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XH105型SABC双标试剂盒(免疫组化试剂盒)多少钱由专业试剂供应商北京百奥莱博提供,用于生化科研试验,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多SABC双标试剂盒(免疫组化试剂盒)等细胞及免疫学产品请联系我司咨询订购。
名称:XH105型SABC双标试剂盒(免疫组化试剂盒)多少钱
品Pai:百奥莱博
编号:XH105
产地:国产|进口
规格:100T
试剂盒组成:
1, 封闭液:10ml,5%BSA
2, 生物素化二抗:浓缩液100ul。
3, SABC-FITC:浓缩液100ul。
4, SABC-POD:浓缩液100ul。
5, 稀释液:30ml。
6, 显色液:20×DAB显色液A,20×DAB显色液B
7, 抗荧光衰减封片剂
试剂盒简介:
本试剂盒适合于一抗为小鼠/兔IgG/山羊的免疫组化实验. DAB及FITC显色。
SABC是专为免疫组化和其他免疫检测而设计的,用以显示组织和细胞中抗原分布。链霉亲和素(StreptAvidin)是一种从链霉菌中提取的蛋白质,同亲和素一样,对生物素有极高的亲和力,亲和素是一个碱性蛋白质(IP=10),经改造后可以转变成中性蛋白质。链霉亲和素等电点接近中性,对组织和细胞的非特异吸附很低,基于链霉亲和素的免疫组化方法背景很低。SABC即StreptAvidin—Biotin Complex。SABC大约可形成一百个左右的过氧化物酶和五十个左右的链霉亲和素所构成的复合物。大量的酶将保证SABC具有很高的敏感性。
自备试剂:
1.粘片剂多聚赖氨酸。
2. 0.01 M PBS(pH7.2-7.4)
3. 0.01M柠檬酸钠缓冲液
4、抗荧光衰减封片剂
实验步骤:
以石蜡切片热修复为例
1. 切片常规脱蜡至水。3%H2O2室温5-10分钟以灭活内源性酶(如果FITC,刚可省掉此步)。蒸馏水洗3次。
2.热修复抗原:将切片浸入0.01M 枸橼酸盐缓冲液(PH6.0),电炉或微波炉加热至沸腾后断电,间隔5-10分钟后,反复1-2次。冷却后PBS(pH7.2-7.6)洗涤1-2次。
3.滴加5%BSA封闭液,室温20分钟。甩去多余液体, 不洗。
4.用稀释液将一抗(如兔抗IL-10)按一定比例稀释(稀释后的一抗4℃可保存一周),也可另行购买抗体稀释液。滴加稀释的一抗,37 ℃ 1小时左右或20℃时2小时左右。也可4℃过夜。PBS(pH7.2-7.4)洗2分钟×3次。(一抗的稀释度、孵育时间和温度与染色强度、背景有直接关系。一般来说,阳性染色强度不够时,可提高一抗浓度和延长孵育时间;背景过高时,可降低一抗浓度和缩短孵育时间。)
5.根据使用量,用稀释液将生物素化二抗浓缩液按1:100稀释成工作液(1ml稀释液加入10ul生物素化羊抗兔IgG浓缩液,混匀即成工作液。此工作液4℃可保存一周).滴加生物素化羊抗兔IgG工作液,20-37℃ 30分钟。PBS(pH7.2-7.4)洗2分钟×3次。
如果想用荧光观察,请接下面步骤,如果想用DAB显色,请跳过6-7。
6.根据使用量,用稀释液将SABC-FITC浓缩液按1:100稀释成工作液(1ml稀释液加入10ul SABC-FITC浓缩液,混匀即成SABC-FITC工作液。此工作液4℃可保存一周).滴加SABC-FITC工作液,20-37℃,30分钟(避光)。PBS(pH7.2-7.4)洗5分钟×4次。
7.滴加抗荧光衰减封片剂封片。荧光显微镜观察。
如果想用DAB显色,请接8。
8.根据使用量,用稀释液将SABC-POD浓缩液按1:100稀释成工作液(1ml稀释液加入10ul SABC-POD浓缩液,混匀即成SABC-POD工作液。此工作液4℃可保存一周).滴加SABC-POD工作液,20-37℃,30分钟。PBS(pH7.2-7.4)洗5分钟×4次。
9.DAB显色:根据用量,用PBS(pH7.2-7.4)配制,按1mlPBS加入50ul 20×DAB显色液A,加入50ul 20×DAB显色液B 。混匀后加至切片。室温显色, 镜下控制反应时间,一般在5-30分钟之间。蒸馏水洗涤终止反应。
10.苏木素轻度复染。脱水,透明,封片。显微镜观察。
对于细胞片,常规固定后,PBS漂洗两次,再用0.5%Txiton X-100室温20分钟,PBS漂洗两次,3%H2O2(如果FITC,刚可省掉此步)处理15分钟;PBS漂洗两次,下接上面第4步。
对于冰冻切片,固定后,可用PBS漂洗两次,再接上面第二步。
注意事项:如果染色背景过高,在SABC反应之后,DAB显色之前,用加有0.01—0.02% TWEEN-20的PBST(pH7.2-7.4)洗涤切片4次,PBS洗2次,然后DAB显色。
