北京DNA Marker I plus(100～700bp)厂家

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、YL及其他非科研用途。

北京百奥莱博专业生产销售北京DNA Marker I plus(100～700bp)厂家，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：北京DNA Marker I plus(100～700bp)厂家
编号：RFT017
品Pai：百奥莱博
产地：国产|进口
本产品是由7条带状双链DNA条带组成的DNA Marker，适用于琼脂糖凝胶电泳中DNA条带的分析。含有1×loading buffer，可根据实验需要，直接取2-5μl电泳，使用方便，电泳图像清晰。6条带大小和含量分别为100bp(60ng/5μl)，200bp(50ng/μl)，300bp(30ng/μl)，400bp(40ng/μl)，500bp(50ng/μl)，600bp(50ng/μl)，700bp(70ng/μl)。该Marker适用于DNA*(代"片")段大小的确定和对DNA含量的精确定量。



使用方法：
1. 取2-5μl本产品加入到琼脂糖凝胶的加样孔中就行电泳。
注：根据电泳梳子的厚度和宽度确定上样量。每1mm×1mm(厚度×宽度)加样孔上样1μl；窄齿梳子(一般为1mm×2mm)上样2μl；宽齿梳子(一般为1mm×5mm)上样5μl。如果使用厚齿梳子或宽于5mm的梳子，可以适当调整上样量。
2. 建议电泳条件：凝胶浓度为2.0-2.5％，凝胶长度5-7cm，电泳电压4-10v/cm，电泳时间20-25分钟。
3. 通过EB染色后紫外灯下观察条带。

注意事项：
1. 琼脂糖的质量对DNA的电泳有很大影响，电泳时请尽量使用质量优等的琼脂糖。
2. 请使用新鲜配制的电泳缓冲液和新鲜配制的琼脂糖凝胶进行电泳，以保证Marker良好的分离效果。

储存条件：-20℃，有效期1年。

北京DNA Marker I plus(100～700bp)厂家极具性价比，此外，我公司正火爆促销以下产品：

·DH5α化学感受态细胞
编号：RFT166
英文名称：DH5α Competent cell
规格：20×100μl
本公司生产的DH5α感受态细胞采用经特殊工艺处理得到，可用于DNA的化学转化。使用pUC18质粒检测，转化效率可达10^8cfu/μg。
基因型：supE44△lacU169(j80 lacZ△M15)hsdR17 recA1 end A1 gyrA96 thi-1 relA1

特点：一种用于铺制与培养质粒平板和粘粒平板的重组缺陷的YZ型菌株。其j80 lacZ△M15基因的产物可与pUC载体编码的 b-半乳糖苷酶氨基端实现a互补，可用于蓝白斑筛选。

操作方法：(以下操作均按无菌条件的标准进行)
1、取感受态细胞置于冰浴中，如需分装可将刚融化细胞悬液分装到无菌预冷的离心管中，置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100μl，可以根据实际情况分装使用。应注意所用DNA体积不要超过感受态细胞悬液体积的十分之一。以下实验以100μl感受态细胞为例。
2、向感受态细胞悬液中加入目的DNA(100μl的感受态细胞能够被1 ng超螺旋质粒DNA所饱和)，轻轻旋转离心管以混匀内容物，在冰浴中静置30分钟。
3、将离心管置于42℃水浴中放置45-90秒，然后快速将管转移到冰浴中，使细胞冷却2-3分钟，该过程不要摇动离心管。
4、向每个离心管中加入500μl 无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素)， 混匀后置于37℃摇床振荡培养45分钟(150转/分钟)，目的是使质粒上相关的抗性标记基因表达，使菌体复苏。
5、将离心管内容物混匀，吸取100μl已转化的感受态细胞加到含相应抗生素的SOB或LB固体琼脂培养基上，用无菌的弯头玻棒轻轻的将细胞均匀涂开。将平板置于室温直至液体被吸收，倒置平板，37℃培养12-16小时。
注意：涂布用量可根据具体实验来调整。如转化的DNA总量较多，可取更少量转化产物涂布平板；反之，如转化的DNA总量较少，可取200-300μl转化产物涂布平板。如果预计的克隆较少，可通过离心(4000 rpm, 2分钟)后吸除部分培养液，悬浮菌体后将其涂布于一个平板中。(涂布剩余的菌液可置于4℃保存，如果次日的转化菌落数过少可以将剩下的菌液再涂布新的培养板)

注意事项：
1、感受态细胞应保存在-70℃，不可多次冻融和放置时间过长，以避免感受态细胞的转化效率。
2、进行转化操作时，应根据相应温度及无菌条件的要求进行。
3、为防止转化实验不成功，可以保留部分连接反应液，以重新转化，将损失降到ZD。

