特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、YL及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产销售去除基因组DNA反转录PCR试剂盒北京价格,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:去除基因组DNA反转录PCR试剂盒北京价格
编号:ALH266
品Pai:百奥莱博
英文名:Reverse transcriptase Kit
产地:国产|进口
规格:50次|100次
本试剂盒是可以除去基因组DNA进行 Real Time RT-PCR 反应的专用反转录试剂。本试剂盒为一管式反转录预混Mix,5 × TRUE RT MasterMix中含有反转录DY链合所需的所有试剂(RTase、RNase Inhibitor、Random primers、Oligo dT Primer、dNTP Mixture、Buffer)。 通常Real Time RT-PCR等实验需要先用DNase I消化去除RNA中残留的基因组DNA(gDNA) ,但是传统DNase I 处理复杂并容易造成 RNA 的降解和损失。本试剂盒中使用了具有DNA分解活性的特殊 gDNA Eraser 2-5分钟消除gDNA残留,不需要DNase 消化和后续繁琐步骤。反转录步骤采用通过基因重组技术克隆表达的点突变型RNase H活性缺失的M-MuLV反转录酶。本酶M-MuLV(RNase Hˉ)的RNase H活性缺失,与M-MuLV 相比,具有更强的延伸能力和稳定性,可用于较长的cDNA合成,具有更高的检测效率和敏感度。
试剂盒组分(100次):
gDNA Eraser-——————————————100μl
10×gDNA Eraser Buffer—————————100μl
5×TRUE RT MasterMix——————————400μl
RNase free H2O—————————————2ml
注意事项:
1. 避免RNase污染。
2. 为保证反转录成功建议使用高质量的RNA样品。
3. gDNA Eraser 、5 × TRUE RT MasterMix非常粘稠,溶液容易吸附在管壁和吸头外导致损失,用前请点甩离心后使用,并且避免吸头外壁沾附损失。gDNA Eraser可以每次按照0.8μl使用,5 × TRUE RT MasterMix可以每次按照3.8μl使用,也不影响使用效果。
储存条件:-20℃,有效期1年。
本品别名:反转录试剂盒|通用反转录PCR试剂盒|去除基因组DNA反转录PCR试剂盒|通用RT-PCR试剂盒
欲了解更多去除基因组DNA反转录PCR试剂盒北京价格的品Pai、产地、价格及说明书等产品信息,请致电北京百奥莱博科技有限公司,我们将竭诚为您服务,另外,以下产品正在火爆促销:
·固定包埋组织DNA提取试剂盒
编号:ALH175
英文名称:DNA extraction kit for extracting embedded tissue
规格:50次|100次
本试剂盒适用于快速提取各种固定和石蜡包埋组织DNA。本试剂盒采用独特裂解液热处理和蛋白酶K对固定或者石蜡包埋组织共同作用迅速裂解细胞释放出基因组DNA,然后基因组DNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜, 再通过一系列快速的漂洗-离心的步骤, YZ物去除液和漂洗液将细胞代谢物、蛋白等杂质去除, ZH低盐的洗脱缓冲液将纯净基因组DNA从硅基质膜上洗脱。
试剂盒组份(50次):
裂解液FTL————————————20ml
结合液CB————————————20ml
YZ物去除液IR—————————50ml
漂洗液WB————————————25ml
洗脱缓冲液EB——————————15ml
蛋白酶K(20mg/ml)————————3×20mg
吸附柱AC和收集管————————100套
产品特点:
1.离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界著名公司特制吸附膜,柱与柱之间吸附量差异极小,可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。
2.不需要使用有毒的苯酚等试剂,也不需要乙醇沉淀等步骤。
3.快速,简捷,单个样品操作一般可在30分钟内完成。
4.多次柱漂洗确保高纯度,OD260/OD280典型的比值达1.7~1.9,长度可达30kb -50kb,可直接用于PCR,Southern-blot和各种酶切反应。
注意事项:
1. 所有的离心步骤均在室温完成,使用转速可以达到13,000rpm的传统台式离心机,如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。
