全基因组扩增背景 全基因组扩增方法是一种增加有限的DNA样本的数量的方法。在法医和基因疾病等研究中,DNA样本的量非常有限,但是又要进行多重分析应用,因此全基因组扩增技术将发挥有效的作用。
AmpGeno全基因组扩增试剂盒 上海翼和AmpGeno全基因组扩增试剂盒采用多重置换扩增(MDA)技术及Phi29 DNA聚合酶等温扩增体系,在恒温条件下,实现对DNA复杂结构的解链和复制,可连续合成多达70kb的DNA片段,对样本全基因组DNA进行高产量和高质量的均匀扩增。确保了Phi29扩增得到的DNA覆盖了整个基因组,连贯并且无偏地扩增所有遗传位点。
Phi29聚合酶具有不从基因组DNA模板上解离的特性,使得生成的DNA片段能延长到数十甚至百kb,并且该酶具有3’–5’的核酸外切酶校读功能,其错误率比基于Taq DNA聚合酶的方法低百倍。除了具有高保真性,还具有特殊的链置换和连续合成特性。
AmpGeno试剂盒可以实现少量 DNA 样本的全基因组无差别扩增,一个反应可以达到 40μg 的全基因组 DNA。 AmpGeno要求 DNA 样品不能严重降解,以减少因模板量太少造成不平衡扩增。扩增产物可以稀释后用于后续的 DNA 分析。
AmpGeno试剂盒特性 AmpGeno应用实例: 图1. HEK293细胞基因组DNA全扩电泳结果
图2. 不同染色体基因扩增均一度检测
全基因组扩增DNA产物适用于: l 二代测序
l 使用芯片进行基因分型检测
l 比较基因组杂交研究(CGH)
l 单核苷酸多态性(SNP)基因分型检测
l Sanger测序
l STR微卫星分析
l 单体基因分型检测
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