猪传染性胃肠炎病毒一步法RT-PCR诊断试剂盒价格

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、YL及其他非科研用途。
 

北京百奥莱博公司提供的猪传染性胃肠炎病毒一步法RT-PCR诊断试剂盒价格稳定性好，灵敏度高,是高品质的单克隆抗体。欢迎新老客户踊跃咨询购买

猪传染性胃肠炎病毒一步法RT-PCR诊断试剂盒价格
编号：DL096
品Pai：百奥莱博
产地：国产|进口
规格：20次
【注意】接到货后请认真阅读注意事项。
【用途】用于猪传染性胃肠炎病毒病的检测、诊断和流行病学调查。
【试剂】     
编号 数量 保存
SR-I 8mL 4℃
SR-II 14mL 4℃
TU-1 250uL -20℃
TU-2 20uL -20℃
TU-3 20uL -20℃
TU-4 20uL -20℃
TU-5 500uL -20℃
TU-6 60uL -20℃
TU-7 25uL 4℃
TU-8 30uL 4℃
T 500 uL -20℃
【操作步骤】
1.RNA提取  
(1)取疑似猪传染性胃肠炎病毒病的病料（空肠、小肠及其内容物等），用Hank’s液或PBS研磨成1：3悬液，在－20 ℃反复冻融3次，经3 000 r/min离心5 分钟，上清液再经12 000 r/min离心15分钟，上清液－70 ℃保存备用。
(2)取200uL上清液（或标准品Ｔ），移入新的1.5mL灭菌EP管中，加入400uLSR-I，反复颠倒几次混匀，室温放置5~10分钟。
(3)加入200uL氯*(代"仿")，漩涡振荡15秒混匀。室温下放置2~3分钟。
(4)12000r/min离心10分钟，取上层水相(注意：切勿吸取到里两相之间的杂质)，转移到一个新的EP管中，再加入等体积异丙醇混匀，室温放置10分钟。
(5)12000r/min离心10分钟，弃去上清，加入SR-II 700uL，充分洗涤沉淀RNA后，12000r/min离心5分钟，小心吸去上清（注意：严格防止RNA丢失）。
(6)用洁净吸水纸吸干管壁的SR-II，室温放置2~3分钟。用20uLTU-5溶解，即为模板，即用或-70℃冻存备用。
2.One-Step RT- PCR加样体系
TU-1 12.5uL
TU-2 1uL
TU-3 1uL
TU-4 1uL
模 板 9.5uL
3.反应程序
第1步 50℃ 45min
第2步
第3步 94℃预变性
94℃变性 5min
1min
第4步 58℃退火 1min 30个循环（3～5步）
第5步 72℃延伸 1min
第6步 72℃延伸 6min
第7步 4℃终止 5min
4.电泳
    称量0.25g琼脂糖，放入锥形瓶，加入25mL 1×TAE液（可配置50×浓缩液，储存备用），于微波炉中熔解，加入1.5uL的TU-8混匀。封闭好电泳槽，加入梳子，倒入琼脂凝胶，待凝固后，将PCR产物5uL混合1uL TU-7，加样于凝胶孔中，同时在相邻孔加3uLTU-6，在120v 电压下，1×TAE液中电泳15分钟，在紫外成像仪下观察结果。
【结果判定】
    在约1128bp位置出现扩增带，实验结果为阳性（如图）。                              
1.DL2000 Marker      
2.标准阳性片段
【注意事项】
1.每次使用，开盖之前请先瞬时离心，使试剂沉于管底。
2.本试剂盒为20头份量诊断试剂，操作失误或移液器不准确造成ZZ剂量不够情况，不予负责。
3.所有试剂在要求温度下保存，-20℃保存试剂尽量减少反复冻融，使用后的试剂立即放回，避免在室温搁置太久。
4.尽量建立PCR试验操作区，避免交叉污染，RNA抽提严格防止RNA酶污染，要求戴一次性塑料手套，并经常更换。
5.加样和反应程序严格按照说明书进行，由于操作失误、移液器不精确、定时不准确造成无结果情况，不予负责。
6. 枪头、离心管和PCR管在使用前，用DEPC水（0.1%）处理，然后高压灭菌后烘干，操作过程尽量不要用手接触，可用镊子夹取。
7.注意防止试剂污染，在有效期限前用完。
8. TU-8所装试剂为致癌物质，避免接触到皮肤。如若不甚接触，请立即用洗涤剂清洗。
【有效期】
本制品有效期为1年，生产日期见包装侧面。

