ALH272 一步法耐热RT-PCR试剂盒

一步法耐热RT-PCR试剂盒折扣价

产地：国产|进口

编号：ALH272

规格：50μl×50次|50μl×100次

品Pai：百奥莱博

本试剂盒是专为一步法RT-PCR实验配制的，使用该试剂盒能够方便快捷的在同一个反应管内完成逆转录反应和PCR扩增反应。反应过程中无需打开管盖添加试剂，避免了污染的同时提高了检测灵敏度和实验效率。本试剂盒包括多点突变改造耐热M-MuLV逆转录酶、热启动HotMaster Taq DNA聚合酶和RNasinYZ剂mix、同时包含适用于逆转录和PCR扩增的优化独特反应体系。本酶M-MuLV(RNase Hˉ)的RNase H活性缺失，与M-MuLV 相比，具有更强的延伸能力和稳定性，可用于较长的cDNA合成以及高比例的全长cDNA文库的构建等。同时该酶可以在高达50-60℃反转录，大大提高了复杂二级结构，GC含量丰富模板反转录效率，产量敏感度和特异性比一般试剂盒显著特高。



试剂盒组分(50次)：

2×RT-PCR Mix——————————625μl

Enzyme Mix-———————————25μl

耐热RTase————————————25μl

RNase free H2O-—————————1.5ml



适用范围：适用于高拷贝、低拷贝基因检测；适用于高GC含量或具有复杂二级结构的RNA模板。



注意事项：

1. 避免RNase污染。

2. 为保证反应成功建议使用高质量的RNA模板

3. 不同的片段，所需RNA模板用量不同，过多的RNA会YZ反应，建议根据反应调整模板用量。

4. 不能使用Oligo(dT) 和Random Primer 合成cDNA。



储存条件：-20℃，有效期半年。



本品别名：一步法耐热RT-PCR试剂盒|耐热一步法反转录PCR试剂盒



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·改良BCA法蛋白定量试剂盒

编号：ALH371

英文名称：Protein Quantitation Kit By BCA

规格：200次|500次|2500次|5000次

本试剂盒是在世界上常用的蛋白浓度检测方法之一BCA法基础上改进而成。众所周知，二价铜离子在碱性的条件下，可以被蛋白质还原成一价铜离子（biuret reaction），一价铜离子和独特的BCA Solution A（含有BCA）相互作用产生敏感的颜色反应。两分子的BCA螯合一个铜离子，形成紫色的反应复合物。该水溶性的复合物在562nm处显示强烈的吸光性，吸光度和蛋白浓度在广泛范围内有良好的线性关系，因此根据吸光值可以推算出蛋白浓度。



试剂盒组份(500次)：

蛋白标准（5mg/mlBSA）—————0.5ml

溶液A—————————————50ml×2

溶液B—————————————2ml



产品特点：

1.步骤简单，45分钟内完成测定，比经典Lowry法快4倍而且更加方便。

2.灵敏度高，检测浓度下限达到25μg/ml，Z小检测蛋白量达到0.5μg，待测样品体积为1-20μl 。

3.BCA法测定蛋白浓度不受绝大部分样品中的去污剂等化学物质的影响，可以兼容样品中高达5%的SDS，5%的Triton X-100，5%的Tween 20，60，80。

4.在20-2000μg/ml浓度范围内有良好的线性关系。

5.检测不同蛋白质分子的变异系数远小于考马斯亮蓝法蛋白定量。



注意事项

1. 蛋白标准请在全部溶解后先混匀，再稀释成一系列不同浓度的蛋白标准。标准品曲线配制时，如果吸量不准确或者加样枪不精确会造成标准曲线相关系数减小，可根据需要使用倍比梯度稀释的方法来配制，或者使用精确度高的加样枪。

2. 溶液A和溶液B混合成工作液时可能会有浑浊，但充分振荡混匀后就会消失，成为淡绿色的透明溶液。

3. 需酶标仪一台，测定波长为540-590nm 之间，562nm ；需96 孔板。如果没有酶标仪，也可以使用普通的分光光度计测定，但是测定蛋白浓度时，需根据测定吸光度的杯子的体积，按比例调整A 液，B 液和样品的体积。使用分光光度计测定蛋白浓度时，每个试剂盒可以测定的样品数量可能会显著减少。

