【产品名称】
通用名:猪弓形虫IgG抗体检测试剂盒(酶联免疫法)
英文名:Diagnostic Kit for Antibodies to Porcine Toxoplasma(ELISA)
【包装规格】 96T×1/盒
【预期用途】
猪弓形虫病是由弓形虫(Toxoplasma,TOXO)引起的一种原虫病,又称弓形体病。弓形虫病是一种人畜共患病,宿主的种类十分广泛,人和动物的感染率都很高。
本试剂盒用于检测猪血清或血浆中弓形虫特异性抗体,评估猪场弓形虫感染状况。
【原 理】
本试剂盒系由预包被弓形虫(TOXO)重组抗原的酶标板、酶标记物及其他配套试剂组成,应用酶联免疫法(ELISA)原理检测猪血清、血浆样本中弓形虫抗体。实验时在酶标板中加入对照血清和待检样本,经温育后若样品中含有弓形虫抗体,则将与酶标板上抗原结合,经洗涤除去未结合的其他成分后;再加入酶标记物,与酶标板上抗原抗体复合物发生特异性结合;再经洗涤除去未结合的酶标记物,在孔中加TMB底物液,与酶反应形成蓝色产物,显色深浅与样品中的特异性抗体含量成正相关;加入终止液终止反应后,产物变为黄色;用酶标仪在450nm波长测定各反应孔中的吸光值,即可知样品是否含有弓形虫抗体。
【试剂盒组成】
序号 |
名称 |
规格(96T×1) |
1. |
酶标板 |
96T×1 |
2. |
酶标记物 (红盖) |
11ml×1 |
3. |
样品稀释液 (黄盖) |
25ml×1 |
4. |
20浓缩洗涤液 |
20ml×1 |
5. |
底物液A (白盖) |
6ml×1 |
6. |
底物液B (黑盖) |
6ml×1 |
7. |
终止液 (黄盖) |
6ml×1 |
8. |
阳性对照 (红盖) |
0.5 ml×1 |
9. |
阴性对照 (绿盖) |
0.5 ml×1 |
10. |
盖板膜 |
1张 |
11. |
说明书 |
1份 |
【适用仪器】 含450nm、630nm波长的酶标仪,37℃恒温设备,可调微量移液器。
【样品准备】
1.取动物全血按常规方法制备血清,要求血清清亮,无溶血、无污染。样品1周内可于2~8℃保存,长期需置-20℃保存。
2.用样品稀释液将待检血清按100倍稀释(如2μl血清加入198μl样品稀释液中,混匀)。阴、阳性对照不用稀释。
3.浓缩洗涤液使用前应恢复至室温使沉淀溶解,然后用蒸馏水或去离子水作20倍稀释。
【检验方法】
1.使用前将试剂盒置室温30分钟,恢复至室温。
2.取所需用量酶标板条,设空白对照1孔、阴性/阳性对照各2孔,未用的板条尽快密封,2~8℃保存。
3.空白对照孔加样品稀释液100μl;阴、阳性对照孔分别加入阴、阳性对照100μl;样品孔每孔加入稀释后的样品100μl。
4.混匀,置37℃反应30分钟。
5.扣去孔内液体,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,重复洗涤5次,拍干。
6.每孔加酶标记物100μl(空白孔除外)。置37℃反应30分钟。
7.洗涤,同步骤5。
8.每孔依次加底物液A、底物液B各50μl,混匀,37℃避光反应10分钟。
9.每孔加终止液50μl,混匀,用空白孔调零,于450nm(可用630nm作参比波长)测定各孔吸光值(A值)。
【参考值】 实验正常的情况下,阴性对照≤0.20,阳性对照≥0.5。
【检验结果的解释】
1.C.O(临界值)=2.1×阴性对照均值(阴性对照均值小于0.1时按0.1计算);
3.样品值>C.O为阳性,样品值≤C.O为阴性。
【试验方法的局限性】
该试验仅作为定性检测猪血清或血浆中弓形虫IgG抗体。
【注意事项】
1.实验操作时需戴手套、穿工作衣,严格健全和执行消毒隔离制度,各种实验废弃物都应按传染物处理。
2.终止液具有腐蚀性,应避免接触皮肤和衣物,如不慎接触请立即用大量自来水冲洗。
3.酶标板从冷藏环境中取出时应恢复至室温方可开袋,未用完的酶标板需放入有干燥剂的密封袋中保存。
4.浓缩洗涤液在低温时容易结晶,使用时需恢复至室温以完全溶解。
5.洗涤时各孔均需加满液体,防止孔口有游离酶不能洗净。
6.用于检测的样品应保持新鲜。
7.试验结果的判定必须以酶标仪读数为准。
8.不同批号试剂组分不得混用。
【储 存】
原包装应储存于2~8℃保鲜冷藏,切勿冷冻。
【有效期】
有效期12个月;生产日期、有效期、生产批号见外包装