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名称:北京促销SYBR Green I(10000×)电泳用价格
编号:XH019
产地:国产|进口
品Pai:百奥莱博
SYBR Green I是高灵敏的DNA荧光染料,适用于各种电泳分析,操作简单:无须脱色或冲洗。至少可检出20pg DNA,高于EB染色法25-100倍。SYBR Green I 与dsDNA结合荧光信号会增强800-1000倍,用SYBR Green I染色的凝胶样品荧光信号强,背景信号低。可适用于多种电泳分析。
SYBR Green I适合于多种凝胶电泳方法:琼脂糖凝胶,聚丙*(代"烯")酰胺凝胶电泳,脉冲电场凝胶电泳,和毛细管电泳等。
SYBR Green I与双链DNA的亲和力非常高,因此可以用做电泳前染色,对分子生物学中常用的酶(如:Taq酶、逆转录酶、内切酶、T4连接酶等)没有YZ作用。另外,SYBR Green I与EB相比,诱变能力大大降低。
SYBR Green I核酸染料特点
高灵敏:至少可检出20pg DNA,高于EB染色法25-100倍。
信噪比高:样品荧光信号强,背景信号低。
操作简单:无须脱色或冲洗。
适用范围广:可适用于多种电泳分析。
使用方便:不影响其它修饰酶作用。
安全性高:分子克隆上明确诱变能力很低
使用方法
SYBR Green I预染方法
1. 该方法适于琼脂糖凝胶电泳和PAGE凝胶电泳
2. 工作液的配制:用电泳缓冲液将10000×的SYBR GreenⅠ稀释100倍,即为SYBR GreenⅠ工作液。SYBR GreenⅠ工作液可以置2-8℃冷藏一个月以上。
3. 制胶:按常规方法制胶,不含任何染料。
4. 样品染色:向分析样品中加入SYBR GreenⅠ工作液和载样缓冲液,室温放置10分钟,使SYBR GreenⅠ与样品中DNA充分结合。SYBR GreenⅠ工作液加入量为总上样量的1/10。
5. DNA Marker染色:将5μL DNA Marker和1μLSYBR GreenⅠ工作液混匀,室温放置5分钟,使SYBR GreenⅠ与DNA充分结合。(商品Marker稀释2-5倍后再电泳,否则电泳条带会变形,特别是大片段。)
6. 上样、电泳:按常规操作。
SYBR Green I后染方法
1. 按照常规方法进行电泳。
2. 用PH=7.0-8.5的缓冲液(如:TAE,TBE或TE),按照10000:1的比例稀释SYBR GreenⅠ浓缩液,混匀,制成染色溶液。
3. 将染色溶液倒入合适的聚丙*(代"烯")容器中,放入凝胶,用铝箔等盖住容器使染料避光。室温振荡染色10-30分钟,染色时间因凝胶浓度和厚度而定。聚丙*(代"烯")酰胺凝胶直接在玻璃平皿上染色,将配好的工作溶液轻轻地倒在胶板上,让工作液均匀地覆盖整个胶板,并染色30分钟。玻璃平皿必须预先经过硅烷化溶液处理(避免染料吸附在玻璃表面上)。
4. 用紫外仪观测。
SYBR Green I使用注意事项
1. 在"SYBR GreenⅠ预染色方法"中,电泳时间不要超过2小时,否则SYBR GreenⅠ会从DNA上分离出来,会产生弥散状条带。
2. 在常规用酒精沉淀核酸的过程中,SYBR Green I可以全部从双链核酸上去掉。
3. 如果想对用 SYBR Green I 染过的胶进行Southern blots,建议在预杂化和杂化溶液中加入0.1%- 0.3%的SDS。
4. 在紫外照射透视下,与双链DNA接合的SYBR Green I呈现绿色荧光。如果胶中含有单链DNA则颜色为橘黄而不是绿色。
5. SYBR Green对玻璃和非聚丙*(代"烯")材料具有一定亲合力。建议在稀释、贮存、染色等使用过程中用聚丙*(代"烯")类容器。
北京促销SYBR Green I(10000×)电泳用价格正在火爆,除此之外,为您推荐下别产品:
·DH5α受体菌
编号:XH042
规格:1ml
