特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、YL及其他非科研用途。
北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域,致力于为客户提供包括XH019型SYBR Green I(10000×)电泳用现货在内的一系列分子生物学试剂产品,并提供一系列相关的技术服务。
名称:XH019型SYBR Green I(10000×)电泳用现货
品Pai:百奥莱博
产地:国产|进口
编号:XH019
SYBR Green I是高灵敏的DNA荧光染料,适用于各种电泳分析,操作简单:无须脱色或冲洗。至少可检出20pg DNA,高于EB染色法25-100倍。SYBR Green I 与dsDNA结合荧光信号会增强800-1000倍,用SYBR Green I染色的凝胶样品荧光信号强,背景信号低。可适用于多种电泳分析。
SYBR Green I适合于多种凝胶电泳方法:琼脂糖凝胶,聚丙*(代"烯")酰胺凝胶电泳,脉冲电场凝胶电泳,和毛细管电泳等。
SYBR Green I与双链DNA的亲和力非常高,因此可以用做电泳前染色,对分子生物学中常用的酶(如:Taq酶、逆转录酶、内切酶、T4连接酶等)没有YZ作用。另外,SYBR Green I与EB相比,诱变能力大大降低。
SYBR Green I核酸染料特点
高灵敏:至少可检出20pg DNA,高于EB染色法25-100倍。
信噪比高:样品荧光信号强,背景信号低。
操作简单:无须脱色或冲洗。
适用范围广:可适用于多种电泳分析。
使用方便:不影响其它修饰酶作用。
安全性高:分子克隆上明确诱变能力很低
使用方法
SYBR Green I预染方法
1. 该方法适于琼脂糖凝胶电泳和PAGE凝胶电泳
2. 工作液的配制:用电泳缓冲液将10000×的SYBR GreenⅠ稀释100倍,即为SYBR GreenⅠ工作液。SYBR GreenⅠ工作液可以置2-8℃冷藏一个月以上。
3. 制胶:按常规方法制胶,不含任何染料。
4. 样品染色:向分析样品中加入SYBR GreenⅠ工作液和载样缓冲液,室温放置10分钟,使SYBR GreenⅠ与样品中DNA充分结合。SYBR GreenⅠ工作液加入量为总上样量的1/10。
5. DNA Marker染色:将5μL DNA Marker和1μLSYBR GreenⅠ工作液混匀,室温放置5分钟,使SYBR GreenⅠ与DNA充分结合。(商品Marker稀释2-5倍后再电泳,否则电泳条带会变形,特别是大片段。)
6. 上样、电泳:按常规操作。
SYBR Green I后染方法
1. 按照常规方法进行电泳。
2. 用PH=7.0-8.5的缓冲液(如:TAE,TBE或TE),按照10000:1的比例稀释SYBR GreenⅠ浓缩液,混匀,制成染色溶液。
3. 将染色溶液倒入合适的聚丙*(代"烯")容器中,放入凝胶,用铝箔等盖住容器使染料避光。室温振荡染色10-30分钟,染色时间因凝胶浓度和厚度而定。聚丙*(代"烯")酰胺凝胶直接在玻璃平皿上染色,将配好的工作溶液轻轻地倒在胶板上,让工作液均匀地覆盖整个胶板,并染色30分钟。玻璃平皿必须预先经过硅烷化溶液处理(避免染料吸附在玻璃表面上)。
4. 用紫外仪观测。
SYBR Green I使用注意事项
1. 在"SYBR GreenⅠ预染色方法"中,电泳时间不要超过2小时,否则SYBR GreenⅠ会从DNA上分离出来,会产生弥散状条带。
2. 在常规用酒精沉淀核酸的过程中,SYBR Green I可以全部从双链核酸上去掉。
3. 如果想对用 SYBR Green I 染过的胶进行Southern blots,建议在预杂化和杂化溶液中加入0.1%- 0.3%的SDS。
4. 在紫外照射透视下,与双链DNA接合的SYBR Green I呈现绿色荧光。如果胶中含有单链DNA则颜色为橘黄而不是绿色。
5. SYBR Green对玻璃和非聚丙*(代"烯")材料具有一定亲合力。建议在稀释、贮存、染色等使用过程中用聚丙*(代"烯")类容器。
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关于XH019型SYBR Green I(10000×)电泳用现货的更详细说明,请致电我公司咨询,我们将以最饱满的热情为您提供解答,此外,我公司专业供应下列产品:
