FITC－羊抗小鼠IgG说明书

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、YL及其他非科研用途。
 

北京百奥莱博专业生产供应FITC－羊抗小鼠IgG说明书，我公司销售全品类的分子生物学试剂，价格优惠，欢迎广大科研工作者垂询订购。

产地：国产|进口
品Pai：百奥莱博
规格：0.5ml/5ml
编号：XH088
荧光素标记抗体，是目前广泛用于免疫病理、细胞化学、流氏细胞学、病毒学及自身抗体的临床免疫诊断之中的特异、灵敏、定性和定位相结合的免疫化学试剂。
我们生产的荧光素标记羊抗小鼠IgG是将异硫氰酸荧光素（FITC，来源于SIGMA），经过常规方法标记在抗体羊抗小鼠IgG（来源于我公司自己纯化的抗体）分子上，经过过柱，透析，定量，加入稳定剂等，制成FITC－羊抗小鼠IgG。
保存条件：-20℃冻存。浓度：抗体2mg/ml。
应用范围：FITC－羊抗小鼠IgG主要用于一抗来源于小鼠多抗（单抗也行）的后续实验。如免疫组化。

主要性能：
FITC为Sigma异构体I，ZD吸收峰为495nm，ZD发射峰为525nm。
工作液用0.01mol/L pH7.4PBS作1：5～1:20稀释使用，稀释过的抗体尽快用完，不要冻融。
除FITC－羊抗小鼠IgG说明书外，我公司正在打折促销以下产品：

·羊抗鸡IgG（纯化抗体）
编号：XH097
规格：1mg/10mg
先以A蛋白纯化免疫球蛋白鸡IgG，用此鸡IgG免疫山羊，经过多次免疫后，测得山羊血清的效价达到要求后，动脉一次取血，静置得到血清，血清采用DEAE离子交换吸掉杂蛋白，再用硫酸铵沉淀，透析，定量等进一步处理得到纯化羊抗鸡IgG抗体，此纯化抗体可以用于标记，免疫沉淀，ELISA等常规免疫学实验。
如果客户对抗体纯度要求更高，本公司可以定做免疫亲和纯化的抗体，以鸡IgG结合在树脂上，吸附全部有活性的抗体，这样得到的抗体纯度更高，当然，成本也更高。

·Taq Plus DNA Polymerase
编号：XH023
规格：500U/2500U
产品简介：
本公司生产的Taq Plus DNA Ploymerase是Taq酶和Pfu酶的1：1混合物，既有5’→ 3’核酸外切酶活性，又有3’→5’核酸外切酶活性，具备扩增效率高、错配率低的特点。与Taq酶相比，Taq Plus DNA Ploymerase具有扩增长度增加（对简单模板有效扩增长度可达20kb，对复杂模板也可达10kb）、保真度好等优点；与Pfu酶相比，具有扩增速度快、反应效率高的优势。其PCR产物可直接进行TA克隆，如需提高克隆效率，建议先纯化，加A后再进行TA克隆。常用于一些对保真度要求高和模板结构复杂（如GC含量高、有二级结构等）的PCR扩增，大多数情况下可替代Taq酶。

活性定义：
1单位(U) Taq Plus DNA Polymerase活力定义为在74℃，30分钟内，以活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物，将10nmol脱氧核苷酸掺入到酸不溶物质所需的酶量。

保存
-20℃
2-8℃

产品内容：
酶储存缓冲液
10×Taq Plus Buffer
20 mM Tris-HCl (pH 8.0)
200 mM Tris-HCl (pH 8.4)
0.1 mM EDTA
200 mM KCl
1 mM DTT
100 mM (NH4)2SO4
100 mM KCl
15 mM MgCl2
50% glycerol
1%Triton X-100
Stabilizers
其它

注意事项：
1、Taq Plus DNA Ploymerase应储存于-20℃，有效期12个月。
2、取Taq Plus DNA Ploymerase做PCR反应时，请用高压灭菌处理过的吸头。
3、一般情况下，Taq Plus DNA Ploymerase应该可以很好地扩增5kb以下的片段。能否成功扩增更长的片段，主要与模板的结构和引物的设计有关，如果扩增长片段有困难，选用Long Taq DNA Ploymerase。


