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北京百奥莱博专业生产供应SYBR Green I 核酸凝胶染料 核酸电泳和回收,我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
名称:SYBR Green I 核酸凝胶染料 核酸电泳和回收
编号:SY0257
产地:国产|进口
品Pai:百奥莱博
规格:100μl
英文名:SYBR Green I (10,000×in DMSO)
本品是溶于DMSO的SYBR Green I 10,000×染液。SYBR Green I,一种灵敏度非常高的dsDNA荧光染料,常用于核酸琼脂糖凝胶/聚丙*(代"烯")酰胺凝胶电泳。SYBR Green I染料的ZD激发波长为497nm,但是在~290nm和~380nm处有二级激发峰。与DNA结合的SYBR Green I染料的荧光发射集中在520nm。因此,该染料可适用于多种凝胶检测仪。
独立实验室进行的艾姆斯试验表明SYBR Green I 的致突变性明显比*化乙锭要低得多,目前尚无关于SYBR Green I 染料对人体的致突变性或毒性的数据,但我们必须提醒用户注意,该染料能与DNA结合,因此,它应当被看做潜在诱变剂,在使用前小心谨慎。另外,在处理DMSO储存液时应特别小心,因为DMSO能促进有机分子进入组织。染料的处理应当符合当地的规定。
使用方法
【开始使用前】
使用前将本品取出并回温至室温,使DMSO彻底解冻、溶液均一。于离心机上短暂离心确保所有溶液至管底。DY次使用时可将本品分装成多个小份后冻存,小份染料将更快速熔解。
一、 染色
1 电泳后DNA染色
1)在琼脂糖或非变性聚丙*(代"烯")酰胺凝胶上进行电泳。
【注】:TBE和TAE缓冲液均适合于SYBR Green I染料。
2)用TE、TAE或TBE将SYBR Green I进行10000倍稀释。
【注】:
① SYBR Green I染色对pH敏感,为获得ZJ的灵敏度,应确认在染色温度下染色液的pH值在7.5-8.0之间(pH8.0更佳)。
② 用水配制的染色液不如用缓冲液配制的稳定,为得到较好灵敏度,必须在24h内使用。
3)染液要充分覆盖凝胶,室温轻摇孵育10-40min。
【注】:
① 推荐用塑料而不是玻璃容器来储存染色液,应为染料会吸附到玻璃表面。
② 染色过程避光进行,建议在容器上加盖铝箔或置于暗处。
③ 凝胶厚度及琼脂糖或聚丙*(代"烯")酰胺的比例不同,染色时间将有所不同。
④ 无需脱色。
⑤ 染液可置暗处(是冷藏)放置至少1周,重复使用最多4次。
2 电泳前DNA染色
1)一般选择配制成SYBR Green I预制凝胶来实验。
临灌胶前将SYBR Green I储存液按照1:10000倍稀释到凝胶溶液中,预制成含有SYBR Green I染料的琼脂糖或非变性聚丙*(代"烯")酰胺凝胶。预制的SYBR Green I凝胶的DNA检测下限(大约为30-40pg/条带),略高于电泳后染色(<20pg/条带)。此外,在SYBR Green I凝胶中的DNA片段迁移率明显比无染料凝胶中的相同片段慢。
2)作为DNA模板预染标记。
一般而言,DNA在电泳前与染料工作液至少孵育15min。
二、 凝胶成像(紫外或蓝光透射仪或紫外顶置光源直射)
可在紫外或蓝光光源下轻松观察到用SYBR Green I染色的DNA。
三、从双链DNA中去除SYBR Green I
将SYBR Green I染色的DNA移至100mM NaCl中,加入2.5倍体积的无水或95%的乙醇。在冰上孵育约20min,在4℃离心至少10min。去除乙醇,并用70%乙醇洗涤沉淀。让乙醇挥发,用TE重悬双链DNA即可。
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·人源氧化低密度脂蛋白
编号:SY0439
英文名称:Human Ox-LDL
规格:1mg
我司提供的人源氧化低密度脂蛋白(Human Oxidized Low Density Lipoprotein,Ox-LDL),是由过度铜离子介导人血浆来源的LDL进行的氧化修饰。新鲜血浆经检测为HCV,HBsAg和HIV阴性。本产品为无菌包装,可以直接稀释使用。本Ox-LDL广泛用于脂质代谢的研究。另外我们还提供High Ox-LDL可产生明显的氧化应激,能够用来诱导细胞凋亡,并建立细胞损伤模型。除提供Ox-LDL,我们还提供人源乙酰化LDL(Ac-LDL),以及荧光标记的LDL。