·核酸助沉剂(Acryl Carrier)
编号:XH037
规格:1ml/10ml
主要性能介绍:
乙醇低温沉淀是回收液体样品中的DNA和RNA的最常用方法。然而乙醇沉淀至少会丢失样品中核酸的30%左右。如果液体样品中的核酸浓度很低或DNA<200bp,乙醇沉淀只能回收50%的DNA和RNA。
核酸助沉剂(Acryl Carrier)是一种分子生物学级Acryl多聚物溶液,在乙醇沉淀时加入其5-10μl即可明显提高核酸沉淀的得率,更可使痕量DNA的回收率达到98~100%,同时可选择性去除短引物片段和dNTP。
本身绝无核酸污染也无DNA酶和RNA酶活性,同时不影响酶切、连接、转录、PCR、转化转染等,也不影响核酸电泳和DNA-蛋白相互作用。
核酸助沉剂(Acryl Carrier)已成为最常用的核酸助沉剂。
应该方面:
(1) 提高DNA或RNA沉淀的得率。例如,提高质粒产量,提高RNA提取得率等
(2) 痕量DNA或RNA回收。
(3) 沉淀回收标记探针,去除未标记dNTP。
使用方法:
(1) 加5-20μl核酸助沉剂(Acryl Carrier)到1 ml DNA或RNA溶液,继续进行所选择的核酸沉淀操作。
(2) 加5-20μl核酸助沉剂(Acryl Carrier)到1 ml TRIpure提取试剂,继续进行RNA提取操作。
(3) 加5-20μl核酸助沉剂(Acryl Carrier)r到1 ml 质粒提取液,继续进行质粒提取操作。
储存: 4℃,有效期24个月。
·质粒DAN提取试剂盒
编号:XH013
规格:100T/500T
原理简介
本试剂盒是在经典的质粒提取方法上改进而来,利用玻璃奶吸附质粒,代替有毒的酚*仿抽提,得到的DNA可用于常规下游应用实验,但可能并不适用于转染(转染请选去内毒素质量提取试剂盒。本试剂盒(以100T为例)可以用100小次或者5大次提取。
注意事项
1.溶液Ⅱ低温时可能出现析出和沉淀,可以37度水浴几分钟即可恢复澄清透明。用完请及时盖紧盖子。
2.溶液Ⅰ中加入RNaseA后请放2-8度保存,如果长久不用(如一个月),可-20度冻存,或者按照比较分次加入。
3.可根据实验情况中量或者大量提取,加入的试剂等比放大。
操作步骤(以小量提取为例,中提或者大提可等比例加入)
在溶液Ⅰ中加入RNaseA,混匀,2-8度保存。
1.取过夜菌1-5毫升,5000g离心1分钟收集细菌沉淀,弃上清(可重复多次收集于一管中,收集量可考虑菌液浓度与质粒拷贝数),如为阳性细菌,可加入100mg/ml的溶菌酶悬浮菌液,37度处理30分钟,离心,收集沉淀。
2.在收集的菌液中,加入150ul溶液I,重悬细菌沉淀。确保沉淀完全散开,无可见细菌团块(可vortex 5-10秒或更长时间)。室温放置2-3分钟。
3.每管加入150ul溶液Ⅱ(如有沉淀,可37度水浴),轻轻颠倒离心管4-6次,使细菌完全裂解,溶液透明。放置2-3分钟,不过超过5分钟。但也不要混匀后立刻加入溶液Ⅲ。
4.放置2-3分钟后,每管加入150ul溶液III,随即颠倒离心管4-6次混匀,可见白色絮状物产生。
5.ZG速(13,000rpm左右)室温离心5分钟。
6.将上清转移到新的离心管中,如有沉淀,可再次离心。
7.玻璃奶摇匀。
8.在第6步的上清中加入50ul混匀的玻璃奶,混匀。室温放置5分钟,期间颠倒2次。
9.10000转/分钟离心1分钟,倒掉上清;沉淀加入1ml 70%乙醇,振荡混匀,10000转/分钟离心1分钟,去上清,70%乙醇重复洗一次,再用无水乙醇洗一次。去上清,再次离心2分钟,用小吸头吸去上清。
7.室温放置10分钟(如果为大提,请延长放置时间到30分钟,此步为去除残余酒精,以免影响下游实验),加入50-100ulTE缓冲液混匀溶解,55℃水浴5分钟。离心,取上清转移到一新的离心管中。此为所提质粒。
8.电泳或者其他方法检测,进入下游实验。
XH019型SYBR Green I(10000×)电泳用现货关键词:SYBR Green I(10000×)电泳用,XH019,百奥莱博
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·土壤基因组DNA提取试剂盒
编号:XH018
规格:50T/200T
储存条件:15~25℃,有效期一年。
产品简介:
本试剂盒采用独特的缓冲液,尽可能的去除腐殖酸。提取的基因组DNA片段大,纯度高,质量稳定可靠。