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·全血基因组DNA提取试剂盒
编号：XH016
规格：50T/200T
原理简介
本试剂盒适用于各种动物抗凝全血样本，用于从中提取基因组DNA。独特的裂解缓冲液加上蛋白酶K等迅速去掉除DNA外的其他物质，并利用玻璃奶吸附DNA，进一步的去掉其他杂质，提取出来，得到的DNA可用于PCR/Real time-PCR，sequencing，Southern blot，mutant analysis，SNP 等下游应用实验。
注意事项
1．裂解液低温时可能出现析出和沉淀，可以在热水中温浴几分钟帮助重新溶解，恢复澄清透明后冷却到室温即可使用。
2．避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化，各溶液使用后应及时盖紧盖子。
3．RNaseA经常使用可放2－8度保存，蛋白酶K请放－20度保存。
4．同一样本，如果想大量提取，可以增加样本量，并且每一步试剂加量，但使用次数会成倍减少。
操作步骤
在合适的容器中，用双蒸水将红细胞裂解液（10×）稀释成1×。即10ml溶液中加入90ml双蒸水混匀。
1．取不超过500ul抗凝血，加入三倍体积的稀释过的红细胞裂解液，混匀。放置2分钟，12000rpm离心1分钟。去上清。再加入2倍体积的红细胞裂解液，用移液器轻轻吹打沉淀，充分混匀，离心，弃上清，沉淀为白细胞。如果血液为家擒类动物，因为红细胞有核，所以可以省去此步，但加入的样品量不要超过50ul,直接进入下一步。
2．加入250ul裂解液，加入10μl RNase A(10mg/ml)溶液，振荡混匀，室温放置5-10分钟。
3．加入10μl蛋白酶K(10mg/ml)溶液，颠倒混匀，65℃放置10－30分钟，期间颠倒3－5次，小心内心管盖受热开启。如30分钟沉淀无法完全消失，请注意第6步处理。
4，在上清中加入三倍体积无水乙醇，充分混匀。
5．12000rpm离心5分钟，吸去上清，核酸在沉淀中。
6．沉淀中加入500ul结合液，65℃水浴1-2分钟，核酸沉淀可溶解（如无法完全溶解，可转移上清到一新的离心管中，弃沉淀）。
6．玻璃奶摇匀。加入50ul摇匀的玻璃奶，混匀，室温放置2分钟，10000转/分钟离心1分钟，去上清；沉淀加入1ml 70%乙醇，振荡混匀，10000转/分钟离心1分钟，去上清，70%乙醇重复洗一次，再用无水乙醇洗一次。去上清，再次离心2分钟，用小吸头吸去上清。
7．室温放置10分钟（如果玻璃奶加量，请适当延长放置时间，此步为去除残余酒精，以免影响下游实验），加入50－100ul TE缓冲液混匀溶解，65℃水浴5分钟。离心，取上清为所提基因组。
8．电泳或者其他方法检测，进入下游实验。


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·10×多聚赖氨酸溶液(免疫组化)
编号：XH107
规格：10ml
产品简介：
多聚赖氨酸溶液是广泛应用的组织切片与玻片黏合剂，该多聚阳离子分子与组织切片上的阴离子相互作用会产生较强的黏合力
适用组织学，免疫组织化学，冰冻切片，细胞涂片，原位杂交等使用的玻片的防脱片处理，以防实验操作过程中组织掉片。
保存温度：-20℃

使用说明
免疫学
操作步骤
1．灭菌的ddH2O 1:10稀释该多聚赖氨酸溶液。
2．用之将稀释的多聚赖氨酸溶液放在室内，使其温度到室温18-26℃
3．将玻片浸在稀释过的多聚赖氨酸溶液内5分钟。增加时间不会提高包被效果。
4．在60℃烘箱1小时干燥，或室温18-26℃过夜干燥待用。
5．处理过的玻片可常温存放一年。
[注意]
1． 每100mL已稀释的多聚赖氨酸溶液可处理90张玻璃片， 超过90张片子将影响其黏合力。
2． 用之前的玻片必须保持清洁。必要时用含1% HCl的70%乙醇溶液来清洗。
4． 稀释过的多聚赖氨酸溶液要放在2-8℃，至少在3个月内是稳定的。
5． 用过的稀释液再次使用时要过滤，若出现浑浊或长菌请丢弃。
本试剂未经无菌过滤，如果想用于细胞培养，请自行过滤。

