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北京百奥莱博专业生产供应XH058型线粒体提取试剂盒北京厂家,我公司销售全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
编号:XH058
规格:50T/100T
产地:国产|进口
品Pai:百奥莱博
二,说明
线粒体提取试剂盒用于从动物细胞或组织中分离出完整而纯化的线粒体。适合于动物软组织(肝或脑组织)和硬组织(肌肉)以及培养细胞的线粒体的制备。其制备物产量高,可以被用于细胞凋亡、信号传递、代谢和蛋白组学等的研究。
三,操作步骤
1. 样本处理
a. 组织匀浆:称取100~200 mg新鲜组织如肝脏、脑、心肌等,PBS或生理盐水冲洗,洗净血水,滤纸吸干,用剪刀剪为碎块放入小容量玻璃匀浆器内。加入1.0 mL冰预冷的Lysis Buffer,0℃冰浴上下研磨组织20次;
b. 培养细胞匀浆:消化细胞,PBS洗涤,800 × g 5~10 min离心收集细胞。计数。每次提取需要5 × 107个细胞,加入1.0 mL冰预冷的Lysis Buffer重悬细胞,将细胞悬液转移到小容量玻璃匀浆器内,0℃冰浴研磨30~40次;
2. 将组织或细胞匀浆物转移到离心管,4℃,1000× g 离心5 min;
3. 取上清,加入一新的离心管中,4℃,1000× g 再次离心5 min。
4.取上清,加入一新的离心管中,4℃, 12,000 × g 离心10 min。离心后的上清含胞浆成分,可从中提取胞浆蛋白。将上清转移到新离心管,线粒体沉淀在管底;
5. 在线粒体沉淀中加入0.5 mL Wash Buffer重悬线粒体沉淀,4℃,1000× g 离心5 min;
6.取上清,加入一新的离心管中,4℃, 12,000 × g 离心10 min。弃上清,高纯度的线粒体沉淀在管底;
6. 用50 -100μL Store Buffer 或合适的反应缓冲液重悬线粒体沉淀,立即使用或-70℃保存。
四 注意事项:
1. 为保证获得完整的线粒体,DY是全程低温操作。第二是快速。第三,在不破坏亚细胞器的情况下破碎细胞是制备线粒体的最关键环节。与组织块相比,培养细胞特别是贴壁培养细胞在用玻璃匀浆器匀浆时较难破壁,因而要选用小容量玻璃匀浆器、间隙严密的研杵上下研磨培养细胞。
2. 以离心力g计算正确的离心速度,不同的离心机可据此精确计算离心速度。
3. 进行Western Blot和2D-胶电泳,可直接加入上样缓冲液裂解线粒体。
五 储存:四周内使用可4℃储存,长期置-20℃
转速与离心力换算
G=1.11×(10-5)×R×[rpm]2
G为离心力,一般以g(重力加速度)的倍数来表示;
[rpm] 2即:转速的平方; R为半径,单位为厘米。
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·2×Pfu PCR MasterMix (含染料)
编号:XH033
规格:1ml/10ml
产品简介:
本公司生产的PCR MasterMix中加入了高性能PCR增强剂和稳定剂,适用于常规的PCR反应。由于多种PCR增强剂和稳定剂的发现,稳定GX预配好的PCR混合液不仅简化了操作程序、减少了污染、大大降低劳动强度和取样误差,而且增加了PCR反应的特异性,降低了对PCR条件的要求,使实验结果更加精确。
该产品分为含染料和不含染料两种体系,含染料是指含有电泳指示剂(并不含核酸染料),PCR结束后可以直接电泳,但象EB之类的染料还是必须加的。
质量控制检测:
经检测无外源核酸酶活性,PCR方法检测无宿主DNA残留,能有效扩增人基因组中的单拷贝基因。的MasterMix配方使整个反应体系非常稳定,所有产品在-20℃条件下可保存一年以上,4℃放置三个月或室温放置一周,依旧有很好的活性。
XH058型线粒体提取试剂盒北京厂家关键词:线粒体提取试剂盒,XH058,百奥莱博
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PY02-361 七叶苷培养基 10克
ARB10534 人包虫抗体IgG 含量分析 Human echinococcus antibody igG ELISA KIT
BL1432 1M Tris-HCL(PH=7.4)
水杨酰苯胺 Rhodizonic acid sodium salt 87-17-2
F030623 FITC标记兔抗猴IgG抗体 Rabbit Anti-monkey IgG*FITC
HC0102 25mm针头式滤器
