北京现货T4 多聚核苷酸激酶（3´磷酸酶活性缺失）厂家

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北京现货T4 多聚核苷酸激酶（3´磷酸酶活性缺失）厂家
编号：M0236L
品Pai：百奥莱博
规格：1KU|200U
产地：国产|进口
特性:
DNA 或 RNA 5´ 末端的磷酸化，以便进行连接反应。
DNA 或 RNA 的末端标记，用作探针和进行 DNA 测序
用 T4 多聚核苷酸激酶（M0201）除去 3´ 磷酸基团
T4 多聚核苷酸激酶（缺失 3´ 磷酸酶活性）（M0236）将 3´ 端已经磷酸化的单核苷酸 5´ 磷酸化，制备pNp 底物，用于添加到 DNA 或 RNA的 3´ 端
用 T4 多聚核苷酸激酶（缺失 3´ 磷酸酶活性）（M0236）对 3´ 端有磷酸基团的寡核苷酸的 5´ 端进行标记
概述:
T4 多聚核苷酸激酶能够催化 ATP 的 γ-位磷酸基团转移到寡核苷酸链（双链或单链 DNA 或 RNA）的 5´ -羟基末端以及 3´ -单磷酸核苷上。T4 多聚核苷酸激酶（M0201）还具有 3´ 磷酸酶活性，将 3´ -磷酸基团从寡核苷酸的 3´ 磷酸末端、脱氧 3´ -单磷酸核苷和脱氧 3´ -二磷酸核苷上水解掉。经修饰后的酶（M0236）具有所有激酶的活性，但是缺失了 3´ 磷酸酶活性。
来源:
重组 E. coli 菌株，克隆有 T4 多聚核苷酸激酶或修饰的 T4 多聚核苷酸激酶基因。
反应条件:
1X T4 多聚核苷酸激酶反应缓冲液
[70 mM Tris-HCl（pH 7.6 @ 25℃），10 mM MgCl2，5 mM DTT]，37℃ 温育。
热失活:65℃ 加热 20 分钟。
注意事项:
达到ZJ酶活力，需要新鲜缓冲液（在旧缓冲液中，由于氧化造成的 DTT 含量减少会降低酶活力）。
放射性标记反应:
50 μl 反应体系中，用 1X T4 多聚核苷酸激酶反应缓冲液、50 pmol 的 γ-[32P] ATP 和 20 单位的酶 37℃ 温育 30 分钟可催化 1-50 pmol 的 5´ 末端磷酸化。[33P] ATP 可代替 [32P] ATP 作标记反应。
CTP、GTP、TTP、UTP、dATP 及 dTTP 均可替代 ATP 作为磷酸供体。
DNA 或 RNA 磷酸化反应（放射性和非放射性）操作流程请联系我们咨询。
要提高平齐末端或 5´ 凹陷末端的磷酸化效率，可在加入 T4 多聚核苷酸激酶前，先将 DNA 溶液于 70℃ 加热 5 分钟，然后冰上冷却，并加入 5%（W/V）的 PEG-8,000。
T4 多聚核苷酸激酶需要 ATP 才能发挥活性，但是为了适用于高活力的放射性标记反应:，在随酶提供的反应缓冲液中不含 ATP。
一般来说，进行激酶反应之后是连接反应。在这种情况下，T4 多聚核苷酸激酶反应在连接酶反应缓冲液中 37℃ 温育 30 分钟即可。反应后的产物可直接进行连接，无需改变缓冲液和进行热失活。如果连接时需要保持其它 DNA 片段的去磷酸化状态，则需要在连接反应前热失活 T4 多聚核苷酸激酶。
质保声明:
T4 多聚核苷酸激酶和 T4 多聚核苷酸激酶（3´ 磷酸酶活性缺失）经过严格的质控检测，确保该产品具有ZG的活性和纯度。
单位定义:
1 单位即 1 个 Richardson 单位，指 37℃条件下，30 分钟内催化 1 nmol 酸不溶性 [32P] 掺入所需要的酶量（1）。
浓度:
10,000 units/ml。

北京现货T4 多聚核苷酸激酶（3´磷酸酶活性缺失）厂家极具性价比，此外，我公司正火爆促销以下产品：

·PspGI限制性内切酶
编号：R0611L
规格：5KU|1KU
在不同反应缓冲液的活性:
BalbBuffer 1.1: 25%
BalbBuffer 2.1: 100%
BalbBuffer 3.1: 50%
CutSmart Buffer: 100%
特性:
CutSmart、重组酶。
反应条件:
CutSmart 缓冲液，75℃。
浓度:
10,000units/ml。
37℃ 时活性:
10%。
甲基化敏感性:
对 dcm甲基化敏感。
注意事项:
PspGl是EcoRll的高度热稳定完全同裂酶。是 BstNl的高度热稳定不完全同裂酶。该酶在 85℃ 温育时的活性是 75℃ 温育时的 2-3 倍。95℃ 温育时 PspGl的半衰期为 2 小时。
甘油浓度＞5% 条件下可能出现星号活性。

·EcoRI 甲基转移酶
编号：M0211L
规格：50KU|10KU
概述:
EcoRI 甲基转移酶能对左侧序列中的内侧腺嘌呤残基（N6）进行甲基化修饰。
来源:
重组 E. coli 菌株，携带有从 E. coli RY 13（R.N. Yoshimori）克隆 EcoRI 修饰基因。
反应条件:
1X EcoRI 甲基转移酶缓冲液 + SAM
[50 mM NaCl，50 mM Tris-HCl（pH 8.0 @ 25℃），10 mM EDTA]。加入 80 μM SAM（随酶提供），37℃ 温育。
热失活:65℃ 加热 20 分钟。
单位定义:
1 单位指在 10 μl 反应体系中，37℃ 条件下，1 小时能保护 1 μg λDNA 不被 EcoRI 限制性内切酶切割所需要的酶量。
浓度:
40,000 units/ml。
注意事项:
MgCl2 YZ EcoRI 甲基转移酶活性。在存在 4 mM MgCl2 条件下，酶活只保留 50%。


北京现货T4 多聚核苷酸激酶（3´磷酸酶活性缺失）厂家关键词：T4 多聚核苷酸激酶,M0236L,3´磷酸酶活性缺失

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