基因型:F-,φ80dlacZ△M15, △(lacZYA-argF)U169, deoR, recA1, endA1, hsdR17(rk-,mk+ ), phoA, supE44, λ-, thi-1, gyrA96, relA1
细胞种类
α-互补性选择宿主 E.coli DH5α
E.coli DH5α在使用pUC系列质粒载体进行DNA转化时,由于载体DNA产生的LacZα多肽和DH5α编码的lacZ△M15相结合,从而显示β-半乳糖苷酶活性(α-互补性)。利用这一特性,可以很容易鉴别重组体菌株。DH5α可以用于制作基因库、进行亚克隆等,由于DH5α具有decR变异,可以作为较大质粒的宿主菌使用。
保存:所有受体菌均为甘油保存,-70℃可长期保存,-20℃可保存一年。
·动物基因组DNA提取试剂盒
编号:XH010
规格:50T/200T
原理简介
本试剂盒适用于动物组织及培养的细胞样本,用于从中提取基因组DNA。对于尾,骨等可用,但提取效果一般。独特的裂解缓冲液加上蛋白酶K等迅速去掉除DNA外的其他物质,并利用玻璃奶吸附DNA,进一步的去掉其他杂质,提取出来,得到的DNA可用于PCR/Real time-PCR,sequencing,Southern blot,mutant analysis,SNP 等下游应用实验。
注意事项
1.裂解液低温时可能出现析出和沉淀,可以在热水中温浴几分钟帮助重新溶解,恢复澄清透明后冷却到室温即可使用。
2.避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化,各溶液使用后应及时盖紧盖子。
3.RNaseA经常使用可放2-8度保存,蛋白酶K请放-20度保存。
4.同一样本,如果想大量提取,可以增加样本量,并且每一步试剂加量,但使用次数会成倍减少。
操作步骤
1.取不超过108个细胞),12,000rpm,离心30秒,尽可能的吸净上清。如果是组织,可用液氮研磨或者尽可能的剪碎,取不超过20mg,放入离心管中。
2.加入250ul裂解液,立即震荡混匀,可选做步骤:如需要去除RNA,可以加入10μl RNase A(10mg/ml)溶液,振荡混匀,室温放置5-10分钟。
3.加入10μl蛋白酶K(10mg/ml)溶液,颠倒混匀,65℃放置10-30分钟,期间颠倒3-5次,小心内心管盖受热开启。如30分钟沉淀无法完全消失,请注意第6步处理。
4,在上清中加入三倍体积无水乙醇,充分混匀。
5.12000rpm离心5分钟,吸去上清,核酸在沉淀中。
6.沉淀中加入500ul结合液,65℃水浴1-2分钟,核酸沉淀可溶解(如无法完全溶解,可转移上清到一新的离心管中,弃沉淀)。
6.玻璃奶摇匀。加入50ul摇匀的玻璃奶,混匀,室温放置2分钟,10000转/分钟离心1分钟,去上清;沉淀加入1ml 70%乙醇,振荡混匀,10000转/分钟离心1分钟,去上清,70%乙醇重复洗一次,再用无水乙醇洗一次。去上清,再次离心2分钟,用小吸头吸去上清。
7.室温放置10分钟(如果玻璃奶加量,请适当延长放置时间,此步为去除残余酒精,以免影响下游实验),加入50-100ul TE缓冲液混匀溶解,65℃水浴5分钟。离心,取上清为所提基因组。
8.电泳或者其他方法检测,进入下游实验。
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·植物线粒体提取试剂盒
编号:XH053
规格:50T/100T
二,说明
植物线粒体提取试剂盒可用于从植物叶片组织中分离出完整而纯化的线粒体。适合于田间采摘或者实验室培养的植物叶片中线粒体的制备。其制备物,可以被用于细胞凋亡、信号传递、代谢和蛋白组学等的研究。但不适用于进一步DNA提取。
三,操作步骤
1. 样本采集前处理:无论田间自然生长还是实验室组织培养,采摘前须避光生长24-48小时,以减少叶片组织中糖类及叶绿体含量。取适量Lysis Buffer,加入0.5% β-巯基乙醇,10ml Lysis Buffer加入50ulβ-巯基乙醇,混匀,形成Lysis Buffer/β-巯基乙醇溶液,此溶液可2-8度保存一个月。
