布鲁氏杆菌抗体IgM体外诊断试剂盒

【实验原理】
本试剂盒依据双抗原夹心酶联免疫分析法原理，首先将待测样本加入微孔板中，样本中的未知抗体与固相抗原结合，经洗涤后形成稳固的未知抗体-抗原复合物，再加入标记抗原使其与抗原复合物结合，形成标记抗原-抗体-抗原复合物，经洗涤后加入显色剂并终止反应，测得吸光度OD值。
【操作步骤】
1. 加待检测样本：在相应微孔中分别加入100微升的阴性、阳性对照品和待测标本，对照品的瓶塞应盖在原有对应的瓶口上，切勿混用。
2. 孵育：用封口贴密封已加样的微孔板，使用微量振荡器或手工方式，震动30秒。将已密封的微孔板放置于水浴箱37◦C中孵育反应24小时。
3. 洗涤：孵育完毕后，揭开封口贴弃尽微孔内液体，加入220～300微升稀释好的洗涤液，清洗微孔板3～5次。洗涤结束后用吸水纸拍干微孔壁内残余的液体，并将微孔板外部的液体与指纹擦拭干净。
4. 加酶标记抗体：在微孔中加入酶标记抗原100微升。
5. 孵育：用封口贴密封已加样的微孔板，使用微量振荡器或手工方式，震动30秒。将已密封的微孔板放置于水浴箱37◦C中孵育反应2小时。
6. 洗涤：孵育完毕后，揭开封口贴弃尽微孔内液体，加入220～300微升稀释好的洗涤液，清洗微孔板3～5次。洗涤结束后用吸水纸拍干微孔壁内残余的液体，并将微孔板外部的液体与指纹擦拭干净。
7. 显色：将清洗后的微孔板平置于操作台上，每孔加入50微升的显色剂A，再加入50微升的显色剂B（或预先按照1∶1比例混匀后加入100微升/孔），混匀后，置于避光环境中，室温18~25◦C静置20分钟。
8. 终止：将微孔板从避光环境中取出，每孔加入50微升的终止液，轻微混匀。
9. 测量：将已终止反应的微孔板置于酶标仪读数槽内，使用检测波长450nm测量读取各孔的吸光度值（也可以使用双波长450nm和630nm测定），数据读取应在30分钟内完成。