4. BCA 蛋白定量试剂盒受螯合剂和略高浓度的还原剂的影响，需确保无EGTA，EDTA 低于10mM，二硫苏糖醇低于1mM，β-巯基乙醇低于1mM。不适用BCA

法时建议使用Bradford 法蛋白定量试剂盒。还可以考虑用超纯水稀释，透析/除盐，ACETONE/TCA 沉淀蛋白后重溶于超纯水等方法来消除干扰物质的影响。

5. 为了加快BCA 法测定蛋白浓度的速度可以适当用微波炉加热，但是切勿过热。

6. 如发现样品稀释液或裂解液本身就有较高背景，请SYBradford 法蛋白定量试剂盒。



储存条件：-20℃，有效期1年。





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·TA克隆试剂盒(含多克隆位点)(拓扑连接酶技术)

编号：ALH329

英文名称：Zero Background TOPO TA Cloning Kit(with MCS)

规格：20次|80次

本试剂盒采用了拓扑异构酶可以在瞬间（几秒钟-几分钟）、GX（接近）连接DNA片段的原理，这与和传统的T4连接酶原理不同。



试剂盒组份(20次)：

TOPO-Ta Vector(30ng/μl)—————20μl

1000bp Control（30ng/μl）————5μl

10×Enhancer———————————20μl



产品特点：

1. 可以在瞬间（几秒钟-几分钟）完成连接。

2. 无需冰浴和热休克，室温5分钟内完成转化；无需1小时复苏，只需37℃10分钟复苏便可以涂板。从连接到涂板只需15-20分钟。

3. 无自连、零背景，无需繁琐蓝白斑筛选，见到长出的克隆便是有插入的（接近）。

4. 可以连接长达10kb片段（即使连接5kb片段，挑10个菌落，至少8个是有插入的），是目前世界上简单、快速、零背景免筛选的TOPO TA克隆载体。



储存条件：-20℃，有效期12个月。





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·组织细胞基因组DNA提取试剂盒

编号：ALH125

英文名称：Cells/Tissue genomic DNA extraction kit

规格：50次|100次|200次

本试剂盒用于快速的从动植物细胞/组织中提取基因组DNA。样品研磨或者匀浆后加入细胞核裂解液，首先在强去污剂或者和蛋白酶K协同作用下裂解细胞释放出基因组DNA，接着加入RNase A去除RNA，然后蛋白沉淀液选择性沉淀去除蛋白，后纯净的基因组DNA通过异丙醇沉淀并重溶解于DNA溶解液。



试剂盒组份（200次）：

RNase A(10mg/ml)——————400μl

细胞核裂解液————————120ml

蛋白沉淀液—————————40ml

DNA溶解液—————————30ml



产品特点：

1.不需要使用有毒的苯酚、氯*(代"仿")等试剂。

2.快速，简捷，组织样品操作整个过程可在1个小时内完成。

3.结果稳定，产量高（比离心柱型的产量高一倍以上），OD260/OD280典型的比值达1.7～1.9，长度可达50Kb-150kb，可直接用于PCR，Southern-blot和各种酶切反应以及文库构建。



注意事项：

1. 所有的离心步骤均在室温完成，使用转速可以达到13000rpm的传统台式离心机，如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。

2. 用户需自备异丙醇、70％乙醇、PBS(用于细胞)、液氮研钵/或匀浆器(用于组织）、0.5M EDTA和蛋白酶K(用于鼠尾)、水浴箱。

3. 开始实验前将需要的水浴先预热好备用。

4. 本试剂盒为溶液型，可以很容易的按照比例扩大或者缩小每次处理的组织细胞量，请联系我们索取其它处理量的操作手册。



储存条件：室温，有效期12个月。



·血液miRNA提取试剂盒

编号：ALH071

英文名称：Blood microRNA Extraction Kit

规格：50次

本试剂盒采用独特的裂解液迅速直接裂解全血（液体样本）和灭活细胞RNA酶，强烈有机抽提去除蛋白和DNA，RNA包括微小分子RNA吸附于离心柱内特殊硅基质膜， 再通过一系列快速的漂洗－离心的步骤,漂洗液将细胞代谢物，蛋白等杂质进一步去除， 后低盐的洗脱液将纯净RNA从硅基质膜上洗脱。



