特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、YL及其他非科研用途。
北京百奥莱博主要从事生物试剂的生产和销售,产品线涵盖北京SY0282型零背景TOPO-TA克隆试剂盒(不含MCS多克隆酶切位点)促销在内的分子生物学试剂产品,还包括PCR及荧光定量PCR、核酸提取试剂盒类、样本核酸保护试剂、核酸提取、克隆与转化、蛋白纯化、蛋白检测、免疫组化、细胞凋亡与抗体等。
名称:北京SY0282型零背景TOPO-TA克隆试剂盒(不含MCS多克隆酶切位点)促销
英文名:Zero TOPO-TA Simple Cloning Kit, MCS-Depleted
编号:SY0282
产地:国产|进口
规格:20T
本试剂盒是利用拓扑异构酶(Topoisomerase)GX快速连接DNA*(代"片")段的原理进一步研发而成,与传统的T4连接酶相比,具有以下优势:
1)快速,仅需1-5分钟即可完成连接反应。
2)GX,无自连,阳性克隆率接近100%,无需设置蓝白斑筛选;
3)操作简单,从连接到涂板仅需15-20min。操作过程省去冰浴、热激和1h复苏。
4)可连接长达10kb目的产物;
5)本产品不含多克隆酶切位点(MCS),使用者在引入后续酶切位点进行酶切操作时,不会受到MCS位点的影响,从而增加酶切效率以及克隆成功率。
产品用途:A尾PCR产物的快速克隆。克隆后PCR产物的快速测序【使用M13F/M13R引物】。
产品组份:
pESI-T simple vector (30ng/μl)————20μl
1kb control insert (40ng/μl)——————5μl
10×Enhancer————————20μl
储存条件:-20℃,避免反复冻融,有效期12个月。
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北京SY0282型零背景TOPO-TA克隆试剂盒(不含MCS多克隆酶切位点)促销正在火爆,除此之外,为您推荐下别产品:
·台盼蓝
编号:SY0511
英文名称:Trypan blue
规格:10g
台盼蓝(Trypan Blue),一种偶氮、亲水性酸性蓝色染料,可透过死亡细胞和垂死细胞的细胞膜,将其染成蓝色,而活细胞由于其细胞膜的完整性,可将台盼蓝排斥在外,因此,通过颜色的变化即可将活细胞(活细胞呈透明无色)和死细胞鉴别开来,基于此原理,本品广泛用于细胞活性水平的常规评估。细胞计数前,需要用生理盐缓冲液或者无血清培养基对细胞进行充分的清洗,因为细胞对血清蛋白具有非常高的亲和力,因此残留的血清蛋白会导致较暗的染色背景。
台盼蓝还可染色胶原和淀粉样蛋白。台盼蓝与蛋白结合形成的复合物可发出红色荧光。另外,台盼蓝(合适浓度)还常用来淬灭细胞表面的自荧光或者其他荧光信号。
本品为细胞培养级别,台盼蓝染色法主要用来鉴定组织分离到原代细胞的存活情况。只需3-5min染色,即可通过血球计数法分析结果。
中文别名:直接蓝14;锥虫蓝;曲利苯蓝
英文别名:Direct Blue 14; Dianil blue; Diaminine Blue
CAS:72-57-1
分子式:C34H24N6Na4O14S4
分子量:960.81
外观:棕色至黑褐色、黑色、黑褐色粉末
组分:染料含量,>40%
溶解性:溶于水(10mg/ml)
储存条件:室温
结构式

储存液制备
可称取0.4g台盼蓝溶于100ml 0.85% NaCl或者Hank’s溶液,配制成0.4% 的台盼蓝储存液,建议过滤除杂,室温保存即可。使用时按照1:9(细胞悬液)稀释即可【注:具体的稀释倍数需根据细胞本身的密度做出适当调整,降低稀释倍数或者提高储存液浓度】。染色时间控制在3min左右。因台盼蓝具有细胞毒性,染色时间过久会导致部分死细胞染色,干扰计数。
北京SY0282型零背景TOPO-TA克隆试剂盒(不含MCS多克隆酶切位点)促销关键词:零背景TOPO-TA克隆试剂盒(不含MCS多克隆酶切位点),Zero TOPO-TA Simple Cloning Kit, MCS-Depleted,SY0282
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·IRF1-Luc荧光素酶报告基因质粒
编号:SY0077
英文名称:IRF1 luciferase reporter plasmid
规格:1μg
IRF1荧光素酶报告基因(IRF1 luciferase reporter plasimd)是用于检测IRF1转录活性水平为目的的报告基因。IRF1(Interferon Regulatory Factor 1)是IRF家族中被发现的核转录因子,具有广泛的生物学功能,它调节干扰素系统,YZ细胞生长,YZ肿瘤形成。