因为免疫组化指标众多,标本不一,此步骤仅作参考。
注意事项:如果染色背景过高,在SABC反应之后,用加有0.01—0.02% TWEEN-20的PBST(pH7.2-7.4)洗涤切片4次,PBS洗2次,然后封片观察。
关于XH105型SABC双标试剂盒(免疫组化试剂盒)多少钱的更详细说明,请致电我公司咨询,我们将以最饱满的热情为您提供解答,此外,我公司专业供应下列产品:
·SABC(小鼠IgG)-POD免疫组化试剂盒
编号:XH111
规格:100T
试剂盒组成:
1, 封闭液:10ml,5%BSA
2, Bio-羊抗小鼠IgG:浓缩液100ul。
3, SABC-POD:浓缩液100ul。
4, 稀释液:30ml。
5, 显色液:20×DAB显色液A,20×DAB显色液B
试剂盒简介:
本试剂盒适合于一抗为小鼠IgG的免疫组化实验. DAB显色。
SABC是专为免疫组化和其他免疫检测而设计的,用以显示组织和细胞中抗原分布。链霉亲和素(StreptAvidin)是一种从链霉菌中提取的蛋白质,同亲和素一样,对生物素有极高的亲和力,亲和素是一个碱性蛋白质(IP=10),经改造后可以转变成中性蛋白质。链霉亲和素等电点接近中性,对组织和细胞的非特异吸附很低,基于链霉亲和素的免疫组化方法背景很低。SABC即StreptAvidin—Biotin Complex。SABC大约可形成一百个左右的过氧化物酶和五十个左右的链霉亲和素所构成的复合物。大量的酶将保证SABC具有很高的敏感性。
自备试剂:
1.粘片剂多聚赖氨酸
2. 0.01 M PBS(pH7.2-7.4)
3. 0.01M柠檬酸钠缓冲液
4、苏木素
实验步骤:
以石蜡切片热修复为例
1. 切片常规脱蜡至水。
2. 3%H2O2室温5-10分钟以灭活内源性酶。蒸馏水洗3次。
3.可选步聚:a、热修复抗原,将切片浸入0.01M 枸橼酸盐缓冲液(PH6.0),电炉或微波炉加热至沸腾后断电,间隔5-10分钟后,反复1-2次。冷却后PBS(pH7.2-7.6)洗涤1-2次。b、酶消化,滴加消化液,37度10分钟, PBS(pH7.2-7.6)洗涤2-3次。c、不处理,直接进入下一步。
4. 滴加5%BSA封闭液,室温20分钟。甩去多余液体, 不洗。
5.用稀释液将一抗(如小鼠抗IL-10)按一定比例稀释(稀释后的一抗4℃可保存一周),也可另行购买抗体稀释液。滴加稀释的一抗,37 ℃ 1小时左右或20℃时2小时左右。也可4℃过夜。PBS(pH7.2-7.4)洗2分钟×3次。(一抗的稀释度、孵育时间和温度与染色强度、背景有直接关系。一般来说,阳性染色强度不够时,可提高一抗浓度和延长孵育时间;背景过高时,可降低一抗浓度和缩短孵育时间。)
6.根据使用量,用稀释液将Bio-羊抗小鼠浓缩液按1:100稀释成工作液(1ml稀释液加入10ul生物素化羊抗小鼠IgG浓缩液,混匀即成工作液。此工作液4℃可保存一周).滴加生物素化羊抗小鼠IgG工作液,20-37℃ 30分钟。PBS(pH7.2-7.4)洗2分钟×3次。
7.根据使用量,用稀释液将SABC-POD浓缩液按1:100稀释成工作液(1ml稀释液加入10ul SABC-POD浓缩液,混匀即成SABC-POD工作液。此工作液4℃可保存一周).滴加SABC-POD工作液,20-37℃,30分钟。PBS(pH7.2-7.4)洗5分钟×4次。
8.DAB显色:根据用量,用PBS(pH7.2-7.4)配制,按1mlPBS加入50ul 20×DAB显色液A,加入50ul 20×DAB显色液B 。混匀后加至切片。室温显色, 镜下控制反应时间,一般在5-30分钟之间。蒸馏水洗涤终止反应。
9.苏木素轻度复染。脱水,透明,封片。显微镜观察。
对于细胞片,常规固定后,PBS漂洗两次,再用0.5%Txiton X-100室温20分钟,PBS漂洗两次,3%H2O2处理15分钟;PBS漂洗两次,下接上面第4步。
对于冰冻切片,固定后,可用PBS漂洗两次,再接上面第二步。
注意事项:如果染色背景过高,在SABC反应之后,DAB显色之前,用加有0.01—0.02% TWEEN-20的PBST(pH7.2-7.4)洗涤切片4次,PBS洗2次,然后DAB显色。
因为免疫组化指标众多,标本不一,此步骤仅作参考。
XH105型SABC双标试剂盒(免疫组化试剂盒)多少钱关键词:SABC双标试剂盒(免疫组化试剂盒),百奥莱博,XH105
·植物线粒体提取试剂盒
编号:XH053
规格:50T/100T
二,说明
植物线粒体提取试剂盒可用于从植物叶片组织中分离出完整而纯化的线粒体。适合于田间采摘或者实验室培养的植物叶片中线粒体的制备。其制备物,可以被用于细胞凋亡、信号传递、代谢和蛋白组学等的研究。但不适用于进一步DNA提取。
三,操作步骤
