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名称:北京HRP标记抗V5标签单克隆抗体哪里卖
编号:WE0334
品Pai:百奥莱博
产地:国产|进口
本抗体为经辣根过氧化物酶(HRP)直接标记的抗V5标签鼠单克隆抗体,可用于检测V5-Tag(GKPIPNPLLGLDST)融合蛋白。本产品经HRP直接标记,无需使用二抗,可直接用相应酶底物显色或化学发光法检测目的蛋白,减化了实验步骤,避免由二抗交叉反应引起的非特异性条带。
抗体类型:鼠IgG
免疫原:人工合成多肽
标记物:HRP
应用范围:WB(1:500-3000)、ELISA(1:1000-20000)
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·高灵敏度ECL化学发光检测试剂盒
编号:WE0308
英文名称:eECL Western Blot Kit
规格:50ml|250ml
高灵敏度化学发光检测试剂盒是免疫印迹实验中与辣根过氧化物酶(HRP)配套使用的的高灵敏增强型检测试剂盒。该产品基于新一代增强型化学发光底物研制而成,在HRP的催化下产生高强度的信号,能够检测pg级别的抗原。灵敏度高、发光信号强烈持久,可以使用照相技术(X-光胶片曝光)或者其他成像方法(如荧光或化学发光成像仪)进行检测。
试剂盒组成:
组成 | 50ml | 250ml |
eECL-A(Luminol Enhancer) | 25ml | 125ml |
eECL-B(Peroxide) | 25ml | 125ml |
注意事项:
1、在与膜发生接触过程中,请佩戴手套且使用干净镊子等洁净器材,避免蛋白污染及高背景。
2、避光条件下,配制好的化学发光检测底物工作液可在室温下稳定保存8小时。阳光或其他强光会影响工作液,故应避免强光长时间的照射。正常实验室灯光短时间照射不影响工作液的使用。
3、百奥莱博提供多种蛋白转移用膜、封闭液、一抗、酶标二抗、缓冲液等,详情请查询公司网站。
操作步骤:
1、二抗孵育完毕后,将印迹膜充分洗涤。
2、根据需要量,将eECL-A和eECL-B按照1:1的比例等体积混合,配制为化学发光检测底物工作液(一张8 cm×6 cm的膜大约使用1ml工作液)。
3、弃去洗涤缓冲液,将发光底物工作液滴加在印迹膜上,确保工作液覆盖整张膜,室温孵育3-5分钟。
4、用移液器吸去多余发光底物工作液,将印迹膜置于两层干净的塑料薄膜之间,此过程应小心完成,避免膜与膜之间产生气泡。
5、在暗室内进行X-光胶片曝光,或将膜放置到化学发光成像仪内,按照仪器说明书进行检测。
问题 | 可能原因 | 解决方法 |
胶片反相(白色条带,黑色背景) | 系统中HRP过量 | 稀释HRP标记物至少10倍以上 |
膜上出现棕色或黄色条带 |
暗室中看到强烈发光 |
发光信号持续时间过短 |
信号较弱或者无信号 | 发光反应系统中HRP 过多,消 耗底物过快,引起信号迅速降低 | 稀释HRP标记物至少10倍以上 |
抗原/抗体量不够 | 增加抗原/抗体使用量 |
蛋白转移率低 | 优化转移系统 |
高背景 | 系统中HRP 过量 | 稀释HRP标记物至少10倍以上 |
封闭不足 | 优化封闭程序 |
封闭试剂选择不当 | 选择另一种封闭试剂 |
冲洗不充分 | 增加冲洗时间,次数 |
曝光过度 | 减少曝光时间 |
抗原/抗体浓度过高 | 降低抗原/抗体使用浓度 |
蛋白条带为点状 | 蛋白转移失败 | 优化转移过程 |
膜未平衡 | 按照说明书处理膜 |
胶片与膜之间有气泡 | 曝光前去除所有气泡 |
出现非特异条带 (高背景、信号维持时间较短) | 系统中HRP过多 | 稀释HRP标记物 |
出现非特异条带 (背景干净信号维持时间正常) | 一抗用量过多 | 进一步稀释一抗 |
SDS 导致非特异结合 | 在实验过程中避免使用SDS |
储存条件:2~8℃,避光保存
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高范围RNA Ladder Uniconazole
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PY02-356 2216E 250克
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2,6-二**醌*亚胺 HBTU 537-45-1
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D-*甘*醇 IBA-K 56613-80-0
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柠檬酸铋铵 DL-Lactic acid 31886-41-6
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