特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、YL及其他非科研用途。
北京百奥莱博主要从事生物试剂的生产和销*(代"售"),产品线涵盖北京HRP标记抗GST标签多克隆抗体说明书在内的抗体抗原产品,还包括PCR及荧光定量PCR、核酸提取试剂盒类、样本核酸保护试剂、核酸提取、克隆与转化、蛋白纯化、蛋白检测、免疫组化、细胞凋亡与抗体等。
名称:北京HRP标记抗GST标签多克隆抗体说明书
英文名:HRP Conjugated Anti GST-Tag Rabbit Polyclonal Antibody
规格:20μl|100μl
产地:国产|进口
本抗体为经辣根过氧化物酶(HRP)直接标记的抗GST标签兔多克隆抗体,与GST结构域具有高亲和性,可特异地识别GST蛋白和GST-Tag融合蛋白。本产品经HRP直接标记,无需使用二抗,可直接用相应酶底物显色或化学发光法检测目的蛋白,减化了实验步骤,避免由二抗交叉反应引起的非特异性条带。
抗体类型:兔IgG
免疫原:人工合成多肽
标记物:HRP
应用范围:WB(1:1000-5000)、ELISA(1:1000-20000)
北京HRP标记抗GST标签多克隆抗体说明书极具性价比,此外,我公司正火爆促销以下产品:
·蛋白快速染色液
编号:WE0278
英文名称:FastStain Protein Staining Reagent
规格:500ml
本产品采用独特的配方,可对电泳后凝胶上的蛋白质条带进行染色,而对凝胶本底几乎没有着色。染色过程仅需15分钟,染色后几乎不需要脱色。本产品灵敏度高,可检测到15ng BSA蛋白;若实验对检测灵敏度有较高要求,可将凝胶放置在染色液中2小时,可达到ZD灵敏度(BSA:5ng)。
注意事项:
1、操作时请务必佩戴手套,如溅到皮肤上,请立即用大量水冲洗。
2、染色前的凝胶洗涤非常重要,否则会造成凝胶染色背景加深。
3、如染色后有轻微背景,可将染色后的凝胶用过量蒸馏水室温洗涤、脱色。
4、本产品适用于变性和非变性凝胶电泳后的蛋白染色。
操作步骤:
I 常规操作步骤:
1、常规PAGE电泳完成后,小心取下凝胶,根据凝胶的大小,将其放置在一个可微波加热的容器中。
2、加入足量的纯水,使凝胶可以在其中自由晃动,微波加热至沸腾。室温晃动2 min,彻底弃去水。
3、取20-25ml(以液面刚好覆盖凝胶为宜)凝胶染液加入到纯水洗涤后的凝胶的盒中,使其足以没过凝胶,轻轻晃动。并在微波炉中高火加热至沸腾,取出后室温轻轻摇动,5-10 min后凝胶中的蛋白条带开始显色,15 min后显色基本完成。
注意:此操作检测的灵敏度为:用BSA检测,灵敏度为15ng。若实验对检测灵敏度有较高要求,可将凝胶放置在染色液中2小时,可达到ZD灵敏度(用BSA检测,灵敏度为5ng)。
II 快速助染步骤:
1、常规PAGE电泳完成后,小心取下凝胶,根据凝胶的大小,将其放置在一个可微波加热的容器中。
2、加入足量的纯水,使凝胶可以在其中自由晃动,微波加热至沸腾。室温晃动2 min,弃去水。
3、重复步骤2两次。
4、取20-25ml(以液面刚好覆盖凝胶为宜)凝胶染液加入到含纯水洗涤后的凝胶的盒中,使其足以没过凝胶,轻轻晃动后,微波高火加热至沸腾,取出后置于室温并轻轻晃动,5-10 min后凝胶中的蛋白条带开始显色,15 min后显色完成。
注意:此操作检测的灵敏度为:用BSA检测,灵敏度为5ng。
储存条件:室温
北京HRP标记抗GST标签多克隆抗体说明书关键词:HRP标记重组GST标签抗体,HRP标记抗GST标签多克隆抗体,WE0342,兔抗重组GST标签
BL1265 离心式过滤柱
6363-53-7 D-(+)-Maltose monohydrate 麦芽糖
ARB12978 小鼠红细胞生成素(EPO)elisa检测 Mouse erythropoietin,epo ELISA KIT
PY02-264 pH7.0*化*-蛋白胨缓冲液 250克
H33258荧光染料 CPA-Ⅲ 23491-45-4
PY02-320 嗜盐性试验培养基 250克
黄嘌呤氧化酶 Sodium 1,5-naphthalenedisulfonate dibasic 9002-17-9
BTN120694 制霉菌素溶液 Nystatin Solution
赤霉烯酮 Carboxin 17924-92-4
9001-99-4 RNase A 核糖核酸酶A
ARB11440 人桥粒芯糖蛋白-1(DSG-E1)酶免分析 Human desmogleins 1,dsg-e1 ELISA KIT
50-76-*(代"0") 放线菌*(代"素")D Actinomycin D
ARB12830 小鼠小扁豆素结合型甲胎蛋白/甲胎蛋白异质体3(AFP-L3)免费代测 Mouse alpha-fetoprotein lens culinaris agglutⅡn 3,afp-l3 ELISA KIT
乙*(代"醛")脱*酶 Starch from potato 9028-88-0
