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北京百奥莱博专业生产供应北京现货Hemoglobin(NO清除剂)优惠,我公司销售全品类的细胞生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
品Pai:百奥莱博
产地:国产|进口
编号:YT284
规格:1g
本Hemoglobin纯化自Bovine Erythrocytes。Hemoglobin是氧的转运体(oxygen transporter)和一氧化氮的清除剂(nitric oxide scavenger)。Hemoglobin极易和空气中的氧气结合,因此本试剂主要为氧化态的Hemoglobin。
Hemoglobin为红棕色粉末,分子量约64,500,SDS-PAGE分析纯度大于95%。
溶解于水,可以配制成20mg/ml的暗红棕色溶液。
保存条件:
-20℃保存,两年有效。
注意事项:
如果配制成水溶液,分装后-20℃保存,半年有效。
使用说明:
1. Hemoglobin储备液的配制:称取少量Hemoglobin,推荐使用Milli-Q级纯水溶解Hemoglobin,使浓度为20mg/ml。
2. Hemoglobin的工作浓度通常为10-20μM。其ZJ工作浓度需根据具体的实验,自行摸索。
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·T4 DNA连接酶
编号:YT029
英文名称:T4 DNA Ligase
规格:40,000U|200,000U
可以催化粘端或平端双链DNA或RNA的5’-P末端和3’-OH末端之间以磷酸二酯键结合,该催化反应需ATP作为辅助因子。同时T4 DNA连接酶可以修补双链DNA、双链RNA或DNA/RNA杂合物上的单链缺刻(single-strand nicks)。
用途:T4 DNA Ligase常用于DNA片段和载体、linker或adaptor等的连接。也可以用于缺刻修复及Ligase介导的RNA检测。
来源:本T4 DNA Ligase由大肠杆菌表达,表达基因的来源为T4嗜菌体。
活性定义:One unit is defined as the amount of enzyme required to give 50% ligation of HindIII fragments of lambda DNA in 30 min at 16℃ in 20 μl of the assay mixture containing 50 mM Tris, pH 7.5, 10 mM MgCl2, 10 mM DTT, 1 mM ATP, 25 μg/ml BSA and a 5"-DNA termini concentration of 0.12 μM(300 μg/ml)。200U等于1个Weiss unit,以Weiss unit计,本产品共200单位。
纯度:不含DNA内切酶、外切酶和磷酸酯酶,不含RNA酶,满足常规连接反应要求。
酶储存溶液:20 mM Tris, pH 7.5, 50 mM KCl, 1 mM DTT, 0.1 mM EDTA and 50%(v/v)glycerol。
10X Ligation Buffer:400 mM Tris, pH 7.8, 100 mM MgCl2, 100 mM DTT, 5 mM ATP。
失活或YZ:65℃孵育10分钟可以导致T4 DNA Ligase失活;NaCl或KCl浓度大于200mM时强烈YZT4 DNA Ligase。
保存条件:
-20℃保存。
注意事项:
对于普通的转化大肠杆菌的操作,不必对连接产物进行纯化,连接产物可以直接用于转化。但用电转方法转化大肠杆菌时,通常宜先用DNA纯化试剂盒或酚氯仿抽提方法等纯化DNA,然后再进行电转。
需进行平端连接或快速连接时,推荐使用我公司的快速DNA连接试剂盒(D7002/D7003)。T4 DNA Ligase可以进行平端连接,但效率较低。
普通连接反应不必进行凝胶电泳观察。如果需要对于连接产物进行凝胶电泳观察,推荐先在65℃孵育10分钟使T4 DNA Ligase失活,以避免T4 DNA Ligase和DNA结合导致的条带位置迁移(band shift)。
北京现货Hemoglobin(NO清除剂)优惠关键词:Hemoglobin,YT284,NO清除剂
·哺乳动物基因组DNA抽提试剂盒
编号:YT012
英文名称:Mammalian Genomic DNA extraction kit
规格:50次
哺乳动物基因组DNA抽提试剂盒,采用了经典的蛋白酶K处理法,可以抽提到100-150kb以上的基因组DNA。
用本试剂盒抽提到的基因组DNA适用于Southern杂交、基因组DNA的PCR扩增及基因组DNA文库的构建等。
通常使用本试剂盒,从20毫克组织可以抽提到约40微克基因组DNA,从106-107Hela细胞可以抽提到约5-50微克基因组DNA。
本试剂盒足够抽提50个常规量的样品。
保存条件:
-20℃保存,一年有效。10M醋酸铵和NucleaseFreeWater也可以室温保存。
注意事项:
需自备Tris平衡苯酚、氯仿和无水乙醇。
如果打算抽提到大片断的基因组DNA,则要尽量避免基因组DNA的物理性剪切。例如避免剧烈振荡含有基因组DNA的样品,可以用剪掉枪头尖的枪头吸取含有基因组DNA的样品。
不可过分干燥基因组DNA沉淀,否则会极难溶解。
使用说明:
1.样品收集
a)对于组织样品:
切下组织,并剪切成小块,置液氮中冻结,研碎或捣碎。
b)对于贴壁细胞:
胰酶消化后,PBS或生理盐水洗一次,1000-2000g离心1-2分钟,弃上清,收集细胞。
c)对于悬浮细胞:
1000-2000g离心1-2分钟,弃上清,收集细胞。
2.基因组DNA抽提
a)样品处理完毕后,每1毫升样品裂解液中加入5微升蛋白酶K,混匀。
b)对于上述处理好的样品,每20毫克组织或106-107个细胞中加入500微升添加了蛋白酶K的样品裂解液,颠倒混匀数次,充分裂解组织或细胞。
c)50℃水浴消化过夜。
d)加入500微升Tris平衡苯酚抽提样品。
e)吸出酚相及中间相(可以吸除少量靠近中间相的水相液体),剩余的水相用等体积Tris平衡酚再抽提一次。
f)吸出酚相及中间相(可以吸除少量靠近中间相的水相液体),剩余的水相用等体积氯仿再抽提一次。
g)吸出约300微升上清液,加入60微升10M醋酸铵和600微升无水乙醇,颠倒数次混匀,此时可见DNA沉淀产生。
h)10,000g离心1分钟,弃上清。加入70%乙醇洗涤DNA沉淀两次。
i)尽量吸除残余的乙醇,待看不到明显的液体时,立即加入50-100微升NucleaseFreeWater溶解DNA。注意:不可过分干燥基因组DNA沉淀,否则会极难溶解。如果发现DNA沉淀难以溶解,可以在4℃用摇床缓慢摇动过夜,以溶解DNA沉淀。
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温馨提示:不可用于临床ZL。