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北京百奥莱博专业生产供应北京现货Pfu DNA Polymerase批发,我公司销售全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
北京现货Pfu DNA Polymerase批发
产地:国产|进口
规格:500U/2500U
编号:XH022
品Pai:百奥莱博
产品简介:
我们生产的Pfu DNA Ploymerase(高保真TAQ酶)是从克隆有Pyrococcus furiosis DNA Ploymerase基因的大肠杆菌中表达并经过柱纯化分离出来的重组蛋白,其分子量为90kDa。由于Pfu酶具有3’→5’核酸外切酶活性,它能纠正DNA扩增过程中产生的错配,而传统的Taq酶却不能,其它耐热DNA Polymerase如Vent、Deep Vent、Tli、UITma等虽具有校正功能,但Pfu酶是目前已发现的所有耐热DNA Polymerase中出错率ZD的。Pfu酶无5’→3’核酸外切酶活性,PCR反应中的延伸速度一般为0.5-1kb/分钟,比Taq酶要低。Pfu 酶比Taq酶热稳定性更好,95℃ 1小时仍保持90%以上的活性,对于GC含量很高的模板,变性温度可以提高到98℃而不影响其活性。Pfu酶的PCR产物为平末端,可加A处理再与T-载体连接或使用平末端克隆载体。一般用于DNA的高保真扩增,如基因表达克隆、基因定点突变、细胞内基因点突变分析(SNP)和末端补平等。
注意事项:
1、Pfu DNA Ploymerase应储存于-20℃,有效期12个月。
2、取Pfu DNA Ploymerase做PCR反应时,请用高压灭菌处理过的吸头。
3、用Pfu酶扩增时,引物的纯度要求较高,引物长度大于18个碱基,Tm值在55-80℃之间,引物浓度在0.1-0.5uM之间,比Taq酶略高。
活性定义:
1单位(U) Pfu DNA Polymerase活力定义为在74℃,30分钟内,以活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物,将10nmol脱氧核苷酸掺入到酸不溶物质所需的酶量。
北京现货Pfu DNA Polymerase批发极具性价比,此外,我公司正火爆促销以下产品:
·通用RT-PCR试剂盒(两步法M-MLV)
编号:XH050
规格:50T/100T
5×M-MLV Buffer、10×PCR Buffer、MgCl2(25mM)、RNase-free ddH2O在2-8℃保存一个月对实验无影响,Oligo(dT)16(10uM)、Random(N)6(10uM)、dNTPs(10mM)在2-8℃保存一周对实验无影响,为了你的实验方便和试剂的稳定性,请自行决定试剂存放温度。试剂解冻后请混匀离心后再使用。微量试剂打盖前请离心。
产品简介:
本试剂盒适用于各种 RNA制品的反转录反应以及随后的PCR扩增。它采用M-MLV进行反转录反应,能够获得较长的反转录产物。同时,在20ul反转录体系和50ul PCR反应体系中,还可以一次性得到足够量的PCR产物用于后续的克隆实验。本试剂盒使用方便、快捷,可广泛用于cDNA克隆及目的基因检测等分子生物学实验。
本产品配有两种引物,一种为Oligo(dT),另一种为随机引物(Random),如果用Oligo(dT)无法得到想要的结果,可以用随机引物(Random)试一下。
操作步骤:
一、反转录反应
1、在冰浴的无RNase的离心管(或者PCR管)中加入如下反应成分:
1-5ug总RNA或50-500ng mRNA
2ul Oligo(dT)16或2ul Random(N)6或者2 pmole基因特异性引物
补RNase-free ddH2O至13.5ul
2、70℃保温5min后迅速在冰上冷却2min,简短离心收集反应液后加入以下各组分:
4ul 5×M-MLV Buffer
1ul dNTPs
0.5ul Rnasin
1ul M-MLV
3、42℃温浴60min,如果是用随机引物,请先将离心管置25℃温浴10min,再42℃温浴60min。
4、95℃加热5min终止反应,置冰上进行后续实验或-20℃保存。
5、用RNase-free ddH2O将反应体系稀释到50ul,取2-5ul进行PCR反应。
二、PCR反应
1、按以下各组分配制50ul PCR反应体系:
10×PCR Buffer 5ul
MgCl2 4ul
dNTPs 1ul
上游引物(用户自备)
下游引物(用户自备)
RT反应产物 2ul
Taq Polymerase 0.5ul
ddH2O x ul
Total Volume 50ul
2、简短离心,上PCR仪扩增,琼脂糖观察结果。
注意事项:
1、用于cDNA合成反应的相关试剂和耗材尽可能用DEPC进行处理,并在高压灭菌后使用。有些试剂不能高压灭菌时,首先用经过灭菌的器具、水等配制溶液后,再将溶液进行过滤CJ处理。
2、试剂盒的各组分应避免反复冻融,有效期12个月。
3、RNA样品要避免反复多次冻融,应使RNA在冰浴中处于融化状态。
北京现货Pfu DNA Polymerase批发关键词:Pfu DNA Polymerase,XH022,百奥莱博
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PY02-284 EC-MUG 100g,用于生活饮用水及水源中的大肠埃希氏菌的测定(多管发酵法)
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温馨提示:不可用于临床ZL。