北京HRP标记抗GST标签多克隆抗体说明书关键词:HRP标记重组GST标签抗体,HRP标记抗GST标签多克隆抗体,WE0342,兔抗重组GST标签
·RIPA裂解液(强)
编号:WE0258
英文名称:RIPA Lysis Buffer(Strong)
规格:100ml
RIPA裂解液是一种传统的组织以及细胞快速裂解液,主要用于从动物组织和哺乳动物细胞中抽取可溶性蛋白,可用于裂解贴壁细胞和悬浮细胞。按照其裂解液的强度可以分为强、中、弱三类,具体特点和差异请参考附表2,可根据实验需求选择相应产品。RIPA裂解液(强)可以有效提取细胞核、细胞膜和胞浆蛋白,提取的蛋白可应用于蛋白定量、Western Blot、IP等检测分析。
RIPA裂解液(强)的主要成分为50mM Tris(pH 7.4),150mM NaCl,1%Triton X-100,1% sodiu*(代"m") deoxycholate,0.1% SDS以及sodiu*(代"m") orthovanadate,sodiu*(代"m") fluoride,EDTA,leupeptin等。
注意事项:
1、为防止蛋白降解,所有的操作尽量在冰上进行。
2、使用RIPA裂解液得到的蛋白样品,可采用BCA法进行蛋白定量,以测定蛋白浓度。产品可单独向本公司订购,如:WE0276 BCA蛋白定量试剂盒。本品含有高浓度的去垢剂,不能用Bradford法进行蛋白定量。
3、建议在使用RIPA裂解液前,向溶液中加入蛋白酶YZ剂或磷酸酶YZ剂,以防止蛋白降解,或保持蛋白的磷酸化状态。产品可单独向本公司订购,如:WE0259 蛋白酶YZ剂混合物,WE0256 磷酸酶YZ剂混合物。
4、若需获得更高浓度的蛋白,应减少哺乳动物蛋白抽提试剂的使用量。
5、对于培养瓶中的贴壁细胞,推荐先使用常规方法消化细胞,再参考悬浮细胞蛋白提取步骤操作。
6、对于离心获得的细胞,若不确定细胞体积,可根据细胞数量计算RIPA裂解液的使用量。如5×106个Hela细胞约需加入500μl RIPA裂解液,以此类推。
使用方法:
一、细胞样品
贴壁细胞蛋白抽提
1、小心倾去贴壁细胞的培养液。
2、可选步骤:若培养基中含有酚红或其他可能影响实验结果的物质,请先使用预冷的PBS漂洗细胞。
3.加入适量RIPA Lysis Buffer(Strong)(使用前2-3分钟内加入蛋白酶YZ剂),试剂使用量请参考附表1,在冰上用枪头吹打贴壁细胞。
表1 贴壁细胞RIPA 裂解液使用量推荐表
细胞培养板类型或培养面积 | RIPA 裂解液使用量 |
100 mm | 500-1000μl |
60 mm | 250-500μl |
6孔培养板 | 200-400μl /孔 |
24孔培养板 | 100-200μl /孔 |
96孔培养板 | 50-100μl /孔 |
4、将裂解液转移至新的离心管中,冰上孵育20分钟,使细胞充分裂解。
5、14000×g离心10分钟。转移上清液至新管中,进行下一步分析。
悬浮细胞蛋白提取1、悬浮细胞,2,500×g离心5分钟,弃去上清。
2、可选步骤:若培养基中含有酚红或其他可能影响实验结果的物质,请使用PBS漂洗细胞。漂洗后的细胞悬浮液2,500×g离心5分钟,弃去上清。
3、加入适量RIPA Lysis Buffer(Strong)(使用前2-3分钟内加入蛋白酶YZ剂),每5×106细胞加入约200-500μl RIPA Lysis Buffer(Strong),吹打均匀。
4、冰上放置20分钟,使细胞充分裂解。
5、14000×g离心10分钟。转移上清液至新管中,进行下一步分析。
二、组织样品1、取适当的RIPA Lysis Buffer(Strong),在使用前2-3分钟内加入蛋白酶YZ剂。
2、称量实验组织的重量,按照1:10(g/ml)的比例加入RIPA Lysis Buffer(Strong)后将组织剪成细小碎片,用电动匀浆器匀浆处理。若需要浓缩的蛋白提取物,可适当减少组织蛋白抽提试剂使用量。
3、冰上孵育20分钟,使细胞充分裂解。
4、14000×g 离心10分钟。转移上清液至新管中,进行下一步分析。
注:RIPA裂解液的裂解产物中可能会出现一小团透明胶状物,属正常现象。该透明胶状物为基因组。
表2 蛋白裂解液性能、参数比较 目录号 | WE0258 | WE0257 | | |
名称 | RIPA裂解液(强) | RIPA裂解液(中) | RIPA裂解液(弱) | SDS裂解液 |
裂解强度 | 强 | 中 | 温和 | 强 |
有效裂解成分 | 1%Triton X-100, 1%脱氧胆酸*, 0.1% SDS | 1% NP-40, 0.5%脱氧胆酸* , 0.1% SDS | 1% NP-40, 0.25%脱氧胆酸* | 1%SDS |
膜蛋白提取 | 很好 | 较好 | 一般 | 很好 |
胞浆蛋白提取 | 很好 | 很好 | 很好 | 很好 |
核蛋白提取 | 很好 | 较好 | 较好 | 很好 |
主要用途 | WB,IP | WB,IP | WB,IP,CO-IP | WB,CHIP |
储存条件:2~8℃
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