特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、YL及其他非科研用途。
北京百奥莱博主要从事生物试剂的生产和销售,产品线涵盖Western封闭液II(奶粉)厂家现货在内的分子生物学试剂产品,还包括PCR及荧光定量PCR、核酸提取试剂盒类、样本核酸保护试剂、核酸提取、克隆与转化、蛋白纯化、蛋白检测、免疫组化、细胞凋亡与抗体等。
品Pai:百奥莱博
产地:国产|进口
编号:RFT087
规格:100ml
● 产品简介:
Western Blot 实验中,为防止印迹膜与检测系统中的蛋白成分(如抗体 IgG 等)发生非特异性吸附,导致实验结果不清晰,通常在进行一抗孵育前需预先对印迹膜上的非特异结合位点进行封闭。
本产品以奶粉为基础,采用独特配方,可快速GX地封闭膜上多余的结合部位,减少非特异结合情况的产生,降低背景,适用于各种转印膜的封闭,操作方便快捷。
另外,本产品特别添加了蛋白稳定剂,可保证每次实验封闭效果稳定可靠。
● 贮存: 2-8℃贮存,有效期半年。
● 注意事项:1 由于奶粉中含有微量牛IgG,其结构与羊(goat and sheep)IgG极其类似。因此来源于羊的一抗或二抗能与牛IgG交叉反应,产生高背景。因此该封闭液不推荐用于羊来源的一抗或抗羊的二抗。
2 奶粉中含有生物素,该封闭液不能用于Streptavidin/Biotin系统。
3 该封闭剂是最适合ECL/HRP系统的封闭剂。
● 使用说明:特别提醒:该产品效期较短,开盖后如有异味或有絮状沉淀,表明已经失效,不能使用。
1. 本产品无需稀释,开盖即用。
2. 目的蛋白转移完毕后,将印迹膜放入容器中,加入适量Western封闭液II(以完全覆盖印迹膜为宜) 。
3. 室温孵育30分钟至2小时,必要时可4℃孵育过夜。
4. 封闭结束后弃去封闭液,进行Western Blot后续操作。
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关于Western封闭液II(奶粉)厂家现货的更详细说明,请致电我公司咨询,我们将以最饱满的热情为您提供解答,此外,我公司专业供应下列产品:
·高纯质粒小提试剂盒
编号:RFT028
规格:100次|200次
● 试剂盒内容及保存:试剂盒组成 100次 200次 贮存方式
RNase A 300 μl 600 μl -20℃
Lysis Dye 600μl 2×600μl 室温
溶液P1 30 ml 60 ml 室温
(加入RNase A后2-8℃保存)
溶液P2 30 ml 60 ml 室温
溶液P3 40 ml 80 ml 室温
去蛋白液PD 60 ml 120 ml 室温
漂洗液PW 25 ml 2×25 ml 室温
洗脱缓冲液EB 15 ml 15 ml 室温
质粒吸附柱CP 100个 2×100个 室温
收集管(2 ml) 100个 2×100个 室温
说明书 1份 1份
● 储存条件和效期:本试剂盒在室温(25℃左右)干燥条件下,可保存1年;更长时间的保存可置于2–8℃。2–8℃保存条件下,若溶液产生沉淀,应在使用前置于37℃下溶解沉淀至溶液澄清后再使用。单独包装的RNase A 在-20℃可稳定保存1年以上。加入RNase A后的溶液P1应置于2–8℃保存,可稳定保存半年。
● 产品简介及使用说明:本试剂盒采用经典的碱裂解法裂解细菌,再通过离心吸附柱在高盐状态下特异性地结合DNA的特性,可以从1–5ml大肠杆菌LB培养液中快速提取3–20μg纯净的高拷贝质粒DNA。提取的质粒可适用于各种常规操作,包括酶切、PCR、测序、连接和转化等实验。然而,对质粒纯度要求更高的转染实验(要求无内毒素),此试剂盒不能达到要求。另外,尽管该试剂盒可以抽提较大的质粒(>10kb),但我们不推荐使用。如果一定要使用,请参考以下方法:加大菌体使用量(使用5–10 ml过夜培养物),同时按照比例增加P1、P2、P3的用量;洗脱缓冲液应在70℃预热,在吸附和洗脱时可以适当的延长时间,以增加提取效率,其它步骤相同。
● 产品特点:1使用了Lysis Dye,菌体裂解是否完全一目了然。由于判断菌体裂解和中和是否彻底更主要取决于操作者的经验,所以我们增加了Lysis Dye(一种能使裂解/中和体系变换颜色的试剂)来帮助观察裂解/中和的程度。加入P1后,Lysis Dye使菌液变为浑浊的红色;加入P2后,Lysis Dye立即使溶液变为澄清的红色,裂解是否完全只要观察红色溶液是否澄清,如果红色非常均一,表明裂解充分;在完全裂解的体系中加入P3混匀后,体系立即变为黄色,任何红色的残留表明没有完全混匀或者中和不彻底。
2 增加了去蛋白液PD,能更加彻底地去除蛋白污染,得到纯度更高的质粒。
● 准备工作:1 将试剂盒附带的RNase A全部加入到溶液P1中(如15ml P1中加入150μl RNase A),混匀后4℃贮存。