2. 需要自备乙醇(需要准备100%/80%/60%/40%不同浓度)或者二甲苯。
3. 实验前将需要的水浴先预热到37℃备用。
4. 结合液CB 和YZ物去除液IR 中含有刺激性化合物,操作时要戴乳胶手套,避免沾染皮肤,眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时,要用大量清水或者生理盐水冲洗。
5. 洗脱液EB 不含有螯合剂EDTA,不影响下游酶切、连接等反应。也可以使用水洗脱,但应该确保批pH 大于7.5, pH 过低影响洗脱效率。用水洗脱DNA 应该保存在-20℃。DNA 如果需要长期保存,可以用TE 缓冲液洗脱(10mM Tris-HCl,1mM EDTA,pH 8.0),但是EDTA 可能影响下游酶切反应,使用时可以适当稀释。
储存条件:室温,有效期12个月。
去除基因组DNA反转录PCR试剂盒北京价格关键词:反转录试剂盒,通用RT-PCR试剂盒,去除基因组DNA反转录PCR试剂盒,通用反转录PCR试剂盒
·荧光定量用DY链反转录预混合液
编号:ALH264
英文名称:First strand RT-PCR premix for fluorescent quantitation
规格:20μl×50次
本品为一管式反转录预混Mix,5×RT MasterMix 中含有反转录DY链合所需的所有试剂(RTase、RNase Inhibitor、Random primers、Oligo dT Primer、dNTP Mixture、反应Buffer),加入模板RNA 和RNase-Free H2O 即可进行反应。使得cDNA 的合成更加的方便快捷,特别适合cDNA 合成以后的两步法Real Time PCR 检测。
试剂盒组分:
5 ×RT MasterMix————————0.2ml
RNase free H2O—————————1ml
产品特点:
1.体系配制简单:本产品为预混Mix形式,只需加入模板RNA和水便可以进行反应。
2.反转录效率高:特殊优化的oligo dT和N6随机引物配比,反转录效率高。
3.反转录速度快:只需42℃,20 min即可完成cDNADY链的合成。
4.通读复杂模板:能够用于GC含量高,二级结构复杂的RNA模板,合成cDNA*(代"片")段长度ZG可达12 kb。
5.后续兼容性好:后续配合荧光定量检测产品,灵敏度高、稳定性好。
储存条件:-20℃,有效期一年。
去除基因组DNA反转录PCR试剂盒北京价格关键词:反转录试剂盒,通用RT-PCR试剂盒,去除基因组DNA反转录PCR试剂盒,通用反转录PCR试剂盒
·KOD DNA聚合酶
编号:ALH209
英文名称:KOD DNA Polymerase
规格:250U|500U
本酶是从克隆有Thermococcus Kodakaraensis DNA聚合酶基因的质粒在大肠杆菌中经诱导表达分离纯化而来。该酶所具有的3"→ 5"外切酶活性使得其扩增保真性比Pfu DNA Polymerase 更高,保真性是Taq的约50倍,同时具有合成速度快的特点,聚合速度约为普通Pfu DNA Polymerase的5倍,Taq DNA Polymerase的2倍,达到100~138bp/秒,可以在短时间内获得高产量的扩增产物,特别适合于高保真地扩增6kb以内的PCR 产物,扩增所得的DNA为平末端,可用于基因克隆、表达及突变分析等分子生物学实验。高保真KOD对于dNTP纯度要求很高,因此建议用本酶配套的超纯dNTP mix。
产品组分:
KOD DNA Polymerase————————————250U
10×KOD Buffer——————————————1ml
SuperPure dNTP mix(10 mM Each)——————0.1ml
单位定义:75℃活性测定条件下,在30min内摄入10nmol的dNTPs使成为酸性不溶物时所需要酶的活性定义为1U。
储存条件:-20℃。
·微量样品RNA提取试剂盒
编号:ALH022
英文名称:Total RNA Extraction Kit From a small amount of sample
规格:50次
本试剂盒最小处理量可以处理10个以上的组织细胞。本试剂盒是在无苯酚、氯*(代"仿")RNA快速提取技术基础上,采用基因组DNA清除柱技术确保有效清除gDNA残留,得到的RNA不需要DNase消化,可直接用于PCR、荧光定量PCR等实验。独特的裂解液迅速裂解微量样品的细胞和灭活细胞RNA酶,然后裂解混合物通过一个基因组DNA清除柱,基因组DNA被清除而RNA穿透滤过。滤过的RNA用乙醇调节结合条件后,RNA在高离序盐状态下选择性吸附于特制离心柱内硅基质膜,再通过一系列快速的漂洗-离心的步骤, 去蛋白液和漂洗液将细胞代谢物,蛋白等杂质去除, ZH低盐的RNase free H20将纯净RNA从硅基质膜上洗脱。
