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北京百奥莱博专业生产销*(代"售")北京现货1.5 M Tris-HCl缓冲液(pH8.8)打折促销,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:北京现货1.5 M Tris-HCl缓冲液(pH8.8)打折促销
编号:WE0284
产地:国产|进口
规格:500ml
品Pai:百奥莱博
英文名:1.5 M Tris-HCl(pH8.8)
北京现货1.5 M Tris-HCl缓冲液(pH8.8)打折促销极具性价比,此外,我公司正火爆促销以下产品:
·GX热启动DNA聚合酶
编号:WE0123
英文名称:SuperStar DNA Polymerase
规格:500U|2500U
本产品是一种采用ZX封闭技术的Taq DNA Polymerase,适用于HotStart PCR。在70℃以下,酶的活性ZX被完全封闭,有效YZ了聚合酶活性,并能够在低温条件下有效YZ引物的非特异性退火及引物二聚体引起的非特异性扩增。在95℃条件下孵育5分钟后,酶的部分活性得以释放。随着热循环的不断进行,剩余的酶活会源源不断地释放出来,这就使得此酶克服了常规Taq酶容易出现平台期的弊端,其扩增效率大大提高。
本品进行PCR扩增时,PCR产物3"末端附有一个“A”碱基,可直接用于T/A克隆。本产品具有扩增速度快、特异性好、稳定性好的特点,主要应用于对扩增产物要求量大的PCR和RT-PCR反应。
产品组成:
组份 | 500U | 2500U |
SuperStar DNA Polymerase,5 U/μl | 100μl | 5×100μl |
10×PCR Buffer | 1.8ml | 5×1.8ml |
注意:本产品的10×PCR Buffer中含有15 mM*离子。
活性定义:用活性化的大马哈鱼精子 DNA 作为模板/引物,在74℃,30分钟内,将10 nmol脱氧核苷酸掺入到酸性不溶物质所需的酶量定义为1个活性单位(U)。
质量控制:
1、经过多次柱纯化,SDS-PAGE检测其纯度大于99%;
2、经检测无外源核酸酶活性;
3、PCR方法检测无宿主残余DNA;
4、能有效地扩增人基因组中的单拷贝基因。
使用方法:
以下举例为以人基因组DNA为模板,扩增1 kb的片段的PCR反应体系和反应条件,实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的改进和优化。
1、PCR反应体系
试剂 | 50μl反应体系 | 终浓度 |
10×PCR Buffer | 5μl | 1× |
dNTP Mix,10 mM each | 1μl | 200μM each |
Forward Primer,10μM | 2μl | 0.4μM |
Reverse Primer,10μM | 2μl | 0.4μM |
Template DNA | <0.5μg | <0.5μg/50 μ l |
SuperStar DNA Polymerase,5 U/μl | 0.5μl | 2.5 U/50μl |
ddH2O | up to 50μl | |
注意: 可以在室温下配制反应液,将试剂置于冰上。引物浓度请以终浓度0.1-1.0μM作为设定范围的参考。扩增效率不高的情况下,可提高引物的浓度;发生非特异性反应时,可降低引物浓度,由此优化反应体系。
2、PCR反应条件
步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
预变性 | 95℃ | 5 min | |
变性 | 94℃ | 0.5-1 min | 25-35个循环 |
退火 | 50-68℃ | 0.5-1 min |
延伸 | 72℃ | 1 min |
终延伸 | 72℃ | 10 min | |
注意:
1)一般实验中退火温度比扩增引物的熔解温度Tm低5℃,无法得到理想的扩增效率时,适当降低退火温度;发生非特异性反应时,提高退火温度,由此优化反应条件。
2)延伸时间应根据所扩增片段大小设定,本产品中所包含的SuperStar DNA Polymerase的延伸速率为1 kb/min。
