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北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域,致力于为客户提供包括ALH089型高纯度质粒大量提取试剂盒(柱式提取质粒)多少钱在内的一系列分子生物学试剂产品,并提供一系列相关的技术服务。
名称:ALH089型高纯度质粒大量提取试剂盒(柱式提取质粒)多少钱
英文名:A large number of high purity Plasmid Extraction Kit
编号:ALH089
品Pai:百奥莱博
规格:10次
产地:国产|进口
本试剂盒适用于大规模高纯度质粒制备。采用改进SDS-碱裂解法裂解细胞,离心吸附柱内的硅基质膜在高盐、低pH值状态下选择性地结合溶液中的质粒DNA,再通过去蛋白液和漂洗液将杂质和其它细菌成分去除,ZH低盐、高pH值的洗脱缓冲液将纯净质粒DNA从硅基质膜上洗脱。
试剂盒组份(10次):
RNaseA(10mg/ml)-————————0.75ml
溶液P1—————————————75ml
溶液P2—————————————75ml
溶液P3—————————————110ml
去蛋白液PD———————————100ml
漂洗液WB————————————2×25ml
洗脱缓冲液EB——————————20ml
吸附柱和收集管(50ml)——————10套
试剂盒特点:
1.离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界著名公司特制吸附膜,柱与柱之间吸附量差异极小,可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。
2.不需要使用有毒的苯酚、氯*(代"仿")等试剂,也不需要乙醇沉淀。快速、方便,从100-200ml大肠杆菌LB((Luria-Bertani)培养液中,可快速提取0.2-0.5mg纯净的高拷贝质粒DNA,提取率达80 %左右。
3.获得的质粒产量高、超螺旋比例高、纯度好,可以直接用于酶切、转化、PCR、体外转录、测序等各种分子生物学实验。
注意事项
1. 所有的离心步骤如未加另外说明均在室温完成,使用转速可以达到12000g,带50ml转头的台式离心机。
2. 溶液P3和去蛋白液PD中含有刺激性化合物,操作时要戴乳胶手套,避免沾染皮肤、眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时,要用大量清水或者生理盐水冲洗。
3. 提取质粒的量与细菌培养浓度、质粒拷贝数等因素有关。如果所提质粒为低拷贝质粒或大于10kb 的大质粒,应加大菌体使用量,同时按比例增加P1、P2、P3的用量,洗脱缓冲液应在70℃预热。可以适当的延长吸附和洗脱的时间,提高提取效率。
4. 得到的质粒DNA可用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测浓度与纯度。OD260值为1相当于大约50μg/ml DNA。电泳可能为单一条带,也可能为2条或者多条DNA条带,这主要是不同程度的超螺旋构象质粒泳动位置不一造成,与提取物培养时间长短、提取时操作剧烈程度等有关。本公司产品正常操作情况下基本超螺旋可以超过90%。
5. 质粒DNA确切分子大小,必须酶切线性化后,对比DNA分子量Marker才可以知道。处于环状或者超螺旋状态的质粒,泳动位置不确定,无法通过电泳知道其确切大小。
6. 洗脱液EB不含有螯合剂EDTA,不影响下游酶切、连接等反应。也可以使用水洗脱, 但应该确保pH大于7.5,pH过低影响洗脱效率。用水洗脱,质粒应该保存-20℃。质粒DNA如果需要长期保存,可以用TE缓冲液洗脱(10mM Tris-HCl,1mM EDTA,pH 8.0),但是EDTA可能影响下游酶切反应,使用时可以适当稀释。
储存条件:室温,有效期12个月。
本品别名:高纯度质粒大量提取试剂盒(柱式提取质粒)|高纯质粒大量制备试剂盒
想要了解更多关于ALH089型高纯度质粒大量提取试剂盒(柱式提取质粒)多少钱的价格、品Pai、厂家、说明书、促销信息,请和我们联系。此外我公司还销售下面的产品:
·骨RNA提取试剂盒
编号:ALH042
