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北京百奥莱博科技有限公司专业生产供应超低分子量蛋白电泳试剂盒厂家直销,产品信息:
类别:蛋白质研究
产品名 | 产品编号 | 包装规格 |
超低分子量蛋白电泳试剂盒 | RFT078 | 10次 |
● 产品组成:组分 名称 规格 贮存 运输
组分1 2×多肽电泳浓缩胶缓冲液 15 ml 4℃ 常温
组分2 2×多肽电泳分离胶缓冲液 30 ml 4℃ 常温
组分3 2×PAA溶液 超低浓缩胶用 15 ml 4℃ 常温
组分4 2×PAA溶液 超低分离胶用 30 ml 4℃ 常温
组分5 10% APS(干粉) 5 ml 常温 常温
组分6 TEMED 0.5 ml 常温 常温
组分7 10×Tricine-Tris-SDS缓冲液(10×TTS) 500 ml(干粉) 常温 常温
组分8 2×Tricine 上样缓冲液(含还原剂) 1 ml -20℃ 常温
组分9 FastBlue蛋白染色液 500 ml 常温 常温
● 产品简介:
本试剂盒含有超低分子量蛋白电泳(多肽电泳)全*("套")试剂,可以用来检测1-20kd的多肽大小。本试剂盒可配制至少10块常规大小的PAGE胶(8×10cm)。具有以下特点:1 适用范围广:2×多肽电泳缓冲液和2×PAA溶液中不含有SDS,适用于多肽的变性和非变性电泳。
2 分辨率高:凝胶缓冲液独特配方,可以有效分离1-5kD多肽。
3 稳定性高:凝胶缓冲液pH为中性,存放时间长。
4 使用方便:配制凝胶时只需1:1混合2×凝胶缓冲液和2×PAA溶液,加上APS和TEMED即可配制凝胶。
● 贮存和效期:按照标签温度贮存;开封后有效期一年。
● 使用说明:一. 10% APS配制:10% APS配制-5 ml:将APS干粉溶于5 ml灭菌水中,彻底溶解后分装,1 ml/支,-20℃备存,每次取一管使用。10% APS应尽量减少室温存放时间,以防失效。10%APS在4℃有效期为一周,-20℃有效期6个月。若发现凝胶聚合时间延长,应考虑更换使用-20度保存的10% APS。
二. 制胶:I 配制分离胶
1.按照表一将不同体积的成分加入到小烧杯或离心管中混合;立即混匀5-10秒,以使溶液充分混匀。
表一 (一块1 mm mini胶用量)*
分离胶 浓缩胶
18%T /5 ml 5%T /2 ml
2×多肽电泳浓缩胶缓冲液 / 1 ml
2×多肽电泳分离胶缓冲液 2.5 ml /
2×PAA溶液 超低浓缩胶用 / 1 ml
2×PAA溶液 超低分离胶用 2.5 ml /
10%APS 45-60 μl** 20-30 μl
TEMED 5 μl 2 μl
注: * 如非必须,不要使用厚度1.5mm的凝胶,尽量使用厚度0.75m和1mm的凝胶,这样会减少电泳后染色和脱色的时间。
** 凝胶的聚合时间与环境温度有关。夏天温度较高时,聚合较快;冬天气温低时,聚合时间会延长。可以根据表二的标准条件调节催化剂的加入量。
表二 超低凝胶制备凝固时间表
环境温度 20℃
分离胶配制 浓缩胶配制
分离胶配制量 5 ml -
浓缩胶配制量 - 2 ml
10%APS 50 μl 20 μl
TEMED 5 μl 2 μl
凝固时间 5-10 分钟 20-30 分钟
2.在凝胶模具中迅速灌入适量分离胶溶液,然后在分离胶溶液上轻轻覆盖一层1-3 cm的无水乙醇层,使凝胶表面保持平整。
3.静置5-10分钟,待分离胶和乙醇层之间出现一个清晰的界面表示凝胶已聚合。
II 配制浓缩胶
去除覆盖在分离胶上的水层,用滤纸将残留的水吸去。
1.按照表一将不同成分加入到小烧杯或离心管中混合;立即混匀5-10秒,以使溶液充分混匀。
2.将梳子插入凝胶内,避免产生气泡。
3.静置20-30分钟待凝胶聚合
三. 电泳:10×Tricine-Tris-SDS缓冲液配制:将10×Tricine-Tris-SDS缓冲液(10×TTS)粉末(Cat No:CB010P)置于一干净的一升烧杯中,加入500ml超纯水,彻底搅拌混匀,不要调节pH,即配成500ml 10×TTS缓冲液。
表三 1×TTS缓冲液配制
1×TTS配制量 500 ml 1×TTS配制量 1000 ml
10×TTS 50 ml 100 ml
超纯水 450 ml 900 ml
注:伯乐Mini III电泳槽一次电泳使用500ml 1×TTS缓冲液。
