北京5×双色蛋白上样缓冲液(还原)大量库存促销

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、YL及其他非科研用途。

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名称：北京5×双色蛋白上样缓冲液(还原)大量库存促销
编号：RFT070
品Pai：百奥莱博
产地：国产|进口
英文名：5×DualColor Protein loading buffer (reducing)
规格：5×1ml
5×DualColor蛋白上样缓冲液(双染料)是5倍浓缩的SDS-PAGE凝胶电泳上样缓冲液，应用于还原型SDS-PAGE的蛋白样品制备和上样。该缓冲液中含有两种示踪染料：溴酚蓝和吡啰红Y，可以指示SDS-PAGE电泳过程以及Weastern blot的转膜效率。该缓冲液已经加入DTT，可使蛋白质分子的链内二硫键和链间二硫键断裂，经考马斯亮蓝染色以后在电泳凝胶上显现清晰蛋白条带。

操作步骤
融化-混合-变性-上样
1、将5×双色蛋白上样缓冲液37℃数分钟解冻后轻轻摇匀，以确保溶液混合均匀。
2、将缓冲液与蛋白样品按照1：4的比例混匀。
3、将蛋白样品置于95℃中加热5分钟。
4、待蛋白样品充分变性后冷却至室温，快甩离心收集到管底，直接加入SDS-PAGE凝胶加样孔内电泳。

注意事项：
1．由于含有DTT，该缓冲液不适合于Native SDS-PAGE电泳。
2. 一般说来，电泳中吡啰红Y泳动速度快于溴酚蓝，但在高浓度SDS-PAGE胶中(高于15%分离胶)，吡啰红Y泳动速度慢于溴酚蓝。

储存条件：-20℃。

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·50bp DNA ladder(50～400bp)
编号：RFT009
规格：100T(2×250μl)
本产品是由8条JZ定量的带状双链DNA条带组成的DNA Ladder，适用于琼脂糖凝胶电泳中DNA条带的定量分析。含有1×loading buffer，可根据实验需要，直接取2-5μl电泳，使用方便，电泳图像清晰。如取5μl上样，8条带的大小和含量分别为50bp(60ng)，100bp(60ng)，150bp(50ng)，200bp(50ng)，250bp(100ng)，300bp(50ng)，350bp(50ng)，400bp(50ng)，其中250bp条带最亮。



使用方法：
1. 取2-5μl本产品加入到琼脂糖凝胶的加样孔中(每1mm×1mm加样孔加1μl，如果加样孔宽于5mm，可以适当增加上样量)就行电泳。
2. 建议电泳条件：凝胶浓度为2.0％，凝胶长度5-7cm，电泳电压4-10v/cm，电泳时间25-30分钟。
3. 通过EB染色后紫外灯下观察条带。

注意事项：
1. 琼脂糖的质量对DNA的电泳有很大影响，电泳时请尽量使用质量优等的琼脂糖。
2. 请使用新鲜配制的电泳缓冲液和新鲜配制的琼脂糖凝胶进行电泳，以保证Marker良好的分离效果。

储存条件：-20℃，有效期1年。

·JM109化学感受态细胞
编号：RFT113
英文名称：JM109 Competent cell
规格：20×100μl
本公司生产的JM109感受态细胞采用经特殊工艺处理得到，可用于DNA的化学转化。使用pUC18质粒检测，转化效率可达108cfu/μg，-70℃保存几个月转化效率不发生改变。

基因型：endA1 recA1 gyrA96 thi-1 hsdR17 (rk-,mk+) relA1 supE44 D (lac-proAB) [F′traD36 proAB laqI qZΔM15]

特点：用于蓝白斑筛选；recA1和endA1的突变有利于克隆DNA的稳定和高纯度质粒DNA的提取。

操作方法：(以下操作均按无菌条件的标准进行)
1、取感受态细胞置于冰浴中，如需分装可将刚融化细胞悬液分装到无菌预冷的离心管中，置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100μl，可以根据实际情况分装使用。应注意所用DNA体积不要超过感受态细胞悬液体积的十分之一。以下实验以100μl感受态细胞为例。
2、向感受态细胞悬液中加入目的DNA(50μl的感受态细胞能够被1 ng超螺旋质粒DNA所饱和)，轻轻旋转离心管以混匀内容物，在冰浴中静置30分钟。
3、将离心管置于42℃水浴中放置45秒，然后快速将管转移到冰浴中，使细胞冷却2-3分钟，该过程不要摇动离心管。
4、向每个离心管中加入500μl 无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素)， 混匀后置于37℃摇床振荡培养45分钟(150转/分钟)，目的是使质粒上相关的抗性标记基因表达，使菌体复苏。
5、将离心管内容物混匀，吸取100μl已转化的感受态细胞加到含相应抗生素的SOB或LB固体琼脂培养基上，用无菌的弯头玻棒轻轻的将细胞均匀涂开。将平板置于室温直至液体被吸收，倒置平板，37℃培养12—16小时。
注意：涂布用量可根据具体实验来调整。如转化的DNA总量较多，可取更少量转化产物涂布平板；反之，如转化的DNA总量较少，可取200—300μl转化产物涂布平板。如果预计的克隆较少，可通过离心(4,000 rpm, 2分钟)后吸除部分培养液，悬浮菌体后将其涂布于一个平板中。(涂布剩余的菌液可置于4℃保存，如果次日的转化菌落数过少可以将剩下的菌液再涂布新的培养板)

