Zeocin 博莱霉素(Sh ble基因筛选抗生素)
产品关键词:
Zeocin 博莱霉素(博来霉素);Phleomycin 腐草霉素;Sh ble基因;链霉菌Streptomyces verticillus轮枝链霉菌;Hygromycin B潮霉素B;G418 遗传霉素;CAS NO.:11006-33-0
基本描述:
Zeocin™是博来霉素/腐草霉素(bleomycin/phleomycin)抗生素家族的成员之一,从轮枝链霉菌Streptomyces verticillus中分离得到,对细菌、真菌(包括酵母菌)、植物和哺乳动物细胞具很强的毒性。来自Streptoalloteichus hindustanus的Sh ble基因赋予Zeocin抗性。
Zeocin™是腐草霉素D1的商业名称,一种碱性、水溶性、铜离子螯合的糖肽抗生素。铜离子的存在使得溶液为蓝色,此铜螯合的形式为无活性。一旦进入细胞后,二价铜离子(Cu2+)被还原为一价铜离子(Cu+),并被细胞内的巯基化合物去除。铜离子被去除后,Zeocin™被活化,嵌入DNA使其断裂,终导致细胞死亡。
抗性基因:
Zeocin™抗性由编码一种13,665Da大小蛋白的Sh ble基因(Streptoalloteichus hindustanus bleomycin gene)赋予,该蛋白化学计量方式结合Zeocin™,YZ其DNA双链切割活性。因此,能表达此蛋白的真核和原核宿主细胞被赋予Zeocin™抗性。
基本特性:
1) CAS NO.:11006-33-0
2) 化学式:C55H83N19O21S2Cu
3) 分子量:1137.41 g/mol
4) 外观:蓝色溶液(100mg/ml in deionized,autoclaved water)
5) 运输:冰袋运输
6) 保存:-30°C~-10°C,至少1年有效
7) 大肠杆菌筛选:25-50μg/mL(低盐LB培养基,NaCl浓度不能超过5g/L)
8) 酵母菌筛选:50-300μg/mL(YPD或基本培养基)
9) 哺乳动物细胞筛选:50-1000μg/mL(合适培养基,根据细胞系而不同)
注意事项:
1) Zeocin™对光敏感,需将抗生素,或含该抗生素的平板或培养基置于黑暗处。
2) 降低细菌培养基的盐浓度,调整pH到7.5使其保持活性,因高离子强度和酸或碱性都会YZZeocin™活性;
3) 储存Zeocin™在-30°C~-10°C,使用前需冰上融化。
4) Zeocin™有毒,为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用方法(应用举例,具体见Maokangbio网站整理):
A、大肠杆菌(E. Coli.)
选择浓度:25-50μg/mL用于大肠杆菌筛选
B、 酵母菌(Yeast)
选择浓度:50-300μg/mL,取决于酵母菌类型、培养基pH和离子强度。建立杀灭曲线确定能杀死未转化宿主细胞的Z低Zeocin™浓度。
C、哺乳动物细胞(Mammalian cells)
50-1000μg/mL用于筛选稳定转染细胞系(平均常用浓度为250-400μg/mL)。取决于细胞系,需要2-6周用Zeocin™筛选得到稳转集落(foci)。进行稳转株正式筛选前,需确定能够杀死所有未转染宿主细胞的Z低Zeocin™浓度。
订购信息:原装进口,现货供应。欢迎来电订购,:,:,杨先生。
产地 | 产品名称 | 产品货号 | 规格 | 单位 | 促销价(元) |
Invitrogen | Zeocin 博莱霉素(100mg/ml) | R250-01 | 125mg(1.25ml) | 支 | 450 |
Invitrogen | Zeocin 博莱霉素(100mg/ml) | R250-01 | 1g(8 x 1.25ml) | 盒 | 2650 |
【注意】:对Zeocin不敏感的细胞,如丝状真菌和一些酵母菌,建议使用腐草霉素(货号:MS0008-1ML),其抗性同样源于Sh ble基因。
— —Written/Edited by V. Shallan【版权归MKBio懋康所有】
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