将电泳槽的内槽加满1×TTS缓冲液,轻柔拔出梳子,用1ml移液器将梳孔吹洗干净,将Marker或蛋白样品(已经过2×Tricine上样缓冲液[Cat No:TP050]处理)加入点样孔,稳压电泳(表四),至蓝色指示前沿至分离胶下沿位置时即可停止电泳。整个电泳过程大约需要2.5-3个小时。
表四 多肽电泳条件
恒电压 150V
起始电流 60-75mA/板胶
结束电流 15-25mA/板胶
电泳时间 2.5-3小时
四. 染色(使用组分9-FastBlue蛋白染色液):● 用前必读:1 使用前如发现瓶中有少许沉淀,请混匀后使用。
2以下“使用方法”是针对0.75mm和1.0 mm厚度,10×10cm凝胶染色程序。
● 使用方法:1. 将电泳后的PAGE胶取下放入塑料容器中,加入适量染色液(以刚刚覆盖过胶面为适),条带1-2分钟即可见。
2. 摇床上常温摇动10-15分钟。
3. 观察结果。
● 注意事项:1. 使用方法中的各种参数仅针对面积8×10cm或10×10cm,厚度0.75mm和1mm的凝胶,如果使用更大面积或更厚的凝胶,请加入更多的染色液并延长染色的时间。
2. 常规染色所需的漂洗,固定,脱色步骤都无必要。
3. 本染色液可以重复利用1-2次,敏感性会有轻微下降,请延长染色时间。
4. 本染色液有轻微腐蚀性,请带手套操作。使用后,请盖好瓶盖,常温密封保存。
超低分子量蛋白电泳试剂盒厂家直销专业优质供应商:北京百奥莱博科技有限公司
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我公司是一家集研发、销售、实验室技术服务于一体的高科技企业。 多年来一直处于行业前沿。我们专业经营培养基、生化试剂、超低分子量蛋白电泳试剂盒、进口ELISA试剂盒、化工产品、实验室消耗品、实验室耗材以及实验室器材。产品涉及分子生物学、细胞生物学、细菌学、遗传学、免疫学、生物化学、蛋白质学、细胞ZL等领域。
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编号 | 类别 | 名称 |
RFT088 | 蛋白质研究 | Western封闭液III(磷酸化抗体专用) |
RFT117 | 克隆与表达 | pUC18载体 |
RFT042 | 蛋白质研究 | ECL发光Marker |
RFT035 | DNA纯化 | 动物/细胞基因组DNA提取试剂盒 |
RFT005 | 核酸电泳和回收 | 200bp DNA ladder(200-3000bp) |
RFT051 | 蛋白质研究 | 宽分子量蛋白Marker(10-200KD) |
RFT110 | 克隆与表达 | pRT20-T载体试剂盒 |
RFT034 | RNA纯化 | 总RNA提取试剂 |
RFT053 | 蛋白质研究 | 蛋白快速染色液 |
RFT086 | 蛋白质研究 | Western封闭液I(BSA) |
RFT071 | 蛋白质研究 | 5×MonoClolor蛋白上样液 |
RFT039 | 蛋白质研究 | 14.4KD单条带蛋白Marker |
RFT082 | 蛋白质研究 | BCIP/NBT即用型显色试剂盒 |
RFT023 | 核酸电泳和回收 | DNA Marker(250-10000bp) |
RFT096 | 核酸扩增(PCR) | 2×Taq plus MasterMix |
RFT108 | 克隆与表达 | 2×ligation solution MasterMix |
RFT073 | 蛋白质研究 | 5×Tris-甘氨酸电泳缓冲液(干粉型) |
RFT104 | 核酸扩增(PCR) | M-MLV(RNase H-) 反转录酶 |
RFT119 | 核酸电泳和回收 | RealSafe核酸凝胶染色剂 |
RFT049 | 蛋白质研究 | 高分子量蛋白Marker(43-200KD) |
RFT114 | 细胞及免疫学 | JM110化学感受态细胞 |
RFT084 | 蛋白质研究 | TMB显色液(沉淀型,组化或膜HRP显色用) |
RFT077 | 蛋白质研究 | SDS-PAGE凝胶制备试剂盒 |
RFT081 | 蛋白质研究 | 10×RealBlot快速转膜液 |
RFT036 | DNA纯化 | 土壤基因组DNA提取试剂盒 |
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温馨提示:不可用于临床ZL。