2. 叶片用蒸馏水清洗2-3次,滤纸吸干,有条件请用液氮研磨叶片1-2克,研磨完后,取800mg左右研磨的叶片粉,加入1.5ml预冷的Lysis Buffer/β-巯基乙醇溶液,混匀。如果无条件(无液氮),请预冷研钵,取洗过的叶片1000 mg,用剪刀剪为碎块放入玻璃匀浆器或者研钵中。加入1.5ml预冷的Lysis Buffer/β-巯基乙醇溶液,冰上研磨至看不见明显组织块;
3. 将研磨物放置合适的离心管,4℃,1000× g 离心5 min;
4. 将上清转移到一新的离心管中,在沉淀中加入0.5ml Lysis Buffer/β-巯基乙醇溶液,混匀,再次4℃,1000× g 离心5 min,取上清;合并两次上清,将上清4℃ 1000× g 再次离心5 min。
5.取上清,加入一新的离心管中,4℃, 16,000 × g 离心10 min。离心后的上清含胞浆成分,可从中提取胞浆蛋白。将上清转移到新离心管,线粒体沉淀在管底。
6. 在线粒体沉淀中加入0.5 mL Wash Buffer重悬线粒体沉淀,4℃,1000× g 离心5 min;
7.取上清,加入一新的离心管中,4℃, 16,000 × g 离心10 min。弃上清,高纯度的线粒体沉淀在管底;
8. 用50 -100μL Store Buffer 或合适的反应缓冲液重悬线粒体沉淀,立即使用或-70℃保存。
四 注意事项:
1. 以离心力g计算正确的离心速度,不同的离心机可据此精确计算离心速度。
2. 进行Western Blot和2D-胶电泳,可直接在第7步的沉淀中加入上样缓冲液裂解线粒体。
3. β-巯基乙醇有毒,请注意通风及防护
五 储存:本试剂盒三个月内使用可4℃储存,长期可置-20℃。
一般低温度心机都有离心力显示,如果没有,可以用以下公式简单的换算。
G=1.11×(10-5)×R×[rpm]2
G为离心力,一般以g(重力加速度)的倍数来表示;
[rpm] 2即:转速的平方; R为半径,单位为厘米。
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BL1113 亲和硅烷
ARB11927 大鼠1,3-βD葡葡糖苷酶(1,3-βD-Glu)酶联免疫定量检测 Rat 1,3-βd glucosidase,1,3-βd-glu ELISA KIT
茶多酚 Purine-nucleoside phosphorylase 84650-60-2
F040306 小鼠IgG抗原 Mouse IgG
ARB12043 大鼠乙酰胆碱脂酶(AChE)含量检测 Rat acetylcholinesterase,ache ELISA KIT
γ-谷*酰-3-羟基-4-硝基*(代"*")胺单胺盐 Methyl β-D-glucopyranoside 63699-78-5
加拿大树胶 POPOP 8007-47-4
ARB13606 兔子肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量分析 Rabbit tumor necrosis factor α,tnfα ELISA KIT
CV0201 pSURE -T Simple 载体连接试剂盒
HC0080 PCR管(平盖)
NF-206 羊抗人IgG血清
56-86-0 L-Glutamic acid L-谷*酸
PY01-169 中性红 ind 25克
盐*(代"酸")前黄素 TMD-10 952-23-8
非诺贝特 Fmoc-D-Met-OH 49562-28-9
聚乙*(代"烯")醇磷酸铵 β-D-Glucan from barley
ARB12236 大鼠血管内皮生长因子(VEGF)定量分析 Rat vascular endothelial cell growth factor,vegf ELISA KIT
磷酸二**一水物 2,5-Dihydroxybenzaldehyde 10049-21-5
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温馨提示:不可用于临床ZL。