微量凝胶DNA回收试剂盒 核酸电泳和回收

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、YL及其他非科研用途。

微量凝胶DNA回收试剂盒 核酸电泳和回收由专业试剂供应商北京百奥莱博提供，用于科研目的生化试验项目，本产品质量好，且极具价格优势，深为用户称道，了解更多微量凝胶DNA回收试剂盒等核酸电泳和回收产品请联系我司咨询订购。

北京百奥莱博科技有限公司专业生产供应微量凝胶DNA回收试剂盒 核酸电泳和回收，产品信息：

类别：核酸电泳和回收

英文名：Gel DNA Extraction Micro Kit

产地：国产|进口

品Pai：百奥莱博

英文名：Gel DNA Extraction Micro Kit

  本试剂盒专用于从普通或低熔点琼脂糖凝胶中回收纯化微量DNA片段，溶胶速度快，并利用硅基质膜技术，以非常小的终洗脱体积(可少至10μl)，从琼脂糖凝胶中，快速纯化50 bp-50 kb的DNA片段，纯化过程有效去除引物、寡核苷酸、酶等杂质，从而可获得高纯度、高浓度，完整性好的DNA，回收率高达90%。本试剂盒回收纯化的DNA可直接用于测序、连接和转化、酶切、标记、体外转录等分子生物学实验。

试剂盒组成：

自备试剂：无水乙醇，异丙醇。

实验前准备及重要注意事项/strong>：

1、所有组分可在干燥、室温(15～30℃)环境稳定保存1年，将吸附柱置于2～8℃可保存更长时间。

2、DY次使用前应按照试剂瓶标签的说明在Buffer PW中加入无水乙醇。

3、使用前请检查Buffer PG如果出现结晶或者沉淀，可在37℃水浴中放置3-5分钟，即可恢复澄清。

4、电泳时使用新的电泳缓冲液，避免影响电泳和回收效果。

5、切胶时，紫外照射时间应尽量短，以免对DNA造成损伤。

6、回收率与初始DNA量和洗脱体积有关，初始量越少，洗脱体积越少，回收率越低。

7、将水浴锅预热至50℃。

8、Buffer PG中含有pH指示剂，当pH≤7.5时溶液的颜色为黄色，此时DNA才能够有效的与膜结合，当pH值偏高时溶液的颜色变为桔红色和紫色，需要进行调整。

操作步骤：

1、将单一目的DNA条带从琼脂糖凝胶中切下(尽量切除多余部分)，放入干净的离心管(自备)中，称量计算凝胶重量(提前记录离心管重量)。

注意：若胶块的体积过大，可将胶块切成碎块。

2、向胶块中加入1倍体积Buffer PG(如凝胶重为100 mg，其体积可视为100μl，依此类推)。

3、50℃水浴温育，其间每隔2-3分钟温和地上下颠倒离心管，以确保胶块充分溶解。如果还有未溶的胶块，可再补加一些溶胶液或继续放置几分钟直至胶块完全溶解。

注意：

1)凝胶完全融解后胶溶液为黄色，可进行后续操作；若胶溶液为桔红色或紫色，可向胶溶液中加10-30μl 的3 M醋酸*(pH5.0)，将溶液的颜色调为黄色后再进行后续操作。

2)胶块完全溶解后将胶溶液温度降至室温再上柱，吸附柱在较高温度时结合DNA的能力较弱。

4、(可选步骤)当回收片段<300 bp时，应加入1/2胶体积的异丙醇，上下颠倒混匀(如凝胶重100 mg，则加入50μl的异丙醇)。

5、柱平衡：向已装入收集管中的吸附柱DE中加入200μl Buffer PS，13000rpm(~～～16200×g)离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。

6、将步骤3或4所得溶液加入到已装入收集管的吸附柱中，室温放置2分钟，13000rpm离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱放回收集管中。

7、向吸附柱中加入450μl Buffer PW(使用前先检查是否已加入无水乙醇)，13000rpm离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱放回收集管中。

注意：如果纯化的DNA用于盐敏感的实验(例如平末端连接或直接测序)，建议加入Buffer PW静置2-5分钟再离心。

8、重复步骤7。

9、13000rpm离心1分钟，倒掉收集管中废液。将吸附柱置于室温数分钟，以彻底晾干。

注意：这一步目的是将吸附柱中残余乙醇去除，乙醇的残留会影响后续酶促反应(酶切、PCR等)。

10、将吸附柱放到一个新的1.5ml离心管(自备)中，向吸附膜中间位置悬空滴加10-50μlBuffer EB，室温放置2分钟。13000rpm离心1分钟收集DNA溶液。-20℃保存DNA。

注意：

1)为了提高DNA的回收量，可将离心得到的溶液重新滴加到吸附柱中，室温放置2分钟，13000rpm离心1分钟。

2)回收大于10 kb的DNA片段时，Buffer EB应在50℃水浴中预热，可增加回收效率。

储存条件：室温(15～30℃)。

微量凝胶DNA回收试剂盒 核酸电泳和回收专业优质供应商：北京百奥莱博科技有限公司

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