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北京Western一抗二抗清除剂(酸性)价格厂家是高品质的免疫检测产品,由北京百奥莱博供应,用于生化研究,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多Western一抗二抗清除剂(酸性)等免疫检测产品请联系我司咨询订购。
名称:北京Western一抗二抗清除剂(酸性)价格厂家
英文名:Antibody Stripping buffer(Acidic)
编号:YT074
产地:国产|进口
品Pai:百奥莱博
本品用于Western中转移了蛋白的膜的重复利用。在Western中完成了一抗二抗结合和后续的化学发光检测后,有时还需要检测tubulin、actin等表达量相对稳定的蛋白作为参照,或检测其它蛋白进行比较。通过使用一抗二抗去除液,充分去除一抗二抗,可以非常方便地重新利用使用过的膜检测其它蛋白。和重新跑一个SDS-PAGE胶相比,不仅省时省力,而且可以消除重新上样而带来的误差,使可比性更强。
使用Western一抗二抗去除液多次重复使用同一张膜,会导致蛋白信号的减弱。但是,本Western一抗二抗去除液,经过多个抗体的检测试验,通常可以重复利用膜3-5次。使用本试剂只需大约40-80分钟即可实现蛋白膜的重复使用,然后可以进行封闭等后续的Western操作。
百奥莱博的不同的Western一抗二抗去除液主要在去除结合的一抗二抗的原理方面略有不同。分别依靠去垢剂、酸性、碱性、还原剂、螯合剂、盐浓度以及一些特殊试剂等的不同组合来解除一抗二抗的结合,同时又不会导致转移到膜上的蛋白的损失。
抗体清除剂选型表:
产品编号 | YT071 | YT072 | YT073 | YT074 |
产品名称 | Western一抗二抗清除剂(强碱性) | Western一抗二抗清除剂(弱碱性) | Western一抗二抗清除剂(中性) | Western一抗二抗清除剂(酸性) |
产品包装 | 250ml | 250ml | 250ml | 250ml |
pH | 强碱性 | 弱碱性 | 中性 | 酸性 |
对于膜上蛋白的保留效果 | 好 | 好 | 好 | 好 |
对于一抗二抗的去除效果 | 好 | 好 | 好 | 好 |
去除一抗二抗所需时间 | 15-20分钟 | 20-30分钟 | 20-30分钟 | 40-80分钟 |
适用膜的类型 | PVDF和NC | PVDF和NC | 仅PVDF | PVDF和NC |
腐蚀性 | 强 | 弱 | 无 | 弱 |
用于普通的Western检测时蛋白膜上一抗二抗的去除可以任选一种去除液。如果是NC膜,即硝酸纤维素膜时,不宜选用YT071N。从时间角度考虑,强碱性、弱碱性和中性的去除液所需的时间都比较短,可以优先考虑。从价格因素考虑,强碱性的去除液性价比ZG。从安全性考虑,中性的去除液由于没有腐蚀性而表现出更高的安全性。弱碱性和弱酸性一抗二抗去除液的安全性次之。但只要正确操作,并进行适当防护,使用强碱性的一抗二抗去除液也是完全可行的。
对于特定的抗原和抗体,很难说哪一种Western一抗二抗去除液的效果。在遇到一抗二抗去除效果欠佳时,可以考虑适当延长一抗二抗去除液的孵育时间,同时确保孵育时的温度不低于20℃。温度过低时一抗二抗的去除效果会下降。同时也可以考虑尝试其它的一抗二抗去除液,以摸索出ZJ的适合您实验条件的Western一抗二抗去除液。
注意事项:
1. 使用辣根过氧化物酶(HRP),任何一次封闭(blocking)都应当使用5%脱脂牛奶,如果使用碱性磷酸酯酶,任何一次封闭都应当使用酪蛋白(casein)。
2. 为取得ZJ效果,推荐使用PVDF膜。但硝酸纤维素膜也可以使用本Western一抗二抗去除液。
3. 使用化学发光试剂进行的Western检测适用本试剂。使用非化学发光试剂进行的Western检测,例如DAB,NBT/BCIP,不适用于本试剂。
4. 本Western一抗二抗去除液有轻微腐蚀性,使用时请注意防护。
储存条件:室温,有效期一年。
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·ProteasomeYZ剂(MG-132)
编号:YT335
英文名称:Z-Leu-Leu-Leu-CHO
规格:20mg/ml×50μl|5mg|25mg