3)可根据扩增产物的下游应用设定循环数。如果循环次数太少,扩增量不足;如果循环次数太多,错配机率会增加,非特异性背景严重。所以在保证产物得率的前提下应尽量减少循环次数。
储存条件:-20℃,避免反复冻融。
北京现货1.5 M Tris-HCl缓冲液(pH8.8)打折促销关键词:WE0284,1.5 M Tris-HCl缓冲液,1.5 M Tris-HCl缓冲液(pH8.8),1.5 M Tris-HCl(pH8.8)
PY02-046 葡萄糖肉汤 250克
ARB10941 人低密度脂蛋白受体(LDLR)elisa检测操作说明书 Human very low density lipoprotein receptor,vldlr ELISA KIT
CYB163076 人IgG-FITC
ARB12124 大鼠丙二醛(MDA)elisa测定使用说明书 Rat malondialchehyche,mda ELISA KIT
甘油三酯 HEC 538-24-9
芴甲氧羰基-N-三*甲基-L-组*酸 4,4"-Bipyridine 109425-51-6
丝裂霉素C Fmoc-His(Trt)-OH 50-07-7
ARB12247 大鼠血管性血友病因子/瑞斯托霉素辅因子(VWF)检测服务 Rat von willebrand factor,vwf ELISA KIT
3,3,5,5-四甲基联*(代"*")*(代"胺")盐*(代"酸")盐 Molybdic acid 64285-73-0
87-99-0(16277-71-7) 木糖醇 xylitol
2829-43-8 Sirius Red 天狼猩红
PY02-358 沙氏葡萄糖液体培养基 250克
无激素血清 100ml
ARB10233 人γ干扰素诱导蛋白16/p16(IFI16/p16)Elisa方法检测 Human interferon-inducible protein 16,ifi16/p16 ELISA KIT
BL0263 DifcoTM Skim Milk 脱脂奶粉
北京现货1.5 M Tris-HCl缓冲液(pH8.8)打折促销关键词:WE0284,1.5 M Tris-HCl缓冲液,1.5 M Tris-HCl缓冲液(pH8.8),1.5 M Tris-HCl(pH8.8)
·高纯游离DNA中量提取试剂盒(负压法)
编号:WE0189
英文名称:CWhipro Circulating Nucleic Acid Midi Extraction Kit
规格:10次|50次
本试剂盒适用于从新鲜或冷冻的血清、血浆、羊水、尿液等无细胞体液中提取游离DNA。本试剂盒采用可以特异性结合核酸的吸附柱和独特的缓冲液系统,样品裂解后,游离DNA在高盐条件下与硅胶膜结合,在低盐、高pH值时游离DNA从硅胶膜上洗脱下来。本试剂盒使用负压法,同时配备延伸管,可处理多达5ml样本,纯化的DNA产量高、质量好,ZD限度去除蛋白、色素、脂类及其他YZ性杂质污染。纯化得到的游离DNA质量稳定、可靠,可直接用于PCR、荧光定量PCR和二代测序等分子生物学实验。
试剂盒组成:
组份 | 10次 | 50次 |
Buffer CL | 45ml | 220ml |
Buffer CB(浓缩液) | 60ml | 300ml |
Buffer GTL | 15ml | 60ml |
Buffer GW1(浓缩液) | 3ml | 13ml |
Buffer GW2(浓缩液) | 3ml | 15ml |
Buffer EBL | 2ml | 10ml |
蛋白酶K | 100 mg | 3×180 mg |
蛋白酶K 储存液 | 5ml | 30ml |
吸附柱DG及收集管 | 10套 | 50套 |
延伸管(20ml) | 10个 | 50个 |
连接管 | 10个 | 50个 |
离心管(L-1.5 m l) | 10个 | 50个 |
保存条件:吸附柱DG置于2~8℃,其他组分室温(15~30℃)
产品特点:
1、适合大体积样本:试剂盒使用负压法,配备延伸管,配套使用负压装置可将样品处理量提高至5ml。