储存条件：-70℃，有效期6个月。


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·植物基因组DNA提取试剂盒
编号：RFT038
英文名称：Plant genomic DNA Extraction Kit
规格：50次
本试剂盒采用可以特异性结合DNA的离心吸附柱和独特的缓冲液系统，能提取多种植物细胞/组织中的基因组DNA。离心吸附柱可以GX、专一吸附DNA，可ZD限度去除杂质蛋白及细胞中其他有机化合物。提取的基因组DNA*(代"片")段大，纯度高，质量稳定可靠。使用本试剂盒回收的DNA可适用于各种常规操作，包括酶切、PCR、文库构建、Southern杂交等实验。

试剂盒组成：

 

组份	RTG2404-01(50次)	贮存方式
缓冲液AP1	25 ml	室温
缓冲液AP2	10 ml	室温
缓冲液AP3(浓缩液)	15 ml	室温
漂洗液PW(浓缩液)	15 ml	室温
洗脱缓冲液EB	15 ml	室温
RNase A(10 mg/ml)	300μl	-20℃
吸附柱CG(白色)	50套	室温
过滤柱CF	50套	室温
说明书	1份

提取获得效率：

材料	DNA得量(μg/100mg)
大麦	8-12
玉米	15-20
番茄	4-6
油菜	2-4
菠菜	5-10
烟草	20-25
小麦	25-30

准备工作：
1、准备液氮；65℃水浴；无水乙醇；1.5ml灭菌离心管。
2、按照标签所示在缓冲液AP3和漂洗液PW中加入无水乙醇，混匀后盖紧瓶盖后室温贮存备用。
3、每次使用前请检查缓冲液AP1，缓冲液AP2和缓冲液AP3是否有沉淀生成，如果出现沉淀，37℃温浴至沉淀溶解后再使用。

操作步骤：
如非指出，所有离心步骤均为使用台式离心机在室温下离心。

1、取适量植物新鲜组织500mg-1g加入液氮充分研磨，取约100mg粉末置于1.5ml离心管中，加入400μl 缓冲液AP1和6μl RNaseA (10mg/ml)，漩涡震荡1分钟。
2、将离心管放在65℃水浴10分钟，水浴过程中颠倒离心管以混合样品数次。
3、加入130μl 缓冲液AP2，颠倒混匀，冰浴5分钟。
4、12,000rpm离心5分钟。
注：此步骤离心去除去垢剂，蛋白以及多糖等杂质。
5、取上清(通常为400μl)转移到过滤柱CF中，12,000rpm 离心1分钟。
6、将滤出液转移到1.5 ml离心管中，加入1.5倍体积(例如400μl的上清液加600μl缓冲液AP3)缓冲液AP3(使用前请注意是否已经加入无水乙醇)，立即颠倒混匀，简短离心以去除管盖内壁的水珠。
7、吸取步骤6中的混合液加入到吸附柱CG中(吸附柱放入收集管中)，12,000 rpm离心1分钟，倒掉废液，吸附柱CG放回收集管中。
注：离心吸附柱的ZD容积是700μl，如果一次不能完全上柱，可以分次上柱离心，保证全部溶液全部加到离心柱中。
8、向吸附柱CG中加入500μl漂洗液PW(使用前请先检查是否已加入无水乙醇)，12,000 rpm离心1分钟，倒掉废液，吸附柱CG放入收集管中。
9、重复步骤8。
10、可选步骤：如果离心柱的吸附膜上有颜色，向吸附柱CG中加入500μl无水乙醇，12,000 rpm离心1分钟，倒掉废液，吸附柱CG放入收集管中。
11、将吸附柱CG放回废液收集管中，12,000 rpm离心2分钟。
注：此步骤非常重要，目的是将吸附柱中残余的漂洗液去除。漂洗液中乙醇的残留会影响后续的酶反应(酶切、PCR等)实验。
12、将吸附柱CG转入一个干净的1.5ml离心管中，向吸附膜的中间部位悬空滴加50-100μl经65℃水浴预热的洗脱缓冲液EB，室温放置2分钟，12,000 rpm g离心2分钟。
注意：
a.洗脱缓冲液体积不少于50μl，体积过小影响回收效率。
b.洗脱液的pH值对于洗脱效率有很大影响。若用水做洗脱液应保证其pH值在7.0-8.5范围内，pH值低于7.0会降低洗脱效率。
13、DNA产物-20℃保存。

DNA浓度及纯度检测：
基因组DNA*(代"片")段的大小与样品保存时间、操作过程中的剪切力等因素有关。提取的DNA*(代"片")段可用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测浓度与纯度。可配制0.8-1.0％琼脂糖凝胶，使用λ/HindIII判断基因组的大小，完整的基因组大小应在23kb以上。使用分光光度计检测时， OD260/OD280比值应为1.7–1.9之间，如果洗脱时不使用洗脱缓冲液，而使用去离子水洗脱，比值可能偏低，但并不表明DNA纯度不高。

储存条件：室温，有效期12个月。


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