英文名称:Bone tissue RNA Extraction Kit
规格:50次
本试剂盒适用于快速提取骨组织细胞总RNA,骨组织坚硬、骨细胞密度低、而且外周基质含有大量黏蛋白(蛋白多糖)和RNA难以分离,无法用传统Trizol法进行高质量提取。本试剂盒采用独特的不含苯酚/氯*(代"仿")配方的裂解液,并添加多种成分去除骨组织蛋白多糖。同时独特基因组DNA清除柱技术可以有效清除gDNA残留,得到的RNA一般不需要DNase消化,可用于反转录PCR、荧光定量PCR等实验。独特的裂解液迅速裂解细胞和灭活细胞RNA酶,离心沉淀去除多糖和次级代谢产物,然后裂解混合物用乙醇调节RNA结合吸附到基因组DNA清除柱,然后RNA被选择性洗脱滤过, 吸附在基因组DNA清除柱上的残留DNA无法洗脱连同柱子一起丢弃从而清除掉DNA。滤过的RNA用乙醇调节结合条件后,RNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜,再通过一系列快速的漂洗-离心的步骤,去蛋白液和漂洗液将细胞代谢物,蛋白等杂质去除, ZH低盐的RNase free H20将纯净RNA从硅基质膜上洗脱。
试剂盒特点:
1.完全不使用有毒的苯酚,氯*(代"仿")等试剂,也不需要乙醇沉淀等步骤。
2.简捷,单个样品操作一般可在35分钟内完成,世界上最简单快速的试剂盒。
3.独特研发成功基因组DNA清除柱技术可以有效清除gDNA残留,得到的RNA一般不需要DNase消化,可用于反转录PCR、荧光定量PCR等实验。
4.适应性广泛,可以提取各种骨组织包括矿化骨组织。
5.多次柱漂洗确保高纯度,OD260/OD280典型的比值达1.9~2.2,基本无DNA残留,可用于RT-PCR,Northern-blot,二代测序和各种实验。
试剂盒组份:
组份 | 50次 |
裂解液CLB | 50ml |
Plantbalb | 5ml |
裂解液RLT Plus | 25ml |
去蛋白液RW1 | 40ml |
漂洗液RW | 10ml |
RNase-free H2O | 10ml |
吸附柱和收集管 | 50套 |
基因组DNA 清除柱和收集管 | 50套 |
注意事项:
1. 所有的离心步骤均可在室温完成(4℃离心也可以),使用转速可以达到13000rpm的传统台式离心机,如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。
2. 需要自备乙醇,研钵或者其它合适的破碎骨组织装置。
3. 样品处理量JD不要超过基因组清除柱DA和和RNA吸附柱处理能力,否则造成DNA残留或产量降低。开始摸索实验条件时,如果不清楚样品DNA/RNA含量时可使用较少的样品处理量,将来根据样品试验情况增加或者减少处理量。
4. 裂解液CLB和RLT Plus 和去蛋白液RW1中含有刺激性化合物,操作时戴乳胶手套,避免沾染皮肤,眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时,要用大量清水或者生理盐水冲洗。
5. 关于DNA 的微量残留:
一般说来任何总RNA 提取试剂在提取过程中无法完全避免DNA 的微量残留(DNase 消化也无法做到100%无残留),本试剂盒RNA 提取产品,由于采取了本公司独特的缓冲体系和基因组DNA 清除柱技术,绝大多数DNA 已经被清除,不需要DNase 消化,可直接用于反转录PCR 和荧光定量PCR。个别特殊情况如DNA 含量过于丰富造成残留或者要进行严格的mRNA 表达量分析荧光定量PCR,我们建议在进行模板和引物的选择时:
1) 选用跨内含子的引物,以穿过mRNA中的连接区,这样DNA就不能作为模板参与扩增反应。
2) 选择基因组DNA和cDNA上扩增的产物大小不一样的引物对。
3) 将RNA提取物用RNase-free的DNase I 处理。本试剂盒还可以用于DNase I处理后的RNA清洁(cleanup) ,请联系我们索取具体操作说明书。
4) 在步骤去蛋白液RW1漂洗前,直接在吸附柱上进行DNase I柱上消化处理。购买DNA酶柱上消化试剂盒前可先索取具体操作说明书。
储存条件:室温,有效期12个月
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温馨提示:不可用于临床ZL。