2 按照标签所示在漂洗液PW中加入无水乙醇,混匀后盖紧瓶盖后室温贮存备用。
3 每次使用前请检查溶液P2,溶液P3和去蛋白液PD是否有沉淀生成,如果出现沉淀,37℃温浴至沉淀溶解后再使用。
● 使用Lysis Dye的标准操作步骤:如非指出,所有离心步骤均为使用台式离心机在室温下离心。
1.取1–5 ml过夜培养的菌液加入离心管中,10,000g 离心1分钟,尽量吸除上清。
注:菌液较多时可以通过几次离心将菌体沉淀收集到一个离心管中。
2.向菌体沉淀的离心管中加入250 μl溶液P1(请先检查是否已加入RNaseA)和5μl Lysis Dye,使用移液器或涡旋振荡器彻底悬浮细菌细胞沉淀,此时溶液为浑浊的红色。
注:如果有未彻底混匀的菌块,会影响裂解,导致提取量和纯度偏低。
3.加入250 μl溶液P2,温和地上下翻转6–8次使菌体充分裂解,此时溶液变为澄清的红色。
注:温和地混合,不要剧烈震荡,以免污染基因组DNA;所用时间JD不应超过5分钟 ,以免质粒受到破坏;红色溶液应该透明均一,如有浑浊红色颗粒,表明裂解不充分,会大大降低质粒提取效率。
4.加入350 μl溶液P3,立即温和地上下翻转,充分混匀,混匀充分的标志是溶液完全呈透明的黄色,如有可见红色,说明混匀不彻底。10,000g 离心10分钟。
注:P3加入后应立即混合,避免产生局部沉淀。
5.小心地将上清转移到吸附柱CP中(吸附柱放入收集管中),10,000g离心30–60秒,倒掉收集管中的废液,将吸附柱CP重新放回收集管中。
6.向吸附柱CP中加入500 μl去蛋白液PD,10,000g离心30秒,倒掉收集管中的废液,将吸附柱CP重新放回收集管中。
7.向吸附柱CP中加入700 μl漂洗液PW(请先检查是否已加入无水乙醇),10,000g 离心30–60秒,倒掉收集管中的废液,将吸附柱CP重新放回收集管中。
8.向吸附柱CP中加入500 μl漂洗液PW,10,000g 离心30–60秒,倒掉收集管中的废液。
9.将吸附柱CP置于重新放回收集管中,10,000g 离心2分钟。
注:此步骤目的是将吸附柱中残余的漂洗液去除,JD不可省略,因为漂洗液中乙醇的残留会影响后续实验(酶切,PCR等)。
10.将吸附柱CP置于一个干净的1.5ml离心管中,向吸附膜的ZY部位悬空滴加50–100 μl洗脱缓冲液EB,室温放置2分钟,10,000g 离心2分钟将质粒溶液收集到离心管中,-20℃保存。
注:● 为了增加质粒的回收效率,可将得到的洗脱液重新加入离心吸附柱中,再次离心收集。
● 洗脱缓冲液体积不应少于50 μl,体积过小影响回收效率。
● 洗脱液的pH值对于洗脱效率有很大影响。若用水做洗脱液应保证其pH值在7.0-8.5范围内,pH值低于7.0会降低
洗脱效率。
●不使用Lysis Dye的标准操作步骤:如非指出,所有离心步骤均为使用台式离心机在室温下离心。
1.取1–5 ml过夜培养的菌液加入离心管中,10,000 g离心1分钟,尽量吸除上清。
注:菌液较多时可以通过几次离心将菌体沉淀收集到一个离心管中。
2.向菌体沉淀的离心管中加入250 μl溶液P1(请先检查是否已加入RNaseA),使用移液器或涡旋振荡器彻底悬浮细菌细胞沉淀。
注:如果有未彻底混匀的菌块,会影响裂解,导致提取量和纯度偏低。
3.加入250 μl溶液P2,温和地上下翻转6–8次使菌体充分裂解。
注:温和地混合,不要剧烈震荡,以免污染基因组DNA;所用时间JD不应超过5分钟,以免质粒受到破坏。
4.加入350 μl溶液P3,立即温和地上下翻转6–8次,充分混匀,此时会出现白色絮状沉淀。10,000g 离心10分钟。
注:P3加入后应立即混合,避免产生局部沉淀。如果上清中还有微小白色沉淀,可再次离心后取上清。
5.小心地将上清转移到吸附柱CP中(吸附柱放入收集管中),10,000g 离心30–60秒,倒掉收集管中的废液,将吸附柱CP重新放回收集管中。
6.向吸附柱CP中加入500 μl去蛋白液PD,10,000g离心30秒,倒掉收集管中的废液,将吸附柱CP重新放回收集管中。
7.向吸附柱CP中加入700 μl漂洗液PW(请先检查是否已加入无水乙醇),10,000g 离心30–60秒,倒掉收集管中的废液,将吸附柱CP重新放回收集管中。
7 向吸附柱CP中加入500 μl漂洗液PW,10,000g 离心30–60秒,倒掉收集管中的废液。
8.将吸附柱CP置于收集管中,10,000g 离心2分钟。
注:此步骤目的是将吸附柱中残余的漂洗液去除,JD不可省略,因为漂洗液中乙醇的残留会影响后续实验(酶切,PCR等)。
9.将吸附柱CP置于一个干净的1.5ml离心管中,向吸附膜的ZY部位悬空滴加50–100 μl洗脱缓冲液EB,室温放置2分钟,10,000g离心2分钟将质粒溶液收集到离心管中,-20℃保存。