LDL是由极低密度脂蛋白(VLDL)转变而来,主要功能是把胆固醇运输到全身各处细胞,运输到肝脏合成胆酸,其可用于研究受体介导的内吞作用过程,尤其是在动脉粥样硬化等疾病中,其血浆来源的LDL可用于研究LDL在功能和代谢中的氧化作用。
氧化的LDL(Ox-LDL)是修饰LDL中的一类。修饰的LDL除包括氧化修饰的LDL外,还包括乙酰化LDL及丙二醛(MDA)、4-羟烯酸(4-HNE)直接结合的LDL,这些未经氧化修饰而仅经一般化学修饰的LDL称为衍化的LDL。不同于衍化的LDL,Ox-LDL 的生理学独特性表现在:1)在细胞生理功能影响上,Ox-LDL可诱发细胞毒性作用,影响花生四烯酸的代谢,YZ胆固醇酯化作用等,但衍化的LDL无上述效应;2)Ox-LDL消耗LDL内源性抗氧化物质,使LDL上的维生素E含量下降,而MDA-LDL无上述效应;3)氧化修饰涉及脂质过氧化反应,LDL中的PUFAs被氧化。MDA对LDL修饰,是直接和ApoB-100结合成希夫氏碱,脂质过氧化反应轻微;4)氧化LDL在氧化程度低时,ApoB降解;在氧化程度高时,ApoB又可发生再聚合。MDA对LDL的修饰,ApoB无降解、聚合反应发生;5)Ox-LDL 产生的荧光峰波长为430nm,而MDA -LDL的荧光峰波长为460nm。Ox-LDL不经LDL受体代谢,由清道夫受体识别、结合、内吞饮入细胞并丧失正常的胆固醇代谢途径,引起细胞内脂质沉积,泡沫样变。
LDL氧化修饰的方式有很多种,常见的有:1)细胞介导的LDL氧化修饰,又称为生物氧化修饰的LDL。如内皮细胞,巨噬细胞,单核细胞都具有此功能;2)过度金属离子介导的LDL氧化修饰,如Ca2+,Fe2+等;还有其他形式的氧化修饰,包括物理方法如紫外线,或过氧化物酶催化。
蛋白纯度:>97%(琼脂糖凝胶电泳)
蛋白浓度:1.0~3.9 mg/ml(Lowry法)
外观:无色乳状液体
缓冲液配方(Buffer Formulation):<0.1 μM EDTA-Na2 in PBS, pH 7.4
氧化程度(Oxidized Ratio):TBARS检测(根据MDA的含量反映LDL的氧化程度)
起始LDL:0.1~0.5 nmol MDA/mg蛋白
Ox-LDL:20~26 nmol MDA/mg蛋白
储存条件:4℃,建议避光,有效期6周
SYBR Green I 核酸凝胶染料 核酸电泳和回收关键词:SY0257,SYBR Green I (10,000×in DMSO),SYBR Green I 核酸凝胶染料
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·AR-Luc荧光素酶报告基因质粒
编号:SY0094
英文名称:AR luciferase reporter plasmid
规格:1μg
AR荧光素酶报告基因(报告基因质粒)(AR luciferase reporter plasimd)是用于检测AR转录活性水平为目的的报告基因。Androgen Receptor(AR)属于核受体超家族中的类固醇受体,通过介导雄激素的作用调控多种基因的表达。
AR报告基因主要用于检测细胞中Androgen Receptor的活性、药物研究以及基因过表达和RNAi的表型研究等。
pGMAR-Lu是我公司改造后的哺乳动物真核表达载体,在其多克隆位点插入了多个AR结合位点,可以高灵敏度地检测AR的激活水平。同时,对载体中预测出的其它转录因子以外的结合位点进行了适当的突变,增加了质粒的转录因子结合特异性。由于质粒体积减小,使得AR报告基因质粒更易于转染。
质粒图谱

注意事项
本质粒未经我公司允许不得用于任何商业用途,也不得移交给订货人实验室以外的任何人或单位。
为了您的健康,实验操作时请穿实验服和带一次性手套。
使用说明
1. pGMAR-Lu可以采用常规转染方法转染哺乳动物细胞。用荧光素酶检测试剂盒或双荧光素酶检测试剂盒进行检测。
2. Androgen Receptor的激活剂,可作为AR报告基因的阳性对照。
储存条件:-20℃。
SYBR Green I 核酸凝胶染料 核酸电泳和回收关键词:SY0257,SYBR Green I (10,000×in DMSO),SYBR Green I 核酸凝胶染料
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温馨提示:不可用于临床ZL。