1. 样本采集前处理:无论田间自然生长还是实验室组织培养,采摘前须避光生长24-48小时,以减少叶片组织中糖类及叶绿体含量。取适量Lysis Buffer,加入0.5% β-巯基乙醇,10ml Lysis Buffer加入50ulβ-巯基乙醇,混匀,形成Lysis Buffer/β-巯基乙醇溶液,此溶液可2-8度保存一个月。
2. 叶片用蒸馏水清洗2-3次,滤纸吸干,有条件请用液氮研磨叶片1-2克,研磨完后,取800mg左右研磨的叶片粉,加入1.5ml预冷的Lysis Buffer/β-巯基乙醇溶液,混匀。如果无条件(无液氮),请预冷研钵,取洗过的叶片1000 mg,用剪刀剪为碎块放入玻璃匀浆器或者研钵中。加入1.5ml预冷的Lysis Buffer/β-巯基乙醇溶液,冰上研磨至看不见明显组织块;
3. 将研磨物放置合适的离心管,4℃,1000× g 离心5 min;
4. 将上清转移到一新的离心管中,在沉淀中加入0.5ml Lysis Buffer/β-巯基乙醇溶液,混匀,再次4℃,1000× g 离心5 min,取上清;合并两次上清,将上清4℃ 1000× g 再次离心5 min。
5.取上清,加入一新的离心管中,4℃, 16,000 × g 离心10 min。离心后的上清含胞浆成分,可从中提取胞浆蛋白。将上清转移到新离心管,线粒体沉淀在管底。
6. 在线粒体沉淀中加入0.5 mL Wash Buffer重悬线粒体沉淀,4℃,1000× g 离心5 min;
7.取上清,加入一新的离心管中,4℃, 16,000 × g 离心10 min。弃上清,高纯度的线粒体沉淀在管底;
8. 用50 -100μL Store Buffer 或合适的反应缓冲液重悬线粒体沉淀,立即使用或-70℃保存。
四 注意事项:
1. 以离心力g计算正确的离心速度,不同的离心机可据此精确计算离心速度。
2. 进行Western Blot和2D-胶电泳,可直接在第7步的沉淀中加入上样缓冲液裂解线粒体。
3. β-巯基乙醇有毒,请注意通风及防护
五 储存:本试剂盒三个月内使用可4℃储存,长期可置-20℃。
一般低温度心机都有离心力显示,如果没有,可以用以下公式简单的换算。
G=1.11×(10-5)×R×[rpm]2
G为离心力,一般以g(重力加速度)的倍数来表示;
[rpm] 2即:转速的平方; R为半径,单位为厘米。
XH105型SABC双标试剂盒(免疫组化试剂盒)多少钱关键词:SABC双标试剂盒(免疫组化试剂盒),百奥莱博,XH105
·Taq Plus DNA Polymerase
编号:XH023
规格:500U/2500U
产品简介:
本公司生产的Taq Plus DNA Ploymerase是Taq酶和Pfu酶的1:1混合物,既有5’→ 3’核酸外切酶活性,又有3’→5’核酸外切酶活性,具备扩增效率高、错配率低的特点。与Taq酶相比,Taq Plus DNA Ploymerase具有扩增长度增加(对简单模板有效扩增长度可达20kb,对复杂模板也可达10kb)、保真度好等优点;与Pfu酶相比,具有扩增速度快、反应效率高的优势。其PCR产物可直接进行TA克隆,如需提高克隆效率,建议先纯化,加A后再进行TA克隆。常用于一些对保真度要求高和模板结构复杂(如GC含量高、有二级结构等)的PCR扩增,大多数情况下可替代Taq酶。
活性定义:
1单位(U) Taq Plus DNA Polymerase活力定义为在74℃,30分钟内,以活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物,将10nmol脱氧核苷酸掺入到酸不溶物质所需的酶量。
保存
-20℃
2-8℃
产品内容:
酶储存缓冲液
10×Taq Plus Buffer
20 mM Tris-HCl (pH 8.0)
200 mM Tris-HCl (pH 8.4)
0.1 mM EDTA
200 mM KCl
1 mM DTT
100 mM (NH4)2SO4
100 mM KCl
15 mM MgCl2
50% glycerol
1%Triton X-100
Stabilizers
其它
注意事项:
1、Taq Plus DNA Ploymerase应储存于-20℃,有效期12个月。
2、取Taq Plus DNA Ploymerase做PCR反应时,请用高压灭菌处理过的吸头。
3、一般情况下,Taq Plus DNA Ploymerase应该可以很好地扩增5kb以下的片段。能否成功扩增更长的片段,主要与模板的结构和引物的设计有关,如果扩增长片段有困难,选用Long Taq DNA Ploymerase。
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温馨提示:不可用于临床ZL。