使用本试剂盒提取的基因组DNA可用于各种常规操作,包括酶切、PCR、文库构建、Southern杂交等实验。
操作步骤:
1,称取土壤样本0.1-0.3g于离心管(强烈建议2ml圆底离心管),加入450ul溶液Ⅰ剧烈震荡混匀1-2min至看不到较大固体块。
2,加入50ul溶液Ⅱ颠倒混匀,65℃水浴5min,每2min混匀一次。
3,加入100ul溶液Ⅲ颠倒混匀,室温12000rpm离心10min。
4,取上清,在上清中加入5ul核酸助沉剂,再加入三倍体积无水乙醇,充分混匀。
4、12000rpm离心5min,弃上清,沉淀加入1ml 70%乙醇,轻轻混匀,再次12000rpm离心5min,弃上清,将离心管在离心机中再次离心30S左右,吸去底部少量液体。
5、 室温放置2min左右,等沉淀边缘微微发白,加入50-100ulTE缓冲液溶解,如很难溶解,可55℃水浴5分钟。
6、电泳或者其他方法检测,进入下游实验。
因为土质千差万别,得到的DNA含量也是相差很大,如果电泳无法检测,可用PCR检测。
·去内毒素质粒DNA提取试剂盒
编号:XH012
规格:50T/200T
原理简介
本试剂盒在常规质粒提取试剂盒的基础上改进而来,增加内毒素清步骤,提取的质粒可用于一些要求更高的实验,如转染。
本试剂盒(以200T为例)可以用200小次或者10大次提取。
注意事项
1.溶液Ⅱ低温时可能出现析出和沉淀,可以37度水浴几分钟即可恢复澄清透明。用完请及时盖紧盖子。
2.溶液Ⅰ中加入RNase 后请放2-8度保存,如果长久不用(如一个月),可-20度冻存,或者按照比较分次加入。
3.可根据实验情况中量或者大量提取,加入的试剂等比放大。
4.内毒素清除剂在常温下出现面混浊现象,为正常,在2-8℃放置一段时间混浊会消失。
5.本试剂盒在去除内毒素的过程中会损失少量质粒,因而相对于常规提取,本试剂盒得率偏低。
操作步骤(以小量提取为例,中提或者大提可等比例加入)
在溶液Ⅰ中加入RNaseA,混匀,2-8度保存。
1.取过夜菌1-5毫升,5000g离心1分钟收集细菌沉淀,弃上清(可重复多次收集于一管中,收集量可考虑菌液浓度与质粒拷贝数),如为阳性细菌,可加入100mg/ml的溶菌酶悬浮菌液,37度处理30分钟,离心,收集沉淀。
2.在收集的菌液中,加入200ul溶液I,重悬细菌沉淀。确保沉淀完全散开,无可见细菌团块(可vortex 5-10秒或更长时间)。室温放置2-3分钟。
3.每管加入200ul溶液Ⅱ(如有沉淀,可37度水浴),轻轻颠倒离心管4-6次,使细菌完全裂解,溶液透明。放置2-3分钟,不过超过5分钟。但也不要混匀后立刻加入溶液Ⅲ。
4.放置2-3分钟后,每管加入200ul溶液III,随即颠倒离心管4-6次混匀,可见白色絮状物产生。
5.ZG速(13,000rpm左右)室温离心5分钟。
6.将上清转移到新的离心管中,如有沉淀,可再次离心。
7.加入上清1/5体积冰预冷的内毒素清除剂,振荡混匀,溶液变浑浊,冰浴2min至溶液变清亮。
8.37℃水浴2min,不时振荡,溶液又变浑浊。12000rpm室温离心2min,溶液应分为两相,上层水相含质粒DNA,下层油状相含内毒素。
9.将含质粒DNA的上层水相转移至新管,弃下层油状相,注意不要吸入油状相。重复抽提三次,即重复步骤7-9三次。
10.在得到的上清中加入等体积的结合液,再加入等体积的无水乙醇,混匀(上清:结合液:无水乙醇=1:1:1)
11.玻璃奶摇匀。取20ul混匀的玻璃奶加入上面的混合液中,混匀。室温放置5分钟,期间颠倒2次。
12.10000转/分钟离心1分钟,倒掉上清;沉淀加入1ml 70%乙醇,振荡混匀,10000转/分钟离心1分钟,去上清,70%乙醇重复洗一次,再用无水乙醇洗一次。去上清,再次离心2分钟,用小吸头吸去上清。
13.室温放置10分钟(如果为大提,请延长放置时间到30分钟,此步为去除残余酒精,以免影响下游实验),加入30-50ulTE缓冲液混匀溶解,55℃水浴5分钟。离心,取上清转移到一新的离心管中。此为所提质粒。
14.电泳或者其他方法检测,进入下游实验。
XH019型SYBR Green I(10000×)电泳用现货关键词:SYBR Green I(10000×)电泳用,XH019,百奥莱博
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·TOP10受体菌
编号:XH045
规格:1ml
