细胞膜可渗透钙离子荧光探针 探针标记及检测

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北京百奥莱博主要从事生物试剂的生产和销*(代"售")，产品线涵盖细胞膜可渗透*离子荧光探针 探针标记及检测在内的分子生物学试剂产品，还包括PCR及荧光定量PCR、核酸提取试剂盒类、样本核酸保护试剂、核酸提取、克隆与转化、蛋白纯化、蛋白检测、免疫组化、细胞凋亡与抗体等。

名称：细胞膜可渗透*离子荧光探针 探针标记及检测
产地：国产|进口
规格：50μg
英文名：Fura-2, AM, Cell Permeant
品Pai：百奥莱博
Fura-2是细胞生物学常用的一种*荧光探针，能特异性地结合Ca2+（结合比例为1:1），同时可发出荧光，结合Ca2+后的ZD激发波长从结合前的380nm向340nm（Ca2+饱和时）偏移，其发射荧光强度与结合Ca2+的浓度存在定量关系。一般用340nm和380nm波长激发Fura-2，通过使用与两种激发对应的荧光强度比率来计算细胞内的*离子浓度，这种比率测量方法可以消除不同细胞样品间荧光探针装载效率的差异，荧光探针的渗漏，细胞厚度差异等一些误差因素。Fura-2与Indo-1已成为目前使用最广泛的比率测量的*荧光指示剂。目前适用于Fura 2实验的设备有很多，但Fura-2特别适合于数字成像显微镜，使用该设备可更方便的调整激发波长，使探针结合*离子后在300-400nm的激发波长范围内扫描Fura-2的吸收偏移，在510nm处检测发射波长。

由于Fura-2是极性大的酸性化合物，无法进入细胞内，为此在其负性基团上结合乙酰氧甲酯，使其成为Fura-2/AM，该变化既增加了酯溶性又消除了负电荷，极大的提高了细胞渗透性。在细胞内，Fura-2/AM被酯酶水解成Fura-2后可与胞浆游离Ca2+可逆性结合。

CAS：108964-32-5
分子式：C44H47N3O24
分子量：1001.86
Ex/Em：363nm/512nm
溶解性：溶液DMSO.
储存条件：-20℃避光干燥。
结构式


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细胞膜可渗透*离子荧光探针 探针标记及检测关键词：Fura-2, AM, Cell Permeant,细胞膜可渗透*离子荧光探针,108964-32-5


·腔肠素f
编号：SY0237
英文名称：Coelenterazine f
规格：1×500μg
本品为粉末形式供应的腔肠素f（Coelenterazine f），与天然腔肠素结构上的WY差别在于将其R-1位酚基上的羟基替换成*（F），是水母发光蛋白（aequorin）的底物。当腔肠素f和水母蛋白（Apoaequorin）一起被部分氧化得以活化，生成腔肠素的亚稳态复合物（aequorin）。与天然腔肠素-水母蛋白（Apoaequorin）复合物产生的光子总数相比，此复合物仅产生80%的光子能。但是其优点在于：仅需非常少的时间来生成aequorin复合物（通常来说此步反应很慢，比如60min内仅有40%的天然腔肠素完成反应）。另外，当其与Ca2+接触，即可快速且高产量的发光，产能强度是天然腔肠素的20倍。具有的细胞渗透性。当需要极高的Ca2+检测灵敏度来研究水母蛋白再生实验，推荐使用本底物。

腔肠素（Coelenterazine）是自然界中资源最丰富的天然荧光素，是绝大多数海洋发光生物（超过75%）的光能贮存分子。腔肠素可作为许多荧光素酶的底物，比如海肾荧光素酶（Rluc），Gaussia分泌型荧光素酶（Gluc），以及包括水母发光蛋白（aequorin）和薮枝螅发光蛋白（Obelia）在内的光蛋白（Photoproteins）。其发光原理是：以腔肠素为底物的荧光素酶在有分子氧的条件下，氧化腔肠素，产生高能量的中间产物，并在此过程中发射蓝色光，峰值发射波长约为450~480nm。与甲虫（或萤火虫）荧光素/荧光素酶系统不同，腔肠素/荧光素酶系统不需要三磷酸腺苷（ATP），因此更便于体内生物荧光的研究。因此，腔肠素常用作基于荧光分析的报告基因检测以及活体动物检测的发光底物。

