Blasticidin S 杀稻瘟菌素S(灭瘟素,bsr/BSD筛选抗生素)产品关键词:
Blasticidin 杀稻瘟菌素;Invivogen 原装;10mg/ml;bls 乙酰转移酶基因;bsr或BSD脱氨酶基因;遗传霉素G418;Hygromycin B 潮霉素;CAS:3513-03-9
基本介绍:
Blasticidin S(杀稻瘟菌素),也称为稻瘟散,灭瘟素S盐酸盐,从灰色链霉菌Streptomyces griseochromogenes分离到的一种核苷肽类抗生素。
作用机制— —主要通过干扰核糖体中肽键的形成来特异性YZ原核和真核细胞的蛋白质合成。
Blasticidin S用于筛选携带bsr或BSD基因的转染细胞。杀稻瘟菌素S具有快速而的作用模式,一个星期内完成阳性克隆的筛选,且很低的抗生素浓度便能导致细胞迅速死亡。
抗性基因:
三种杀稻瘟菌素抗性基因已被克隆且测序:一种是乙酰转移酶基因,来自杀稻瘟菌素产生菌的bls基因;另外两种是脱氨酶基因(deaminase genes),分别为来自bacillus cereus 蜡样芽孢杆菌的bsr基因,和来自Aspergillus terreus 土曲霉的BSD基因。bsr和 BSD 基因是主要的选择性标记基因,用于哺乳动物和植物细胞的转基因实验。虽然bsr和 BSD 基因多用于哺乳动物细胞的筛选标记,但也可以用于E. Coli。
筛选浓度:
A,大肠杆菌(E. Coli)【常用浓度:25-100µg/ml】
E. Coli对Blasticidin敏感性很弱,但含Blasticidin抗性的转化子可在低盐LB固体培养基(pH 8.0),100µg/ml Blasticidin的条件下进行筛选。高pH可增强抗生素筛选活性,为了达到效果,推荐使用Invivogen公司的Fast-Media® Blas培养基联合筛选。
B,哺乳动物(Mammalian Cells)【常用浓度:1-10µg/ml】
哺乳动物细胞系Blasticidin的常用工作浓度范围1-10 μg/ml,少数情况高达30μg/ml。初次实验建议通过灭杀曲线来确定使用浓度。
某些细胞系用Blasticidin进行筛选的建议浓度:
细胞系 | 培养基 | 筛选浓度 |
CHO | DMEM | 5-10μg/ml |
HEK293 | DMEM | 5-15μg/ml |
HeLa | DMEM | 2.5-10μg/ml |
Neuro2a | DMEM | 30μg/ml |
THP-1 | RMPI | 10μg/ml |
实验步骤:
1)Blasticidin S通常使用浓度为1-10 μg/ml,初次实验建议通过灭杀曲线来确定使用浓度。
2)转染48h后,用含适宜浓度Blasticidin S的新鲜培养基将细胞传代;(注:细胞处于活跃分裂期时抗生素工作。细胞密度太高,抗生素效率降低。分盘时覆盖率不超过25%)
3)每3-4天去除培养基,加入含相同浓度Blasticidin的新鲜培养基;
4)7天后检测细胞集落形成。根据宿主细胞种类和转染/筛选效率,集落形成可能需要再增加一周或更久。
5)转移5-10个抗性克隆到35mm细胞培养盘。加入选择培养基维持培养7天,再进行后续实验。
质量控制:
浓度10mg/ml,每一批次都经过严格检测,确保每一批次间产品质量连续稳定。
纯度:≥ 95% (HPLC)
内毒素水平:< 1 EU/mg
理化特性:pH, 透明
细胞培养检测:用Blasticidin 敏感和Blasticidin抗性哺乳动物细胞系检测产品活性
无细胞毒性痕量污染物:长期培养Blasticidin抗性细胞确认无细胞毒性
保存:4°C短期或-20°C长期保存,避免反复冻融。
订购信息:Invivogen原装产品,现货供应。质量和售后保障。欢迎来电咨询,。
品名 | 产地 | 货号 | 规格 | 特价(元) | 库存 |
Blasticidin(杀稻瘟菌素,灭瘟素) | Invivogen | ant-bl-1 | 10mg | 515 | 现货 |
Blasticidin(杀稻瘟菌素,灭瘟素) | Invivogen | ant-bl-1 | 2×10mg | 965 | 现货 |
Blasticidin(杀稻瘟菌素,灭瘟素) | Invivogen | ant-bl-1 | 5×10mg | 2100 | 现货 |
另提供我司MKbio进口原料制备的Blasticidin(杀稻瘟菌素)10mg/ml in HEPES buffer,pH 7.5,无菌溶液,价格更加经济实惠,欢迎选购。
— —Written/Edited by V. Shallan【版权归MKBio懋康所有】
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