本品是一种常用的ProteasomeYZ剂,即蛋白酶体YZ剂。MG-132可以通透细胞,选择性YZProteasome,Ki=4nM。可以激活JNK1并YZNF-κB的激活(IC50=3μM)。在10μM时可以诱导PC12细胞产生neurite outgrowth。
CAS:133407-82-6
分子式:C26H41N3O5
分子量:475.62
纯度:>99%
注意事项:本MG-132在4℃、冰浴等较低温度情况下会凝固而粘在离心管管底、管壁或管盖内,可以20-25℃水浴温育片刻至 全部融解后使用。
储存条件:-20℃,有效期半年。
·生物素标记DNA试剂盒(TdT加尾法)
编号:YT030
英文名称:Biotin 3" End DNA Labeling Kit
规格:20次
本试剂盒是一种通过TdT把生物素标记的dUTP添加到DNA 3"末端的试剂盒。通常DNA的3"末端被标记后不会干扰杂交反应,也不会干扰基于序列特异性蛋白结合的EMSA检测;因此生物素标记的DNA探针可以用于常规的Northern、Southern、EMSA(即gel shift)以及colony hybridization或原位杂交等。
TdT可以在不依赖于模板的情况下催化在DNA的3"-OH端加上dNTP的反应。关于TdT催化双链DNA末端加dNTP的反应效率,3"端突出的双链DNA要比平端或3"端缩进的双链DNA高很多。TdT催化单链DNA末端加dNTP的反应效率要比双链DNA高很多。在适当的条件下,TdT也可以催化RNA 3"末端加NTP的反应。
本试剂盒适合标记纯化的单链DNA,如果用于标记EMSA探针,可以在单链标记后再进行退火。本试剂盒中提供了已经用生物素标记好的Biotin-Control Oligo,可以用作检测DNA标记效率的对照。如果每个标记反应的探针量为5pmol,本试剂盒可以用于20个标记反应。
试剂盒组分:
TdT Buffer(5X) | 250μl |
TdT(10U/μl) | 20μl |
Biotin-11-dUTP(5μM) | 100μl |
Biotin-Control Oligo(0.4μM) | 100μl |
Ultrapure water | 1ml |
探针标记终止液 | 200μl |
TE | 15ml |
储存条件:-20℃。
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·NF-κB凝胶迁移突变探针(10μM)
编号:YT232
英文名称:NF-κB Mutation Probe For EMSA(10μM)
规格:30μl
本探针是用于EMSA(也称gel shift)研究的NF-κB consensus oligonucleotide的突变体。可以作为EMSA探针-NF-κB的阴性对照,用于EMSA结合反应中突变探针的冷竞争反应等。一个包装的突变探针,如果用于同位素标记EMSA探针的突变探针冷竞争反应,可以进行90-180个突变探针的冷竞争反应。如果用于生物素标记探针的冷竞争时,可以进行约30个冷竞争反应。
NF-κB consensus oligo的序列如下:
5"-AGT TGA GGG GAC TTT CCC AGG C-3"
3"-TCA ACT CCC CTG AAA GGG TCC G-5"
EMSA突变探针-NF-κB中NF-κB的公认的结合位点发生了突变,从而使NF-κB无法和该突变探针结合。在探针冷竞争反应中,正常的标记探针和NF-κB的结合的条带会被YZ;而在突变探针冷竞争反应(cold competition)中,正常的标记探针和NF-κB的结合的条带不会被YZ。参考下图。
一个典型的EMSA/Gel- Shift分析图
1,阴性对照反应(标记探针);
2,常规反应(含激活的目的转录因子的核蛋白+标记探针);
3,探针冷竞争反应(含激活的目的转录因子的核蛋白+标记探针+标记探针100倍量的未标记探针);
4,突变探针的冷竞争反应(含激活的目的转录因子的核蛋白+标记探针+标记探针100倍量的未标记突变探针);
5,Super-shift反应(含激活的目的转录因子的核蛋白+标记探针+目的转录因子的特异抗体)。
注意事项:
1. 避免加热到40℃以上,温度过高会导致双链DNA探针解聚成单链。而单链无法用于EMSA研究。
2. 对于EMSA的详细操作可以参考我们的EMSA试剂盒的使用说明。
储存条件:-20℃,有效期一年。
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温馨提示:不可用于临床ZL。