IRF1报告基因主要用于检测细胞中IRF1的转录活性、药物研究以及基因过表达和RNAi的表型分析等。
pGMIRF1-Lu是我公司改造后的哺乳动物真核表达载体,在其多克隆位点插入了多个IRF1结合位点,可以高灵敏度地检测IRF1的激活水平。同时,对载体中预测出的其它转录因子以外的结合位点进行了适当的突变,增加了质粒的转录因子结合特异性。由于质粒体积减小,使得IRF1报告基因质粒更易于转染。
质粒图谱

注意事项
本质粒未经我公司允许不得用于任何商业用途,也不得移交给订货人实验室以外的任何人或单位。
为了您的健康,实验操作时请穿实验服和带一次性手套。
使用说明
1.pGMIRF1-Lu可以采用常规转染方法转染哺乳动物细胞。用荧光素酶检测试剂盒或双荧光素酶检测试剂盒进行检测。
2.IRF1的激活剂,可作为IRF1报告基因的阳性对照。
储存条件:-20℃。
北京SY0282型零背景TOPO-TA克隆试剂盒(不含MCS多克隆酶切位点)促销关键词:零背景TOPO-TA克隆试剂盒(不含MCS多克隆酶切位点),Zero TOPO-TA Simple Cloning Kit, MCS-Depleted,SY0282
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·小牛肠碱性磷酸酶
编号:SY0388
英文名称:Alkaline Phosphatase (30 U/μl), Calf Intestine (CIAP)
规格:1000U
本品为小牛肠来源的碱性磷酸酶,可以降解几乎所有磷酸单酯,但是该酶不能水解磷酸二酯或磷酸三酯。Alkaline Phosphatase,中文名碱性磷酸酶,可将DNA、RNA的5’端磷酸基团去除,常用于阻止载体的自连作用:在分子克隆实验中,DNA连接酶催化DNA连接时需要有磷酸基团的存在,载体在经酶切后会在切点端保留一个磷酸基团。而载体经碱性磷酸酶去磷酸化后因5’ 端无磷酸基团,因而不可以和自身3’ 端连接。因此连接反应中载体本身会优先发生的连接反应被阻止,提高了目的片段插入率。另外,碱性磷酸酶还可制备用于5’端标记的DNA模板,以及用于该酶蛋白的脱磷酸作用等。
来源:携带小牛肠碱性磷酸酶表达质粒的酵母
质量控制(Quality Control):无核酸外切酶、核酸内切酶、核糖核酸酶污染
热灭活(Thermal Inactivation):在螯合剂存在下,65℃加热30min,99%活性不可逆丧失;使用苯酚,可使酶完全失活。
储存液条件(Storage conditions):10 mM Tris-HCl (pH8.0), 1 mM MgCl2, 50mM KCl, 0.1 mM ZnCl2, 50% glycerol.
活性定义:在pH9.8, 37℃条件下,以对硝基苯酚磷酸盐(p-nitrophenylphosphate)为底物,1分钟生成1µmol硝基酚(p-nitrophenol)所用的碱性磷酸酶量定义为1个活力单位。
ZJpH(Optimal pH):该酶在底物浓度高的情况下其ZJ反应pH为10,在底物浓度低时,ZJpH为8,此时该酶活性较高浓度底物时稍低。
优化体系(Optimal Buffer):AP Buffer (500 mM Tris-HCl, pH9.0; 10 mM MgCl2)
储存条件:-20℃
使用方法:
1 DNA去磷酸化
① 在1.5ml离心管中加入下列试剂:
无菌ddH2O————Up to 50µl
DNA 片段*————1-20pmol
Alkaline Phosphatase————1-2µl
10×AP buffer————5µl
【*】:单链DNA或含5’端突出末端的DNA推荐低温下孵育,平末端DNA或含3’突出末端的DNA建议在较高温度下孵育。
② 混匀上述试剂,于37℃或50℃孵育30min。或者37℃孵育15min后,再于50℃孵育15min。
2 酚氯*(代"仿")法抽提DNA
① 苯酚/氯*(代"仿")/异戊醇(25:24:1)抽提2次。
【注】:推荐在酚提取前将其在含5 mM EDTA, 0.5% SDS ,50 μg/ml Proteinase K的溶液中56℃孵育30min以彻底灭活碱性磷酸酶。在酚提取前于75℃孵育10min,灭活效果更佳。
② 氯*(代"仿")/异戊醇(24:1)抽提。
3 乙醇沉淀DNA
① 加入2.5µl 3M NaCl(终浓度150mM).
② 加入125µl(2.5倍体积)预冷乙醇,混匀后于-20℃放置30-60min,沉淀DNA。
4 溶解DNA
离心,彻底去除乙醇后,将DNA溶于适量去离子水(<20µl)。
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温馨提示:不可用于临床ZL。