注意事项：
1、感受态细胞应保存在-70℃，不可多次冻融和放置时间过长，以避免感受态细胞的转化效率。
2、进行转化操作时，应根据相应温度及无菌条件的要求进行。
3、为防止转化实验不成功，可以保留部分连接反应液，以重新转化，将损失降到ZD。

储存条件：-70℃，有效期6个月。


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·EB染色液
编号：RFT152
英文名称：EB staining solution
规格：10ml
本品是EB的水溶液，浓度为10mg/ml。EB(溴化乙锭)能与核酸分子特异结合，用于观察琼脂糖或聚丙烯酰胺凝胶中DNA或RNA分子。广泛应用于核酸电泳前后的染色以及流式细胞仪的样品染色处理等。溴化乙锭(Ethidium Bromide；C21H20N3Br；分子量为394.32)含有一个可以嵌入DNA 碱基的三环平面基团。它与DNA 的结合没有碱基序列特异性。大约每2.5 个碱基插入一个溴化乙锭分子。当染料分子插入后，紫外激发后呈现荧光，可以检测到10ng 的DNA 条带。

使用方法：
使用前，先离心快甩EB溶液至管底，以防开盖后EB造成的污染。

琼脂糖电泳凝胶的制备及染色(预染法)：
1. 按照所需浓度称取琼脂糖，加入TAE或TBE缓冲液，在微波炉中加热至彻底溶解。
2. 等凝胶温度降至大约50-60℃以下时，加入10 mg/ml EB溶液至终浓度为0.5μg/ml (如100ml凝胶加入EB量为5μl)；彻底摇匀后铺胶并插入梳子。
3. 凝固后，将梳子轻轻拔出。
4. 上样电泳，电泳结束后紫外观察。

琼脂糖电泳凝胶的制备及染色(后染法)：
1. 按照所需浓度称取琼脂糖，加入TAE或TBE缓冲液，在微波炉中加热至彻底溶解。
2. 等凝胶温度降至大约50-60℃以下时，不要加入EB溶液，直接铺胶并插入梳子。
3. 凝固后，将梳子轻轻拔出。
4. 上样电泳。
5. 电泳结束后将凝胶浸泡在含有EB的TAE或TBE染色液中(染色液配制：100ml 缓冲液中加入150-200μl EB溶液，混匀)染色15-20分钟；TAE或TBE缓冲液中脱色10-15分钟。
6. 紫外观察结果。

储存条件：室温避光。


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BL1433 TE缓冲液，PH=8.0
F050318 牛IgG抗体 Bovine IgG
ARB14026 植物赤霉素(GA)尿液中含量检测 Plant gibberellic acid,ga ELISA KIT
ARB13478 鸡肾上腺髓质素(ADM)免费代测 Chicken adrenomedullin,adm ELISA KIT
ARB10627 人血清/糖皮质激素调节激酶2(SGK2)Elisa定量检测 Human serum/glucocorticoid regulated kinase 2,sgk2 isa kit
7365-45-9 N-2-哌嗪-N"-2-乙磺酸 HEPES
2-萘胺-1-磺酸 Potassium sorbate 81-16-3
HC0165 有机玻璃离心管架
PY02-011  乳糖蛋白胨培养基  250克  
ARB10356 人心肌营养素1(CT-1)elisa检测说明书 Human cardiotrophln 1,ct-1 ELISA KIT
PY08-024  牛津琼脂(OXA)平板 9CM  10皿/盒，用于李斯特氏菌的选择性分离培养
ARB12240 大鼠血管内皮细胞生长因子受体1(VEGFR-1/Flt1)含量分析 Rat vascuoar endothelial cell growth factor receptor 1,vegfr-1/flt1 ELISA KIT
DP408 RNAStore样本保存液
BTN131224 Helly固定液 Helly Solution
ARB13619 兔子促卵泡素(FSH)含量检测 Rabbit follicle-stimulating hormone,fsh ELISA KIT
F020236 兔抗人IgGxIgMxIgA抗体 Rabbit Anti-Human IgGxIgMxIgA
CD111 超纯dGTP(100mM)
ARB12806 小鼠γ干扰素诱导蛋白16/p16(IFI16/p16)酶联免疫定量检测 Mouse interferon-inducible protein 16,ifi16/p16 ELISA KIT
ARB10301 人巨噬细胞来源的趋化因子(MDC/CCL22)血清中含量检测 Human macrophage-derived chemokine,mdc ELISA KIT

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