基因型:F-,supE44,hsdS20(rB-mB-),recA13,ara-14,proA2,lacY1,galK2,rpsL20,xyl-5,mtl-1,leuB6,thi-1
细胞种类
GX常用宿主菌E.coli HB101
E.coli HB101在基因重组实验起始时便十分常用。遗传性能稳定,使用十分方便,适合于各种基因重组实验。
保存:所有受体菌均为甘油保存,-70℃可长期保存,-20℃可保存一年。
·非冻型组织细胞RNA保存液(RNAwait)
编号:XH020
规格:10ml/100ml
非冻型组织细胞RNA保存液(RNAwait)是一种在较高温度下保存动物组织及细胞RNA样品的非冻型无毒溶液,它能迅速渗入细胞内,通过GXYZRNase的活性而保存RNA的完整性。
此产品有些公司又叫组织RNA保存液,或者RNAlocker。实际功能是相同的。
储存条件:15~25℃,有效期2年。。低温条件下有结晶析出时加热至37℃溶解后使用。
产品特点
1.操作简单,将组织剪薄浸没在RNAWAIT中即可使其RNA不被降解。
2.替代液氮,使样品的保存不需液氮,干冰或-80℃冰箱,尤其适用于临床和野外样品的快速和大规模采集。
3.RNA完整,因RNAwait能迅速YZ组织中RNA酶的活性,故从中提取的RNA的质量跟液氮保存的样品相比不相上下。
4.方便运输,处理过的样品能在25℃保存一周,使样品邮寄和运输变得容易和便宜,有利学术合作和交流。
5.反复冻融,经RNAwait处理的样品可反复冻融20次,其间可对样品进行各种处理而不影响ZZ提取的RNA的质量。
6.结果准确,RNAwait进入细胞十分快速,基因表达在发生应急改变前就得以锁定,故RNA分析更能反映取样时的真实情况。
7.可比性强,RNAwait能减少大规模样品处理中的误差,增加各次实验数据间的可比性,对大规模基因表达谱的分析尤其有用。
8.兼容性广,处理过的样品可以使用TRIzol 等试剂提取其RNA,样品还可直接用于组织切片,免疫学和流式细胞分析而不影响RNA的质量。
技术指标
37℃ 一天(保存三天的样品RNA有部分降解)
18-25℃ 一周(保存两周的样品RNA有轻微降解)
2-8℃ 一个月
-20℃和-80℃ 长期
操作流程:
1. 根据要保存的各样本的体积,计算出所需RNAwait用量。RNAwait的用量应当是组织体积的10倍(100mg组织约用1ml RNAwait);离心收集2×107细胞RNAwait的用量是1ml。加入RNAwait的原则是:量宁多勿少。建议在实际操作中不要称量组织,而直接根据目测结果加入RNAwait量,以加快操作和减少污染。例如5mm边长的立方体组织块,体积为125mm3=125µl,故应当加入1.25ml的RNAwait液。
2. 将RNAwait按需要量分装入自备保存管中。
3. 快速将较大的组织切成厚度<0.5 cm的任意片状,较小的组织直接取下,立即完全浸入RNAwait中。组织的厚度一定要<0.5 cm。组织过厚则RNAwait不能有效渗入,组织中间部位的RNA不能受到保护。较大的组织可以切成厚度<0.5 cm的任意片状后保存,较小的组织(如大鼠的肾脏、,小鼠的大部分器官)则可以直接浸入RNAwait。
4. 将收集管存放于温度适当的地方,存放时间不能超过该温度下的最长存放时间(请看技术指标),如果要存放在-20℃或-80℃,需先将样品在4℃放置过夜后再转移到ZH的温度。注:将样品转移到-20℃或-80℃前,需要弃掉保护液。
注意事项:
1.组织和细胞取材速度要快,在获取后应当尽快浸入RNAwait,以防止RNA降解。
2.冰冻组织不能用RNAwait保存,因为RNAwait不能有效渗入冰冻组织。
3.保存样品的RNA提取:样本从-20℃或-80℃冰箱取出后,复温到室温后,取出组织块,再用于提取RNA。细胞样本则复温后低速离心收集细胞,去除RNAwait,再用于提取RNA。后继的处理(如组织匀浆)可以在室温下进行,不必在液氮中操作,RNA仍能有效得到保护。残留少量RNAwait保存液不影响后继提取RNA的质量。
![](http://item.yiqi.com/pic/ConPic/4/%E7%94%9F%E5%8C%96%E8%AF%95%E5%89%82%20(113).jpg)
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温馨提示:不可用于临床ZL。