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·呋喃唑酮西林代谢物二合一ELISA检测试剂盒
编号：DL001
规格：96T
一、原理
本试剂盒采用间接竞争ELISA方法定量检测样品中呋喃唑酮西林代谢物的残留量。
二、适用范围
定量检测动物组织（鸡肉、猪肉、水产）、蜂蜜中呋喃唑酮西林代谢物的残留。
三、试剂盒特点及技术指标
* 检 测 时 间 ：45min
* 试剂盒检测纯阴性样本的背景值＜0.1 ppb；
* 样品处理方法二合一，节省了人力物力。
试剂盒检测样本的灵敏度和准确度：
样本 检测下限 回收率
动物组织 0.1ppb 70%-120%
蜂蜜 0.1ppb 70%-120%
试剂盒特异性：
药物名称 交叉反应率（%）
呋喃唑酮 100%
呋喃西林 <1%
呋喃它酮 <1%
呋喃妥因 <1%
四、所需材料
仪器：微孔板酶标仪450 nm/630 nm、均质器、振荡器、氮吹仪、离心机、刻度移液管（10 mL）、天平（感量0.01 g）、离心管（5 mL, 50 mL）
微量移液器：单道 1µL～10 µL、10 µL～100µL
       多道 50µL～300µL
试剂：乙酸乙酯、正己烷、去离子水、甲醇、浓盐酸 、氢氧化钠
五、 试剂盒组成
序 组成部分 96T装量
1 呋喃唑酮酶标板 12×8孔
2 呋喃唑酮标准品*6 6×1 mL
3 呋喃唑酮高浓度标品100ppb 0.5mL
4 呋喃唑酮酶标物 13 mL
5 呋喃唑酮抗体 7mL
6 底物液A液 7 mL
7 底物液B液 7 mL
8 终 止 液 7 mL
9 10×浓缩洗涤液 40 mL
10 2×呋喃西林唑酮样品稀释液 45 mL
11 衍生化试剂 11mL
*注：6个标准品浓度为：0 ppb,  0.05ppb, 0.15 ppb, 0.45ppb, 1.35ppb, 4.05 ppb，直接使用。
六、 酶标免疫测定程序
①  将所需试剂从冷藏环境中取出，待其完全回  升至室温（20～25℃）后方可使用。注意每种液体试剂使用前均须摇匀。
②  按标准品和样品双孔平行的数量使用呋喃唑酮微孔。
③  加标准品/样品、抗体：加标准品/样品50µL
到对应的微孔中，加入呋喃唑酮酶标物50µL /孔，再加入呋喃唑酮抗体50µL/孔，轻轻振荡混匀，用盖板膜盖板后置室温反应30min。
④  洗板：小心揭开盖板膜，将孔内液体甩干，
加入洗涤工作液250µL/孔，每次静置20s，甩去孔内液体，重复洗涤3次，ZH一次用吸水纸拍干（拍干后未被清除的气泡可用未使用过的枪头戳破）。
⑤  显色：加入底物液A液50µL/孔，再加底物   
液B液50µL/孔，轻轻振荡混匀，用盖板膜盖板后置室温反应15～20min。
⑥  测定：加入终止液50µL/孔，用酶标仪立即  测定450nm处的吸光度值（建议用双波长450/630nm）检测。
七、 结果判定
以标准品百分吸光率为纵坐标，以呋喃西林唑酮标准品浓度（ppb）的半对数为横坐标，绘制标准曲线图。将样本的百分吸光率代入标准曲线中，从标准曲线上读出样本所对应的浓度，乘以其对应的稀释倍数即为样本中呋喃西林唑酮实际浓度。（详见试剂盒专业分析软件，以便进行大量样本的分析计算。）
八、 注意事项
① 洗板拍干后应立即进行下一步操作。
② 反应终止液为2M硫酸，避免接触皮肤。
③ 不使用过了有效期的试剂盒，不交换使用不同批号的试剂。
④ 0标准的吸光度（450/630nm）值小于0.5（A450nm<0.5）时，表示试剂可能变质。
⑤ 在加入底物液A液和底物液B液后，一般显色时间为15～20min即可。若颜色较浅，可延长反应时间到30min，反之则减短反应时间。
九、贮藏条件及保存期
贮藏条件： 2～8℃
保 质 期： 12个月