腔肠素还能在酶非依赖性的氧化体系中自发荧光，细胞和组织内的超氧阴离子和过氧化亚硝基阴离子能够增强该自发光信号，因此其也可用来检测细胞/组织内活性氧（ROS）水平。

腔肠素具有能量转移的特性— —生物发光共振能量转移（Bioluminescence Resonance Energy Transfer，BRET），利用此特性，当与荧光蛋白如GFP的突变体（增强的黄色荧光蛋白，EYFP）联合使用，在底物腔肠素存在的情况下，荧光素酶（如Rluc）催化底物发生蓝光，能量随之转移到EYFP上，发出绿光（~530nm）。这两个蛋白的相互作用可以通过Rluc融合蛋白和EYFP融合蛋白两者间的相互关系来评估，适用于研究蛋白-蛋白之间的相互关系。另外，由于BRET的信号可通过比较绿光和蓝光的量来进行测定，消减了因细胞数、细胞类型和其他实验变量而引起的数据变量，适用于高通量筛选如药物开发。

更为重要的一个功能，水母发光蛋白复合物（Aequorin）由22kDa的水母蛋白（Apoaequorin protein）、分子氧和底物腔肠素组成。只有当*离子（Ca2+）与该复合物结合后，腔肠素才能被氧化生成高能量产物Coelenteramide，同时释放出CO2和蓝色荧光（~466 nm）。正是此Ca2+依赖性的反应过程（见图1），使得腔肠素非常适用于监测活细胞内*离子水平。与常规的荧光*离子指示剂相比，其主要具有以下几个优点，1）能检测较大范围的*浓度 – 从0.1 μM至 >100μM；2）样品无自体荧光，背景荧光低于使用荧光*离子指示剂；虽然信号比使用荧光*离子指示剂弱，但是通过成像仪器可以得到更高的信噪比，因此具有更高的灵敏度。3）水母发光蛋白复合体能够稳定维持在细胞内，使其能够进行数小时至数天的*离子监测。



图1. 腔肠素作为水母发光蛋白辅助因子的Ca2+依赖反应流程

目前商业化的腔肠素应用最普遍的是天然腔肠素（Coelenterazine native），另外还有很多腔肠素衍生物如Coelenterazine h、Coelenterazine 400a、Coelenterazine cp、Coelenterazine f、Coelenterazine hcp、Coelenterazine n等被一一合成。理论上这些腔肠素可用于相同的实验，但是由于其发光波长，细胞膜渗透性，光量子效率上的差异，使得其在相同应用上表现出不同的实验效果。因此非常有必要根据具体实验目的选择最合适的腔肠素底物（见附录1，腔肠素及其衍生物的特性）。

CAS：123437-16-1
分子式：C26H20FN3O2
分子量：425.46
外观：黄色至褐色粉末
溶解性：溶于甲醇或者乙醇，不可溶于DMSO
纯度：＞95%（TLC）
结构：



运输和保存方法：冰袋运输。粉末-20℃避光干燥保存，保存在惰性气体下以避免接触空气。

注意事项
1）腔肠素f粉末使用惰性气体-氮气或氩气，在密封良好的塑料管中避光保存于-20℃，长期保存于-70℃。管内即使有少量空气进入，也可能造成f氧化失活，使量化分析的结果难以在不同试验间进行比较。
2）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。


细胞膜可渗透*离子荧光探针 探针标记及检测关键词：Fura-2, AM, Cell Permeant,细胞膜可渗透*离子荧光探针,108964-32-5


·3-吲哚丁酸
编号：SY0628
英文名称：3-Indole butyric acid (IBA)
规格：25g
本品为植物培养级别，可直接用于植物组织或细胞培养。吲哚-3-丁酸，英文名Indole-3-butyric Acid，缩写为IBA，一种生长素类植物激素，能促进植物扦插生根，提高发芽率、成活率等，是商业植物生根园艺产品中的重要原料。此外，IBA是吲哚-3-乙酸（IAA）的前体，后者在植物的生长调节方面起着主要作用。

中文别名：吲哚-3-丁酸; 4-(3-吲哚基)丁酸
英文别名：Indole-3-butyric Acid; 4-(3-Indolyl)butyric acid; 4-(1H-Indol-3-yl)butanoic acid
CAS：133-32-4
分子式：C12H13NO2
分子量：203.2
熔点：120-123℃
外观：白色或浅黄色结晶粉末
纯度：＞98%
溶解性：溶于乙醇、乙*(代"醚")和丙*(代"酮")，几乎不溶于水。
储存条件：室温
结构式：

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