试剂盒组份:
裂解液RLT Plus—————————20 ml
去蛋白液RW1———————————40ml
漂洗液RW————————————10ml
RNase-free H2O—————————10ml
70%乙醇————————————10ml RNase-free H2O
Carrier RNA——————————310μg
基因组DNA清除柱和收集管————50套
RNA吸附柱和收集管———————50套
微量研磨杵———————————3根
储存条件:室温,有效期半年。(Carrier RNA需-20℃保存)
产品特点:
1.完全不使用有毒的苯酚,氯*(代"仿")等试剂,也不需要乙醇沉淀等步骤。
2.快速,简捷,单个样品操作一般可在30分钟内完成。
3.独特研发成功基因组DNA清除柱技术确保有效清除gDNA残留,得到的RNA不需要DNase消化,可直接用于PCR、荧光定量PCR等实验。
4.多次柱漂洗确保高纯度,OD260/OD280典型的比值达1.9~2.0,基本无DNA残留,可用于RT-PCR,Northern-blot和各种实验。
注意事项:
注意事项
1. 所有的离心步骤均在室温完成,使用转速可以达到13000rpm的传统台式离心机,如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。
2. 样品处理量JD不要超过基因组吸附柱和和RNA吸附柱处理能力,否则造成DNA残留或者产量降低。如细胞处理量不超过5×10^5,组织不超过5mg。
3. 一般本试剂盒最小处理量可以处理10个以上的组织细胞。
4. 裂解液RLT Plus 和去蛋白液RW1中含有刺激性化合物,操作时要戴乳胶手套,避免沾染皮肤,眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时,要用大量清水或者生理盐水冲洗。
5. Carrier RNA 储存液的配制:在DY次使用Carrier RNA 时,将Carrier RNA(310μg)溶解在1 ml RNase-free H2O 中,将溶液分装后储存于-20℃,此时该溶液的浓度为310 μg/ m(l 310 ng/μl);该储存液应避免反复冻融,冻融次数不能超过3 次。(当处理的细胞量小于5000 个或者处理组织量小于10μg时,请在裂解液中加入20ng Carrier RNA。)
6. Carrier RNA 工作溶液的配制(以配制10 次用量为例):将5μl Carrier RNA储存溶液加入34μl 裂解液RL 中,用移液器混匀,将混匀后的溶液6μl 加入54μl 裂解液RL 中, 此时Carrier RNA 终浓度为4 ng/μl,取5μl 终浓度为4 ng/μl 的Carrier RNA 加入裂解液中。
7. 预防RNase 污染,应注意以下几方面:
1) 经常更换新手套。因为皮肤经常带有细菌,可能导致RNase 污染。
2) 使用无RNase 的塑料制品和枪头避免交叉污染。
3) RNA 在裂解液RLT Plus 中时不会被RNase 降解。但提取后继续处理过程中应使用不含RNase 的塑料和玻璃器皿。玻璃器皿可在150℃烘烤4 小时,塑料器皿可在0.5 M NaOH 中浸泡10 分钟,然后用水彻底清洗,再灭菌,即可去除RNase。
4) 配制溶液应使用无RNase 的水。(将水加入到干净的玻璃瓶中,加入DEPC 至终浓度0.1%( v/v),37℃放置过夜,高压灭菌。)
8. 关于DNA 的微量残留:
一般说来任何总RNA 提取试剂在提取过程中无法完全避免DNA 的微量残留(DNase 消化也无法做到100%无残留),本试剂盒由于采取了本公司独特的缓冲体系和基因组DNA 清除柱技术,绝大多数DNA 已经被清除,不需要DNase消化,可直接用于反转录PCR和荧光定量PCR。个别特殊情况如DNA 含量过于丰富造成残留或者要进行严格的mRNA 表达量分析荧光定量PCR,我们建议在进行模板和引物的选择时:
1) 选用跨内含子的引物,以穿过mRNA 中的连接区,这样DNA 就不能作为模板参与扩增反应。
2) 选择基因组DNA 和cDNA 上扩增的产物大小不一样的引物对。
3) 将RNA 提取物用RNase-free 的DNase I 处理以提GX果。本试剂盒还可以用于DNase I 处理后的RNA 清洁(cleanup),请联系我们索取具体操作说明书。
4) 在步骤去蛋白液RW1 漂洗前,直接在吸附柱 上进行DNase I 处理。请联系我们索取具体操作说明书。
北京百莱博科技有限公司专业生产供应销售生物试剂、化学试剂、抗原抗体、血清血浆、Elisa试剂盒,更多试剂产品需求,欢迎来电咨询选购去除基因组DNA反转录PCR试剂盒北京价格。
温馨提示:不可用于临床ZL。