清除剂-2 DNA Erasol-2
145224-94-8 MES   2-(N-玛啡啉)乙磺酸
L-谷*酸二甲酯盐*(代"酸")盐 Copper gluconate 23150-65-4
7585-39-9 β-环糊精
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BL0963 封闭兔血清正常(原液)
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ARB11981 大鼠E选择素(E-SelectIn/CD62E)含量测试 Rat e-selectin ELISA KIT
NF-269 冻干纤维蛋白(Fg)标准血清
BTN131012 萤火虫荧光素 Luciferin
L-丙交酯 Ferric citrate 4511-42-6
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*基琼脂糖凝胶4B Veratryl alcohol
J0203          兔抗人血清白蛋白抗血清            
ARB10667 人血管紧张素Ⅱ受体1(ANGⅡR-1)Elisa方法检测 Human angiotension Ⅱ receptor 1,angⅡr-1 ELISA KIT
糊精 Sodium 4-aminohippurate 9004-53-9
ARB12885 小鼠叶酸(FA)Elisa定量检测 Mouse folic acid,fa ELISA KIT
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·JM109化学感受态细胞
编号：RFT113
英文名称：JM109 Competent cell
规格：20×100μl
本公司生产的JM109感受态细胞采用经特殊工艺处理得到，可用于DNA的化学转化。使用pUC18质粒检测，转化效率可达108cfu/μg，-70℃保存几个月转化效率不发生改变。

基因型：endA1 recA1 gyrA96 thi-1 hsdR17 (rk-,mk+) relA1 supE44 D (lac-proAB) [F′traD36 proAB laqI qZΔM15]

特点：用于蓝白斑筛选；recA1和endA1的突变有利于克隆DNA的稳定和高纯度质粒DNA的提取。

操作方法：(以下操作均按无菌条件的标准进行)
1、取感受态细胞置于冰浴中，如需分装可将刚融化细胞悬液分装到无菌预冷的离心管中，置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100μl，可以根据实际情况分装使用。应注意所用DNA体积不要超过感受态细胞悬液体积的十分之一。以下实验以100μl感受态细胞为例。
2、向感受态细胞悬液中加入目的DNA(50μl的感受态细胞能够被1 ng超螺旋质粒DNA所饱和)，轻轻旋转离心管以混匀内容物，在冰浴中静置30分钟。
3、将离心管置于42℃水浴中放置45秒，然后快速将管转移到冰浴中，使细胞冷却2-3分钟，该过程不要摇动离心管。
4、向每个离心管中加入500μl 无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素)， 混匀后置于37℃摇床振荡培养45分钟(150转/分钟)，目的是使质粒上相关的抗性标记基因表达，使菌体复苏。
5、将离心管内容物混匀，吸取100μl已转化的感受态细胞加到含相应抗生素的SOB或LB固体琼脂培养基上，用无菌的弯头玻棒轻轻的将细胞均匀涂开。将平板置于室温直至液体被吸收，倒置平板，37℃培养12—16小时。
注意：涂布用量可根据具体实验来调整。如转化的DNA总量较多，可取更少量转化产物涂布平板；反之，如转化的DNA总量较少，可取200—300μl转化产物涂布平板。如果预计的克隆较少，可通过离心(4,000 rpm, 2分钟)后吸除部分培养液，悬浮菌体后将其涂布于一个平板中。(涂布剩余的菌液可置于4℃保存，如果次日的转化菌落数过少可以将剩下的菌液再涂布新的培养板)

注意事项：
1、感受态细胞应保存在-70℃，不可多次冻融和放置时间过长，以避免感受态细胞的转化效率。
2、进行转化操作时，应根据相应温度及无菌条件的要求进行。
3、为防止转化实验不成功，可以保留部分连接反应液，以重新转化，将损失降到ZD。

储存条件：-70℃，有效期6个月。


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PY02-160  明胶培养基基础  250克  
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6915-15-7 DL-Malic acid DL-苹果酸

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