2、提取得率高:使用GX微量吸附柱结合目的片段,有效提升核酸的回收率,洗脱体积可在10-150μl之间灵活变化,可浓缩低浓度核酸。
3、纯度高:经纯化和浓缩的游离DNA不含蛋白、核酸酶和其他杂质,可即用于下游各种应用,包括PCR、荧光定量PCR、二代测序等。
自备试剂:无水乙醇、异丙醇
实验前准备及重要注意事项/strong>:
1、向每管蛋白酶K *(代"粉")末中加入指定用量(10次加5ml/50次每瓶加9ml)的蛋白酶K 储存液,使其完全溶解后-20℃保存。配制好的蛋白酶K 勿长时间室温放置,避免反复冻融,以免影响其活性。其它组分可以在干燥、室温(15~30℃)环境下稳定保存一年。如需保存更长时间,可置于2~8℃。
2、样品应避免反复冻融,否则会导致DNA提取量下降。
3、本试剂盒最多可以从5ml血清血浆、4ml尿液中提取cfDNA。
4、DY次使用前应按照试剂瓶标签的说明先在Buffer CB中加入异丙醇,混合均匀,并在试剂瓶标签上做好标记。
5、DY次使用前应按照试剂瓶标签的说明先在Buffer GW1和Buffer GW2中加入无水乙醇,混合均匀,并在试剂瓶标签上做好标记。
6、使用前请检查Buffer CL、Buffer CB是否出现结晶或者沉淀,如有结晶或者沉淀,请将Buffer CL、Buffer CB于56℃水浴孵育重新溶解,混匀后使用。
7、实验开始前将水浴锅预热至60℃。
8、可将洗脱缓冲液Buffer EBL预热至60℃。
9、负压装置。
操作步骤(血清、血浆样本1-5ml):
1、样品处理:向离心管(自备)中加入1ml血清/血浆样本,若样本不足1ml,加入PBS溶液补至1ml体积。
注意:当样品量超过1ml时,请等比例增加蛋白酶K 、Buffer CL和Buffer CB试剂用量,具体
2、向以上溶液中加入100μl 蛋白酶K ,混匀。
3、加入800μl Buffer CL,剧烈震荡至少30秒。
4、60℃孵育30分钟,其间颠倒混匀数次。
5、加入1800μl Buffer CB(使用前检查是否加入异丙醇),颠倒混匀10次或剧烈震荡15-30秒。
6、冰浴5分钟。
7、正确连接负压装置,将连接管插到负压装置的插口上。
8、将吸附柱插入到连接管上。
9、将延伸管插入开盖的吸附柱中。
注意: 确保连接管、吸附柱和延伸管连接稳固,防止发生漏液。
10、将冰浴后的混合溶液全部加入延伸管中,开启并调节负压至-900~-800 mbar,缓慢吸走管中溶液。待溶液完全吸走,关闭负压开关,当压力恢复至0 mbar时,小心移去延伸管。
11、向吸附柱中加入500μl Buffer GW1(使用前检查是否加入无水乙醇), 开启并调节负压至-900~-800 mbar,待溶液完全吸走,关闭负压开关。
12、向吸附柱中加入750μl Buffer GW2(使用前检查是否加入无水乙醇),开启并调节负压至-900~-800 mbar,待溶液完全吸走,关闭负压开关。
13、向吸附柱中加入750μl无水乙醇,开启并调节负压至-800~-900 mbar,待溶液完全吸走,关闭负压开关。
14、当压力恢复至0 mbar时,将吸附柱取下,置于新的收集管中,12000rpm离心3分钟,倒掉收集管中的废液。将吸附柱置于室温数分钟,以彻底晾干。
注意:这一步的目的是将吸附柱中残余的乙醇去除,乙醇的残留会影响后续的酶促反应。
15、将吸附柱置于新的1.5ml离心管中,向吸附柱的中间部位悬空加入20-150μl Buffer EBL,室温放置3分钟,12000rpm离心1分钟,收集DNA溶液,-20℃保存DNA。
附表1:不同血清/血浆样本量推荐加入试剂量 加入物 | 加入量(ml) |
样本 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 |
蛋白酶K | 0.1 | 0.2 | 0.3 | 0.4 | 0.5 |
Buffer CL | 0.8 | 1.6 | 2.4 | 3.2 | 4 |
Buffer CB | 1.8 | 3.6 | 5.4 | 7.2 | 9 |
储存条件:室温(15~30℃)。
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温馨提示:不可用于临床ZL。