特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、YL及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产销售TMB显色液(沉淀型,组化或膜HRP显色用)北京现货促销,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:TMB显色液(沉淀型,组化或膜HRP显色用)北京现货促销
产地:国产|进口
编号:RFT084
规格:100ml
● 产品简介:
TMB,即 3, 3′,5 ,5′-Tetramethylbenzidine,是辣根过氧化物酶(HRP)的常用底物。在辣根过氧化物酶或其他适当过氧化物酶的催化下,TMB 会产生蓝色产物。TMB 显色液(沉淀型,组化或膜HRP显色用,TMB Color Development Solution for IHC or Blotting)采用ZX的单一溶液的 TMB 显色技术,用于 Western 或免疫组化等 HRP的显色检测,简化了操作步骤,并且使检测结果更加稳定可靠。本显色液具有高灵敏性,与 HRP反应后产生蓝紫色沉淀,沉淀吸附于印迹膜上,不会脱落,方便显色结果的保存和观察。
? 本试剂盒主要适用于免疫组化或原位杂交时HRP的显色检测,以及Western、Southern、Northern等HRP的膜显色检测;本显色液也可以用于原位检测细胞或组织内源性的过氧化物酶。由于产生的是沉淀型蓝色产物,不适用于ELISA检测。
? 用于免疫组化检测时,如果每个样品的显色液用量为0.1ml,则可以检测1000个样品;对于膜的显色检测,如果每次使用2.5 ml显色液,则可以检测40次。
● 保存条件:2-8℃避光保存;一年有效。
● 使用说明:? 如果发现TMB显色液出现混浊或颜色变成蓝色,应该停止使用。
一. 免疫组化检测:1. 参考免疫组化的实验步骤,在与辣根过氧化物酶标记的抗体孵育后,用适当洗涤液洗涤3-5次,每次3-5分钟。
2. 洗涤完毕后,去除洗涤液,滴加约100微升TMB显色液。
3. 室温避光孵育3-30分钟或更长时间(可在湿盒中显色过夜),直至显色至预期深浅。
4. 去除染色液,加入重蒸水孵育10分钟以终止反应。
5. 拍照记录或适当封片后拍照记录。如果有必要,可以使用中性红染色液进行复染后再进行拍照记录或适当封片后拍照记录。
二. 膜的HRP显色检测:1. 参考相应的实验步骤,在与辣根过氧化物酶标记的抗体孵育后,用适当洗涤液洗涤3-5次,每次5分钟左右。
2. 洗涤完毕后,去除洗涤液,
3. 滴加约适量TMB显色液充分覆盖膜。
4. 室温避光孵育3-30分钟或更长时间(可长达数小时),直至显色至预期深浅。
5. 直接拍照记录。
● 常见问题:一. 背景显色太深。
1. 如果背景显色太深,一方面需考虑使用适当的封闭液进行封闭,例如选购适当的封闭液或使用和一抗相同来源的血清(10%)进行封闭。另一方面,请选购经过适当吸附的二抗,以减小二抗的非特异性吸附。
2. 可以考虑缩短显色时间,或降低二抗浓度。另外,选择适当强度的洗涤液,或延长洗涤时间也会有所帮助。
二. 没有显色或显色太弱。
1. 适当提高一抗或二抗的浓度。在离心管内用稀释的二抗与染色液反应,检测二抗是否可以被正常显色。
2. 可以考虑使用更加灵敏的放大检测体系,例如使用生物素检测体系。
3. 可以适当延长显色时间。
4. 如果上述改进不能获得预期效果,对于免疫组化或Western,可以考虑更换效果更好的一抗;对于Southern、Northern或原位杂交,则可以考虑更换探针。
TMB显色液(沉淀型,组化或膜HRP显色用)北京现货促销极具性价比,此外,我公司正火爆促销以下产品:
·SDS-PAGE凝胶制备试剂盒
编号:RFT077
规格:50次
● 产品组成:名称 规格 保存条件
30%PAA(29:1) 100 ml 4℃
1M Tris pH8.8 100 ml RT
1M Tris pH6.8 15 ml RT
10% SDS 5 ml RT
APS(干粉) 0.5 g RT
TEMED 0.5 ml 4℃,避光
说明书 一份
● 产品简介:
本公司提供的SDS-PAGE凝胶制备试剂盒包含凝胶制备所需的全部试剂,用户只需自备制胶器具和蒸馏水。本试剂盒不仅可用于配制SDS-PAGE凝胶,也可用于配制非变性(native)PAGE凝胶。本试剂盒可配制至少50块常规大小的PAGE胶。
● 使用说明:一 配制分离胶(各试剂使用量请参考表二)
根据目的蛋白的分子量大小选择合适的凝胶浓度(表一),再按照下面的分离胶配方表(表二)配制SDS-PAGE的分离胶(即下层胶)。
表一 不同浓度的SDS-PAGE分离胶的ZJ分离范围:SDS-PAGE分离胶浓度 ZJ分离范围
6% 50-150kD
8% 30-90kD
10% 20-80kD
12% 12-60kD
15% 10-40kD
配制分离胶前,根据以下配方准备10% APS:10% APS配制-5 ml:将0.5 gAPS干粉溶于5 ml灭菌水中,彻底溶解后分装,1 ml/支,-20℃备存,每次取一管使用。10% APS应尽量减少室温存放时间,以防失效。10%APS在4℃有效期为一周,-20℃有效期6个月。若发现凝胶聚合时间延长,应考虑更换使用-20度保存的10%APS。
制备分离胶步骤:1.参照凝胶模具说明书,装配好凝胶模具。
2.根据表二,将不同体积的成分在小烧杯或试管中混合;先后加入TEMED和10%APS,轻轻搅拌使其混匀,避免产生气泡