·非变性细胞裂解缓冲液
编号：XH065
规格：100ml
非变性细胞裂解缓冲液(Nondenaturing Lysis Buffer)内含非离子型去垢剂、盐、和蛋白磷酸酶YZ剂，能裂解细胞并在非变性条件下释放胞浆蛋白和可溶性膜蛋白、核蛋白。非变性条件下的裂解蛋白产物ZD限度地保留了蛋白的特性和功能，如抗原-抗体结合或酶学活性，因此适宜于进行免疫共沉淀。另外，有些抗体对非变性蛋白具有更高的结合能力或只能识别非变性蛋白的抗原位点，这种情况应该使用非变性裂解。
非变性细胞裂解缓冲液的主要成分为20mM Tris(pH7.5)，150mM NaCl，1% Triton X-100，1% NP-40以及2mM sodium pyrophosphate，25mM β-glycerophosphate，1mM EDTA，1mM Na3VO4，0.5 ug/ml leupeptin等多种YZ剂。可以有效YZ蛋白的降解，并维持原有的蛋白间相互作用。
非变性蛋白裂解液裂解得到的蛋白样品，可以用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度。由于含有较高浓度的Triton X-100等干扰物质，不能用Bradford法测定由本裂解液裂解得到样品的蛋白浓度。
保存条件：
-20℃保存，一年有效。
注意事项：
为取得ZJ的使用效果，尽量避免过多的反复冻融。可以适当分装后使用。裂解样品的所有步骤都需在冰上或4℃进行。
关于裂解液的选择，一方面可以参考我们生产的各种裂解液主要特点、差异，选择合适的裂解液；另一方面也需要通过一些预实验来摸索ZJ的适合您实验条件的裂解液。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用说明：
对于培养细胞样品：
1. 融解非变性蛋白裂解液，混匀。取适当量的裂解液，在使用前数分钟内加入PMSF，使PMSF的ZZ浓度为1mM。
2. 对于贴壁细胞：去除培养液，用PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍(如果血清中的蛋白没有干扰，可以不洗)。按照6孔板每孔加入100-200微升裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下，使裂解液和细胞充分接触。通常裂解液接触细胞1-2秒后，细胞就会被裂解。
对于悬浮细胞：离心收集细胞，用手指把细胞用力弹散。按照6孔板每孔细胞加入100-200微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多，必需分装成50-100万细胞/管，然后再裂解。大团的细胞较难裂解充分，而少量的细胞由于裂解液容易和细胞充分接触，相对比较容易裂解充分。
3. 充分裂解后，10000-14000g离心3-5分钟，取上清，即可进行后续的PAGE、Western、免疫沉淀和免疫共沉淀等操作。
裂解液用量说明：通常6孔板每孔细胞加入100微升裂解液已经足够，但如果细胞密度非常高可以适当加大裂解液的用量到150微升或200微升。
对于组织样品：
1. 把组织剪切成细小的碎片。
2. 融解非变性蛋白裂解液，混匀。取适当量的裂解液，在使用前数分钟内加入PMSF，使PMSF的ZZ浓度为1mM。
3. 按照每20毫克组织加入100-200微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液，如果需要高浓度的蛋白样品，可以适当减少裂解液的用量。)
4. 用玻璃匀浆器匀浆，直至充分裂解。
5. 充分裂解后，10000-14000g离心3-5分钟，取上清，即可进行后续的PAGE、Western、免疫沉淀和免疫共沉淀等操作。
6. 如果组织样品本身非常细小，可以适当剪切后直接加入裂解液裂解，通过强烈vortex使样品裂解充分。然后同样离心取上清，用于后续实验。直接裂解的优点是比较方便，不必使用匀浆器，缺点是不如使用匀浆器那样裂解得比较充分。
用于普通的Western、IP或co-IP，我们推荐使用Western及IP细胞裂解液(P1001)，该裂解液已被国内各大研究机构广泛使用，用户普遍反映很好。裂解细胞或组织后，没有非常粘滞的透明状DNA团块形成，不必采用超声处理等就可以非常理想地用于后续操作。 另外该裂解液裂解的产物也适合用于磷酸化蛋白的Western检测。
对于某些特殊蛋白的IP，如果发现Western及IP细胞裂解液(P1001)效果不是非常理想，可以尝SYRIPA裂解液(强、中或弱)或NP-40裂解液。如果发现IP的时候背景很高，即非特异的蛋白也被IP下来，则需要选用裂解强度较高的裂解液，例如RIPA裂解液(强或中)。如果发现目的蛋白无法被IP下来，则说明裂解液的强度过强，可以使用较为温和的裂解液例如RIPA裂解液(弱)或NP-40裂解液。
对于某些难溶解蛋白的Western，如果发现Western及IP细胞裂解液(P1001)效果不是非常理想，可以尝试使用裂解强度更高的裂解液例如RIPA裂解液(强、中)或SDS裂解液。

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