羧甲基葡聚凝胶C-50 1-Piperazineethanol 9047-08-9
ARB13117 小鼠钥孔虫戚血蓝蛋白(KLH IgG)elisa测定使用说明书 Mouse keyhole limpet hemocyanin,klh igG ELISA KIT
二硫代草酰氨 Polyarabinogalactan 79-40-3
ARB10124 人NOD样受体(NLR)elisa检测操作说明书 Human nod-like receptor9,nlr ELISA KIT
F030805 BIOTIN标记山羊抗小鼠IgG抗体 Goat Anti-Mouse IgG*BIOTIN
PY02-051 MH(A)培养基 250克
ARB10378 人甘露糖凝集素受体(MBLR)定量分析 Human mannma binding lectin receptor,mblr ELISA KIT
二硫赤藓糖醇 NHS 6892-68-8
BTN81106 蛋白酶K干粉 Proteinase K Powder
ARB11968 大鼠CD8分子(CD8)酶联免疫定量检测 Rat cluster of differentiation 8,cd8 ELISA KIT
F040314 马IgG抗原 Horse IgG
三异戊胺 Moxifloxacin 645-41-0
XH058型线粒体提取试剂盒北京厂家关键词:线粒体提取试剂盒,XH058,百奥莱博
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·SABC(小鼠IgG)-FITC免疫组化试剂盒
编号:XH109
规格:100T
试剂盒组成:
1, 封闭液:10ml,5%BSA
2, 生物素化羊抗小鼠:浓缩液100ul。
3, SABC-FITC:浓缩液100ul。
4, 稀释液:30ml。
5, 抗荧光衰减封片剂
试剂盒简介:
本试剂盒适合于一抗为小鼠IgG的免疫组化实验. FITC显色。
SABC是专为免疫组化和其他免疫检测而设计的,用以显示组织和细胞中抗原分布。链霉亲和素(StreptAvidin)是一种从链霉菌中提取的蛋白质,同亲和素一样,对生物素有极高的亲和力,亲和素是一个碱性蛋白质(IP=10),经改造后可以转变成中性蛋白质。链霉亲和素等电点接近中性,对组织和细胞的非特异吸附很低,基于链霉亲和素的免疫组化方法背景很低。SABC即StreptAvidin—Biotin Complex。SABC大约可形成一百个左右的过氧化物酶和五十个左右的链霉亲和素所构成的复合物。大量的酶将保证SABC具有很高的敏感性。
自备试剂:
1.粘片剂多聚赖氨酸
2. 0.01 M PBS(pH7.2-7.4)
3. 0.01M柠檬酸钠缓冲液
4、抗荧光衰减封片剂
实验步骤:
以石蜡切片热修复为例
1. 切片常规脱蜡至水。
2.热修复抗原:将切片浸入0.01M 枸橼酸盐缓冲液(PH6.0),电炉或微波炉加热至沸腾后断电,间隔5-10分钟后,反复1-2次。冷却后PBS(pH7.2-7.6)洗涤1-2次。
3.滴加5%BSA封闭液,室温20分钟。甩去多余液体, 不洗。
4.用稀释液将一抗(如小鼠抗IL-10)按一定比例稀释(稀释后的一抗4℃可保存一周),也可另行购买抗体稀释液。滴加稀释的一抗,37 ℃ 1小时左右或20℃时2小时左右。也可4℃过夜。PBS(pH7.2-7.4)洗2分钟×3次。(一抗的稀释度、孵育时间和温度与染色强度、背景有直接关系。一般来说,阳性染色强度不够时,可提高一抗浓度和延长孵育时间;背景过高时,可降低一抗浓度和缩短孵育时间。)
5.根据使用量,用稀释液将生物素化羊抗小鼠IgG浓缩液按1:100稀释成工作液(1ml稀释液加入10ul生物素化羊抗小鼠IgG浓缩液,混匀即成工作液。此工作液4℃可保存一周).滴加生物素化羊抗小鼠IgG工作液,20-37℃ 30分钟。PBS(pH7.2-7.4)洗2分钟×3次。
6.根据使用量,用稀释液将SABC-FITC浓缩液按1:100稀释成工作液(1ml稀释液加入10ul SABC-FITC浓缩液,混匀即成SABC-FITC工作液。此工作液4℃可保存一周).滴加SABC-FITC工作液,20-37℃,30分钟(避光)。PBS(pH7.2-7.4)洗5分钟×4次。
7.滴加抗荧光衰减封片剂封片。荧光显微镜观察。
注意事项:如果染色背景过高,在SABC反应之后,用加有0.01—0.02% TWEEN-20的PBST(pH7.2-7.4)洗涤切片4次,PBS洗2次,然后封片观察。
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温馨提示:不可用于临床ZL。