3.在凝胶模具中灌入适量分离胶溶液(对于mini-gel,凝胶液加至约距前玻璃板顶端1.5 cm或距梳齿约0.5 cm即可),然后在分离胶溶液上轻轻覆盖一层1-5 cm的水层,使凝胶表面保持平整。
4.静置30-60分钟,待分离胶和水层之间出现一个清晰的界面后,说明凝胶已聚合。
注:凝胶的聚合时间与环境温度有关。夏天温度较高时,聚合较快;冬天气温低时,聚合时间会延长。可以根据环境温度的不同调节APS的加入量。
二 浓缩胶制备:1.去除覆盖在分离胶上的水层。
2.按照表三将不同成分在一个小烧杯或试管中混合;先后加入TEMED和10%过硫酸铵,轻轻搅拌使其混匀,避免产生气泡。
3.将浓缩胶溶液加至分离胶的上面,直至凝胶溶液到达前玻璃板的顶端。
4.将梳子插入凝胶内,避免产生气泡。
5.静置30-60分钟,等待浓缩胶聚合。
注:凝胶的聚合时间与环境温度有关。夏天温度较高时,聚合较快;冬天气温低时,聚合时间会延长。可以根据环境温度的不同调节APS的加入量。
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·5×MonoClolor蛋白上样液
编号:RFT071
规格:5×1ml
5×MonoClolor 蛋白上样缓冲液 (还原)
组分说明
Cat No. Volume 5×1 ml
保存条件:-20℃保存。
5×SDS-PAGE蛋白上样缓冲液 (还原)是以溴酚蓝为染料,5倍浓缩的SDS-PAGE凝胶电泳上样缓冲液,应用于还原型SDS-PAGE的蛋白样品制备和上样。该缓冲液中含有DTT,可使蛋白质分子的链内二硫键和链间二硫键断裂,通过二硫键连接的各蛋白亚单位彼此分离,经考马斯亮蓝染色以后在电泳凝胶上显现清晰蛋白条带。
产品简介
1.加样前在室温或37-40℃数分钟解冻后轻轻摇匀,以确保溶液混合均匀。
2.本试剂含有DTT,操作时请穿着实验服并佩戴一次性手套。
3.本产品仅用于科研,不能用于人体实验或人体ZL。
操作步骤
1.将5×SDS-PAGE蛋白上样缓冲液 (还原)与蛋白样品按照1:4的比例混匀。
2.将蛋白样品置于95℃中加热3-5分钟。
3.待蛋白样品充分变性后冷却至室温,以小于3000 rpm的条件离心30秒。
4.离心后,以微量进样器取适量上清,直接加入SDS-PAGE凝胶加样孔内。
5.进行常规电泳,通常染料到达距离凝胶底端0.5-1 cm处即可停止电泳。
本产品仅供科研使用,请勿用于临床诊断及其他用途
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·1kb DNA ladder(1000-10000bp)
编号:RFT003
规格:100次
● 产品简介:
本产品是由8条带状双链DNA条带组成,适用于琼脂糖凝胶电泳中DNA条带的分析。
本产品为即用型产品,已含有1×loading buffer,可根据实验需要,直接取2-5μl电泳,使用方便,电泳图像清晰。本产品中8条带分为1000,2000,3000,4000,5000,6000,8000,10000bp。其中4000bp条带为100ng/5μl,其余条带浓度50ng/5μl。
● 储存条件:4℃ 6个月,-20℃ 1年。
● 使用方法:1.取2-5μl本产品加入到琼脂糖凝胶的加样孔中(每1mm×1mm加样孔加1μl,如果加样孔宽于5mm,可以适当增加上样量)就行电泳。
2.建议电泳条件:凝胶浓度为1.0%,凝胶长度5-7cm,电泳电压4-10v/cm,电泳时间30-35分钟。
3.通过EB染色后紫外灯下观察条带。
注:如果使用Goldview等染料就行染色,由于灵敏度比EB低,请酌情增加Marker的上样量。
● 注意事项:1.琼脂糖的质量对DNA的电泳有很大影响,电泳时请尽量使用质量优等的琼脂糖。
2.请使用新鲜配制的电泳缓冲液和新鲜配制的琼脂糖凝胶进行电泳,以保证Marker良好的分离效果。
·Long Taq DNA聚合酶
编号:RFT098
规格:500U|5×500U
长片段DNA聚合酶
● 贮存
-20℃保存一年。
● 产品简介
Long Taq DNA Polymerase是由pfu DNA Polymerase和Taq DNA聚合酶按照一定的比例混合而成。两种酶协同作用实现了扩增效率、合成速度和延伸性能的WM统一,在长片段PCR反应中具有独特的优势,可以合成超长的DNA*(代"片")段。另外,此酶具有比Taq DNA聚合酶约5倍的PCR可信度。该酶的大多数PCR产物3’端带碱基A,可以通过TA克隆法进行克隆。
● 产品组成(RTL3102-02)
Long Taq DNA Polymerase(5U/μl) 100μl
10×Long Taq PCR buffer(含Mg2+) 1ml
● 活性定义
1单位(U) Taq DNA Polymerase活力定义为在74℃、30分钟内,以活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物,将10 nmol脱氧核苷酸掺入到酸不溶物质所需的酶量。
● 酶贮存缓冲液
50 mM Tris-HCl (pH 8.0);0.1 mMEDTA;1 mMDTT;50 mMKCl ; Stabilizers; 50% glycerol
● 适用范围
短链和长链DNA扩增,特别适合于长片段DNA的扩增。
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温馨提示:不可用于临床ZL。