北京活细胞/凋亡细胞/坏死细胞鉴别试剂盒(AO/EB法.荧光显微镜)说明书

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北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域，致力于为客户提供包括北京活细胞/凋亡细胞/坏死细胞鉴别试剂盒(AO/EB法.荧光显微镜)说明书在内的一系列细胞生物学试剂产品，并提供一系列相关的技术服务。

名称：北京活细胞/凋亡细胞/坏死细胞鉴别试剂盒(AO/EB法.荧光显微镜)说明书
产地：国产|进口
品Pai：百奥莱博
英文名：Normal/Apoptotic/Necrotic Cell Detection Kit
编号：KFS250
规格：50T|100T
细胞坏死和凋亡是两种截然不同的细胞学现象，二者发生的过程在形态学上有很大的区别。在细胞坏死时，细胞膜发生渗漏，细胞内容物包括细胞器以及染色质释放到胞外。而在细胞凋亡过程，起始阶段，染色质固缩、分离并沿核膜分布，细胞质亦发生固缩，但细胞膜依然完整未失去选择透性；在凋亡后期，核染色质断裂为大小不等的片断，与某些细胞器如线粒体一起聚集，为反折的细胞膜所包围，以后逐渐分离，形成凋亡小体。

本产品提供的染料可以分别对正常细胞、凋亡细胞和坏死细胞的细胞核进行染色。其染色原理为：DyeReagent 1 只进入活细胞，正常的细胞核及处于凋亡早期的细胞核呈现绿色；Dye Reagent 2 只能进入死细胞，将死细胞以及凋亡晚期的细胞核染成橙色。因此通过在荧光显微镜下观察细胞显色和形态的不同，可以同时将正常细胞、坏死细胞、凋亡早期细胞和凋亡晚期细胞区分开来。

注意事项
1. Dye Reagent 1、2 及Mixed Dyes Reagent 有毒，操作时请戴手套；
2. 根据需要检测的实际样品数在使用前将两种染料混合，剩余混合染液注意避光保存留待下次使用；
3. 利用血球计数板进行该项操作时，不要用血计板配套的那种质地较硬的盖玻片，而用普通的盖玻片反而更利于结果的观察。

操作方法
1. 用适当的方法诱导细胞凋亡；
2. 用PBS 洗涤细胞二次，并配成浓度为5×105~6×106cells/ml 细胞悬液；
3. 将Dye Reagent 1 和Dye Reagent 2 等体积混合形成Mixed Dyes Reagent（见注意事项2）；
4. 吸取25μL 的细胞悬液同1μL 的Mixed Dyes Reagent 轻轻混匀；
5. 吸取上述10μL 的混合液置于一洁净的载玻片，并用盖玻片盖上细胞（见注意事项3）；
6. 荧光显微镜510nm 激发波长观察，分别对下列四类细胞进行计数，注意细胞总量须超过200 个。

储存：2-8℃，避光，有效期12个月。

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·P53蛋白检测试剂盒
编号：KFS228
英文名称：P53 Detection Assay(Western Blot)
规格：50T
本试剂盒用于从哺乳动物组织和培养细胞中提取全蛋白， 用含有蛋白酶YZ剂及磷酸酶YZ剂的裂解缓冲液LysisBuffer 匀浆裂解组织或细胞，作用温和，提取过程简便GX。获得的全蛋白可用于Western Blot、免疫共沉淀等后续研究（本试剂盒包含兔抗P53抗体），但不能用于蛋白激酶及磷酸酶免疫共沉淀的研究，因本试剂盒中包括这两种酶的YZ剂。

·细胞膜红色荧光染料(DiD)
编号：KFS152
英文名称：DiD
规格：10mg
长链二烷基羰花青化合物，特别是Dil，广泛应用于固定和非固定的组织与细胞中，进行顺行或逆行的神经示踪分析。Dil 不会影响细胞的活力、生长以及基本生理特性。

Dil 标记运动神经元，可在培养基条件下持续跟踪长达四周，在体内长达一年。染料通过在质膜中的缓慢横向扩散均匀标记神经元，0.2~0.6mm/每天/固定标本，在活体组织里，可以达到6mm/每天。经过醛固定的组织，Dil 的扩增可以持续长达1~2 年。一般情况下未标记的染料不会向非标记的细胞转移，除非质膜被破坏，比如切片部位。DiD(MW:959.91)

储存：-20℃，避光，有效期12个月。

·细胞色素C蛋白检测试剂盒
编号：KFS225
英文名称：cytochrome C Detection Assay(Western Blot)
规格：50T
本试剂盒用于从哺乳动物组织和培养细胞中提取全蛋白， 用含有蛋白酶YZ剂及磷酸酶YZ剂的裂解缓冲液LysisBuffer 匀浆裂解组织或细胞，作用温和，提取过程简便GX。获得的全蛋白可用于Western Blot、免疫共沉淀等后续研究（本试剂盒包含兔抗细胞色素C抗体），但不能用于蛋白激酶及磷酸酶免疫共沉淀的研究，因本试剂盒中包括这两种酶的YZ剂。

·自噬检测试剂盒(荧光显微镜，MDC法)
编号：KFS305
英文名称：cytochrome C Detection Assay(Western Blot)
规格：100T
单丹磺酰尸胺（monodansylcadaverin, MDC）是一种荧光色素，其检测激发滤光片波长355nm。阻断滤光片波长512nm。MDC 是一种嗜酸性染色剂，通常被用作检测自噬体形成的特异性标记染色剂。

细胞自噬(autophagy)是细胞受到刺激后吞噬自身的细胞质或细胞器, ZZ将吞噬物在溶酶体内降解的过程，自噬体(autophagosome)为双层膜包被的圆形或椭圆形结构, 内含细胞质、长寿蛋白质和异常蛋白聚集物, 损伤或多余细胞器如线粒体、粗面内质网和微体、病毒和细菌等。


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