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·赭曲霉毒素A单克隆抗体
编号：DL131
英文名称：Monoclonal Antibodies Against OTA
规格：100μL
物理性状：液体，避免反复冻融
来源：BALB/C小鼠
ELISA效价： 0.005M PBS 体系下1:100000 以上
IC50： 0.3 - 0.45 ppb
缓冲液：0.01M PBS PH7.4
储存条件：-20℃以下
有效期：5年，-20℃以下保存

·鸡传染性支气管炎一步法RT-PCR诊断试剂盒
编号：DL101
英文名称：Monoclonal Antibodies Against OTA
规格：20次
【注意】接到货后请认真阅读注意事项。
【用途】用于鸡传染性支气管炎病毒病的检测、诊断和流行病学调查。
【试剂】
编号 数量 保存
SR-I 4mL 4℃
SR-II 10mL 4℃
SR-Ⅲ 14mL 4℃
TU-1 1.5mL 4℃
TU-2 0.8mL 4℃
TU-3 250uL -20℃
TU-4 20uL -20℃
TU-5 20uL -20℃
TU-6 20uL -20℃
TU-7 60uL -20℃
TU-8 25uL -20℃
T 500uL -20℃
【操作步骤】
1.RNA提取 
(1) 取疑似鸡传染性支气管炎病的病料（肾脏、肺或尿囊液）1~4g于无菌研钵，研磨并用Hanks液或PBS稀释成1：4乳剂，分装1.5 mL灭菌EP管，反复冻融2~3次，8000r/min离心5分钟。
（2）取200uL上清液（或标准品Ｔ），移入新的1.5mL灭菌EP管中，加入200uLSR-I，漩涡振荡混合均匀，静置5min。
（3）加75uL TU-1，漩涡振荡混合均匀，10000r/min离心5 min。
（4）将上清转移到新的2 ml离心管（试剂盒内提供）中，加入300 uL 异丙醇（1%冰乙酸），上下倒置6-8次，混合均匀。
（5）将步骤4中的混合液移入制备管中，并将制备管置于同一2 ml离心管，10000 r/min离心1min。
（6）弃滤液，将制备管置回到2 ml离心管中，加500 uL SR-II，室温静置1min，10000 r/min离心1 min。
（7）弃滤液，将制备管置回到2 ml离心管中，加700 uL SR-Ⅲ，10000 r/min离心1 min。
（8）将制备管置回到2 ml离心管中，10000 r/min离心1 min。
（9） 将制备管置于洁净的1.5 ml离心管中（试剂盒内提供），在制备管膜ZY加40 uL TU-2， 室温静置1 min。10000 r/min离心1 min洗脱。洗脱液即为模板，即用或-70℃冻存备用。
2.One-Step RT- PCR加样体系
TU-3 12.5μl
TU-4 1μl
TU-5 1μl
TU-6 1μl
模 板 9.5μl
3.反应程序
第1步 50℃ 45min  
第2步
第3步 94℃预变性
94℃变性 5min
1min  
第4步 52℃退火 1min 30个循环（3～5步）
第5步 72℃延伸 1min  
第6步 72℃延伸 6min  
第7步 4℃终止 5min  
4.电泳
配制1%琼脂糖凝胶，取PCR产物5uL混合1uL TU-8，加样于凝胶孔中，同时在相邻孔加3uLTU-7，在120v 电压下，1×TAE液中电泳15分钟，在紫外成像仪下观察结果。
【结果判定】
    在约440bp位置出现扩增带，实验结果为阳性（如图）。                             
 1. DL2000 Marker    
 2.标准阳性片段
【注意事项】
1.每次使用，开盖之前请先瞬时离心，使试剂沉于管底。
2.本试剂盒为20头份量诊断试剂，操作失误或移液器不准确造成ZZ剂量不够情况，不予负责。
3.尽量建立PCR试验操作区，避免交叉污染，RNA抽提严格防止RNA酶污染，要求戴一次性塑料手套，并经常更换。
4.枪头、离心管和PCR管在使用前，用DEPC水（0.1%）处理，然后高压灭菌后烘干，操作过程尽量不要用手接触，可用镊子夹取。
【有效期】
本制品有效期为1年，生产日期见包装侧面。


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BTN91106 T7体外转录试剂盒 T7 in vitro Transcription Kit
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