HO-8910细胞冻存时使用的DMEM培养基,复苏时使用MEM培养基,第二天发现复苏不成功,细胞没有贴壁,我又重新离心之后加入DMEM培养基,请问大神对细胞有影响吗??之后是否可以贴壁生长?
资源名称 HO-8910
种属 人卵巢癌细胞
形态 上皮样
培养方法
培养基 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS
传代方法 1:3~1:4传代,2~3天1次。
生长特性 贴壁生长
存储条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
这两个培养基成分差距不大,大部分细胞换用应该没什么影响。HO-8910细胞复苏不贴壁的话可能是:1.冻存细胞有问题,比如冻存细胞状态不是很好,冻存降温过快等;2.复苏细胞有问题,比如融化速度过慢,离心时间和转速有问题;3.细胞本身特性,有些细胞贴壁很慢,过夜不一定会都贴壁,这种情况不动是的,再离心的话细胞贴壁只会更慢。
HO-8910细胞爬片的步骤:
1 什么是细胞爬片?其用途是什么?
2 细胞爬片的步骤是怎样的?
3 细胞爬片需要哪些实验材料和仪器?
细胞爬片就是让细胞(贴壁细胞)在片子(盖玻片)上生长。主要用来做免疫细胞化学啊,原位杂交等吧。在做这些实验时,制作标本有两种,一是离心做细胞涂片,二是细胞爬片。利用贴壁HO-8910细胞在玻璃等物质上贴壁生长的特点,让它在盖玻片上生长,可以使制作的细胞片子更牢固,在后面的洗涤过程中,不易脱落。特别是在用粘附剂如多聚赖安酸处理过的片子上,细胞贴得更牢固。
细胞爬片:将片子放在细胞培养板(均已经消毒)中,加入一定数量的细胞悬液,让它生长24小时。待它贴壁后,细胞爬片就制作好了。
需要的器材:多聚赖安酸、合适大小的盖玻片(根据细胞培养板孔大小而定)、细胞培养板、培养基。
人子宫鳞癌细胞(高分化) HCC94 HCC94细胞 1640+10%FBS+1%P/S
高转移人肝癌细胞 HCC-LM3 HCC-LM3细胞 DMEM+10%FBS+1%P/S 贴壁
人结肠癌细胞 HCT116 HCT116细胞 McCOY's +10%FBS+1%P/S
人回盲肠癌细胞 HCT-8 HCT-8细胞 " 1640+10%FBS+1%P/S
"
人结肠癌细胞 HCT-15 HCT-15细胞 1640+10%FBS+1%P/S 已做str鉴定
人结直肠癌氟尿嘧啶耐药株 HCT-8/FU HCT-8/FU细胞 1640+10%FBS+1%P/S +20ug/ml 5-FLU
人结肠癌紫杉醇耐药株 HCT-8/Taxol HCT-8/Taxol细胞 1640+10%FBS+1%P/S+500ng/ml紫杉醇 ,总共加入3ul 小瓶6ml培养
人脑胶质细胞株(正常) HEB HEB细胞 DMEM+10%FBS+1%P/S 贴壁
人子宫内膜腺癌细胞 HEC-1-A HEC-1-A细胞 MACOY'S +10%FBS 贴壁
人子宫膜腺癌细胞 HEC-1-B HEC-1-B细胞 MEM+10%FBS+1%P/S 贴壁
人体肾脏细胞系 HEK-293T HEK-293T细胞 DMEM+10%FBS +1%P/S 贴壁
人红白血病细胞 HEL HEL细胞 1640+10%FBS+1%P/S 悬浮