试剂盒规格(50次)货号:1101-050 组成 | 数量 | 储存温度 |
溶液A 溶液B 溶液C 使用说明书 | 2*1.25 ml 1*0.65 ml 1*25ml 1份 | 4℃ 4℃ 4℃ |
试剂盒规格(100次)货号:1102-100 组成 | 数量 | 储存温度 |
溶液A 溶液B 溶液C 使用说明书 | 4*1.25 ml 2*0.65 ml 1*50ml 1份 | 4℃ 4℃ 4℃ |
产品概述:SiDanSai的AP(碱性磷酸酶)染色液试剂盒特异性强,灵敏度高,可为胚胎干细胞/iPS细胞分化的表型评估提供可靠的依据。对于其他类型的细胞来说,染色越深,表明该细胞内的AP活性越高。
使用方法:其它所需材料及准备: PBS 缓冲液
4%多聚甲醛(即: 4%PFA)
1 x 润洗缓冲液 (e.g. TBST: 20mM Tris-HCl, pH 7.4, 0.15M NaCl, 0.05% Tween-20)
碱性磷酸酶染色步骤:(以24孔板染色为例) - 吸出细胞培养液,用PBS润洗2~3次,用PFA固定1~2min(注意:不要固定超过2min,过度固定会使碱性磷酸酶失活);
- 吸出固定液,用PBS洗2次;
- 吸出PBS,用TBST润洗两次;
- 准备碱性磷酸酶试剂:【溶液A(白瓶盖): 溶液B(绿瓶盖): 溶液C=50ul:12.5ul:437.5ul】;
- 吸弃TBST溶液;
- 加入足量的染色试剂使染色液能足够覆盖孔底,室温避光放置15~20min;
- 吸出染色液,用PBS缓冲液润洗一次,ZH保存于PBS溶液中,显微镜下观察染色结果(未分化细胞染色为蓝/紫色,分化的细胞染色为无色)。
质量控制:本产品经严格检测,未分化的人类ES/iPS以及小鼠ES/iPS染色均为阳性,成纤维细胞染色为阴性(如下图)。
Human ES cell(AP positive)
MEF cell(AP negative)
运输和保存:冷藏运输;保存6个月。
使用声明:本产品仅供基础研究之用,溶液A、溶液B瓶口若出现少量液体凝固,融化混匀后正常使用。
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