MuM-2B细胞冻存时使用的DMEM培养基,复苏时使用MEM培养基,第二天发现复苏不成功,细胞没有贴壁,我又重新离心之后加入DMEM培养基,请问大神对细胞有影响吗??之后是否可以贴壁生长?
资源名称 MuM-2B
种属 人侵袭性脉络膜黑色素瘤细胞
形态 多角
培养方法
培养基 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS;20mMHepes
传代方法 1:3传代;2~3天1次。
生长特性 贴壁生长
存储条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
这两个培养基成分差距不大,大部分细胞换用应该没什么影响。MuM-2B细胞复苏不贴壁的话可能是:1.冻存细胞有问题,比如冻存细胞状态不是很好,冻存降温过快等;2.复苏细胞有问题,比如融化速度过慢,离心时间和转速有问题;3.细胞本身特性,有些细胞贴壁很慢,过夜不一定会都贴壁,这种情况不动是的,再离心的话细胞贴壁只会更慢。
MuM-2B细胞爬片的步骤:
1 什么是细胞爬片?其用途是什么?
2 细胞爬片的步骤是怎样的?
3 细胞爬片需要哪些实验材料和仪器?
细胞爬片就是让细胞(贴壁细胞)在片子(盖玻片)上生长。主要用来做免疫细胞化学啊,原位杂交等吧。在做这些实验时,制作标本有两种,一是离心做细胞涂片,二是细胞爬片。利用贴壁MuM-2B细胞在玻璃等物质上贴壁生长的特点,让它在盖玻片上生长,可以使制作的细胞片子更牢固,在后面的洗涤过程中,不易脱落。特别是在用粘附剂如多聚赖安酸处理过的片子上,细胞贴得更牢固。
细胞爬片:将片子放在细胞培养板(均已经消毒)中,加入一定数量的细胞悬液,让它生长24小时。待它贴壁后,细胞爬片就制作好了。
需要的器材:多聚赖安酸、合适大小的盖玻片(根据细胞培养板孔大小而定)、细胞培养板、培养基。
MCF 10A(人正常乳腺上皮细胞) 5×10?cells/T25培养瓶
SK-OV-3-DDP(人卵巢腺癌顺铂耐药性细胞) 5×10?cells/T25培养瓶
MCF-7-Taxol(人乳腺癌紫杉醇耐药性细胞) 5×10?cells/T25培养瓶
MCF-7-ADM(人乳腺癌阿奇霉素耐药性细胞) 5×10?cells/T25培养瓶
MCF-7-DDP(人乳腺癌顺铂耐药性细胞) 5×10?cells/T25培养瓶
A549/DDP(人肺腺癌耐顺铂株) 5×10?cells/T25培养瓶
MPC-83(小鼠胰腺腺泡细胞) 5×10?cells/T25培养瓶
HA-VSMC(人主动脉血管平滑肌细胞) 5×10?cells/T25培养瓶
MC/CAR(人外周血淋巴细胞) 5×10?cells/T25培养瓶
SW 1990(人胰腺癌细胞) 5×10?cells/T25培养瓶
SW 1353(人软骨肉瘤细胞) 5×10?cells/T25培养瓶
SUP-B15(人Ph+急淋白血病细胞系) 5×10?cells/T25培养瓶
Sp2/0-Ag14(小鼠骨髓瘤细胞) 5×10?cells/T25培养瓶
SNU-5(人胃癌细胞) 5×10?cells/T25培养瓶