注:● 为了增加质粒的回收效率,可将得到的洗脱液重新加入离心吸附柱中,再次离心收集。
● 洗脱缓冲液体积不应少于50 μl,体积过小影响回收效率。
● 洗脱液的pH值对于洗脱效率有很大影响。若用水做洗脱液应保证其pH值在7.0-8.5范围内,pH值低于7.0会降低洗脱效率。
Western封闭液II(奶粉)厂家现货关键词:Western封闭液II,RFT087,奶粉
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马尿酰-组氨酰-亮氨酸 Choline oxidase 207386-83-2
邻氯青霉素钠 o-Cresolphthalein complexon 7081-44-9
对氨基苯磺酸 ACES 121-57-3
9037-22-3 支链淀粉 Amylopectin
ARB12364 大鼠转化生长因子β(TGF-β)代做ELISA实验 Rat transforming growth factor-β,tgf-β ELISA KIT
二乙酸萤光素 L-Cysteine 596-09-8
罗丹明B Potassium tetraphenylborate 81-88-9
BL0632 Q-琼脂糖凝胶HP Q Sepharose HP
PY04-028 多粘菌素(I) 1.2mg/支×10支 每支添加于100ml亚硫酸盐-多粘菌素-磺胺嘧啶琼脂基础(SPS)培养基中,用于产气荚膜梭菌的平板计数
ARB11839 人凝血因子Ⅷ相关抗原(FⅧ-Ag)检测服务 Human coagulation factor Ⅷ related antigen,fⅧ-ag ELISA KIT
BTN100410 超快转染试剂盒 Rapid Transfection Reagent
ARB11869 人糖基化依赖的细胞黏附分子(GlyCAM-1)血清中含量检测 Human glycosylation-dependent cell adhesion molecule-1,glycam-1 ELISA KIT
ARB12117 大鼠可溶性血管内皮细胞蛋白C受体(sEPCR)定量分析 Rat soluble endothelial protein c receptor,sepcr ELISA KIT
ARB12778 小鼠α1微球蛋白(α1-MG)含量检测 Mouse α1-microglobulin,α1-mg ELISA KIT
角豆胶 Sarcosine ethyl ester HC1 9000-40-2
BTN131121 蛋白折叠试剂盒 Protein Folding Kit
ARB10955 人肝素辅因子Ⅱ(HCⅡ)酶免分析 Human heparin cofactor Ⅱ,hcⅡELISA KIT
ARB12499 大鼠神经营养因子3(NT-3)血清中含量检测 Rat neurotrophin 3,nt-3 ELISA KIT
PY01-091 肌苷 10克
ARB12955 小鼠血管内皮细胞生长因子受体2(VEGFR-2/Flk-1)检测服务 Mouse vascuoar endothelial cell growth factor receptor 2,vegfr-2/flk-1 ELISA KIT
Western封闭液II(奶粉)厂家现货关键词:Western封闭液II,RFT087,奶粉
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ARB11833 人整合素连接激酶1(ILK-1)ELISA代测服务 Human integrin-linked kinase 1,ilk-1 ELISA KIT
ARB13754 骆驼β内啡肽(β-EP)ELISA检测服务 Camel beta-endorphin,β-ep ELISA KIT
BTN131051 十二烷基磺酸钠清除剂 SDS Erasol
SJ0660 DNA产物纯化试剂盒
E0201 抗凝山羊血(无菌 pet瓶装)
E0601 脱纤维裂解小牛血(无菌) 100ml/500ml
ARB14150 大鼠活性氧(ROS)Elisa分析
F030709 BIOTIN标记羊抗乙肝e抗原抗体 Polyclonal Goat Anti-HBeAg*BIOTIN
58-58-2 嘌呤霉素盐酸盐 Puromycin,2HCl
PY02-384 R2A琼脂 250克
ARB12748 小鼠CD19分子(CD19)检测服务 Mouse cluster of differentiation 19,cd19 ELISA KIT
ARB12717 大鼠髓过氧化物酶(MPO)代做ELISA实验 Rat myeloperoxidase,mpo ELISA KIT
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