双向电泳技术服务方案
双向电泳是目前为止最有效、使用最多的蛋白分离方法。差异蛋白质组学是在双向电泳后用考麻斯亮蓝、银离子或荧光染料等将蛋白斑点染色,然后比较差异。本公司在各类微生物、培养细胞、动植物组织(如动物软硬组织、体液、植物种子、叶子等)、亚细胞组分的双向电泳分离及后续质谱鉴定中均有丰富的经验。
一、蛋白质组学双向电泳技术服务项目:
1.根据客户需求定制蛋白质组学实验方案
2.各种规格胶条长度的双向电泳
3.考麻斯亮蓝染色、银离子染色;
4.DIGE系统双向电泳。
5.图像分析
6.切胶质谱分析
二、服务说明
1.我们的实验只对我们制作的样本负责,如您提供的是直接做等点聚焦的样本,我们不敢保证蛋白的有效分离。
2.蛋白质组学实验的总体实验流程;
四、实验设备
本公司配置了目前ZX进的双向电泳技术设备,主要包括:
- 一维等电聚焦仪:美国GE公司Ettan IPGphor 3 以及美国BIO-RAD公司IEF
2)垂直电泳系统:美国BIO-RAD公司MP4, PROTEAN II XI 2-D cell,PROTEAN DODECA以及美国GE公司Ettan six系统
3)双向电泳分析软件软件 美国GE公司ImageMaster 2D Platinum 6.0 以及美国BIO-RAD公司PDQuest 8.0
4)自动切胶系统 美国GE公司Ettan spotter Picker
5)蛋白转印系统美国bio-rad公司trans-blot
五、双向电泳服务结果提交
A:实验的试剂耗材、仪器设备、操作过程一份;
B: 实验结果凝胶扫描图片;
C:电泳凝胶(可收费干胶);
D:剩余样本。
150 mg sample, 80 kV-hr 18.3 x 19.3 cm, 5.5 hr 1,724 spots | |
100 mg sample, 50 kV-hr 13.3 x 8.7 cm, 1 hr 1,287 spots | |
60 mg sample, 20 kV-hr 8.6 x 6.8 cm, 40 min 944 spots | |
说明:
1. 样品制备指可用通常程序处理的原样,如样品较特殊(需要去除核酸、盐等杂质或需要浓缩),价格将视进一步处理的难度和耗材用量另行商定;
2. 建议客户提供的原样(组织、细胞、菌体等)湿重不少于100mg,如直接提供蛋白提取物,则浓度不少于4ug/ul,总量不少于5mg;
3. 样品的还原和烷基化过程一般在制备时进行;
4. 图象处理与切胶主要是手工操作成本。
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