近年来对RNA干扰和调节性小RNA的广泛研究迫切需要一种能有效提取15¬-30核苷酸左右大小RNA（包括siRNA和miRNA）的试剂盒。但是传统的RNA提取方法如硅胶膜不能有效吸附回收，酚/胍抽提和乙醇沉淀并不能有效沉淀回收微小分子RNA，对于血液样本更是由于其自身特点更难提取。本试剂盒的出现很好的解决了这一问题。



产品组分：

Lysis buffer———————50ml

70%乙醇——————————9ml

Wash Solution 1——————12ml

Wash Solution 2/3—————10ml

RNase-free H2O——————10ml

吸附柱和收集———————50套

microRNA吸附柱和收集管——50套



产品特点：

1.离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界公司特制吸附膜，柱与柱之间吸附量差异极小，可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。

2.也不需要乙醇沉淀等容易丧失微小分子RNA的步骤。

3.独特的裂解液配方，可直接裂解全血，不需要先裂解去除红细胞。

4.多次柱漂洗确保高纯度，OD260/OD280典型的比值达1.9～2.0，基本无DNA残留,可用于RNAi，RT-PCR，Northern-blot和各种实验。



注意事项：

1. 一次使用前请先在70%乙醇、Wash Solution 1瓶和Wash Solution 2/3瓶中加入指定量乙醇，加入后请及时打钩标记已加入乙醇，以免多次加入!

2. 所有的离心步骤均在室温完成，使用转速可以达到13000rpm 的传统台式离心机，如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。

3. 需要自备乙醇，氯*(代"仿")，一次性注射器，研钵。

4. Lysis buffer 和Wash Solution 1含有刺激性化合物，操作时要戴乳胶手套，避免沾染皮肤，眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时，要用大量清水或者生理盐水冲洗。

5. 预防RNase 污染，应注意以下几方面：

1) 经常更换新手套。因为皮肤经常带有细菌，可能导致RNase 污染。

2) 使用无RNase 的塑料制品和枪头避免交叉污染。

3) RNA 在裂解液中时不会被RNase 降解。但提取后继续处理过程中应使用不含RNase 的塑料和玻璃器皿。玻璃器皿可在150℃烘烤4小时，塑料器皿可在0.5M NaOH 中浸泡10 分钟，然后用水彻底清洗，再灭菌，即可去除RNase。

4) 配制溶液应使用无RNase 的水。（将水加入到干净的玻璃瓶中，加入DEPC至终浓度0.1%( v/v)，37℃放置过夜，高压灭菌。）

6. RNA 纯度及浓度检测：

完整性：RNA 可用普通琼脂糖凝胶电泳(电泳条件：胶浓度1.2%；0.5×TBE 电泳缓冲液；150v，15 分钟)检测完整性。由于细胞中70%-80%的RNA 为rRNA，电泳后UV 下应能看到非常明显的rRNA 条带。动物rRNA 大小分别约为5 kb 和2kb，分别相当于28S 和18S rRNA。动物RNA 样品中Z大rRNA 亮度应为次大rRNA 亮度的1.5-2.0 倍，否则表示RNA 样品的降解。出现弥散片状或条带消失表明样品严重降解。

纯度：OD260/OD280 比值是衡量蛋白质污染程度的指标。高质量的RNA，OD260/OD280 读数（10mMTris, pH7.5）在1.8-2.1 之间。OD260/OD280 读数受测定所用溶液的pH 值影响。同一个RNA 样品，假定在10mM Tris，pH7.5 溶液中测出的OD260/OD280 读数1.8-2.1 之间，在水溶液中所测读数则可能在1.5-1.9之间，但这并不表示RNA 不纯。

浓度：取一定量的RNA 提取物，用RNase-free 水稀释n 倍，用RNase-free 水将分光光度计调零，取稀释液进行OD260, OD280 测定，按照以下公式进行RNA浓度的计算：终浓度（ng/μl）= (OD260)×(稀释倍数n)×40。



储存条件：室温，有效期6个月。(lysis buffer需4℃避光保存)

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