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北京百奥莱博专业生产供应T4 多聚核苷酸激酶(3´磷酸酶活性缺失)北京厂家,我公司销售全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
产地:国产|进口
编号:M0236L
规格:1KU|200U
品Pai:百奥莱博
特性:
DNA 或 RNA 5´ 末端的磷酸化,以便进行连接反应。
DNA 或 RNA 的末端标记,用作探针和进行 DNA 测序
用 T4 多聚核苷酸激酶(M0201)除去 3´ 磷酸基团
T4 多聚核苷酸激酶(缺失 3´ 磷酸酶活性)(M0236)将 3´ 端已经磷酸化的单核苷酸 5´ 磷酸化,制备pNp 底物,用于添加到 DNA 或 RNA的 3´ 端
用 T4 多聚核苷酸激酶(缺失 3´ 磷酸酶活性)(M0236)对 3´ 端有磷酸基团的寡核苷酸的 5´ 端进行标记
概述:
T4 多聚核苷酸激酶能够催化 ATP 的 γ-位磷酸基团转移到寡核苷酸链(双链或单链 DNA 或 RNA)的 5´ -羟基末端以及 3´ -单磷酸核苷上。T4 多聚核苷酸激酶(M0201)还具有 3´ 磷酸酶活性,将 3´ -磷酸基团从寡核苷酸的 3´ 磷酸末端、脱氧 3´ -单磷酸核苷和脱氧 3´ -二磷酸核苷上水解掉。经修饰后的酶(M0236)具有所有激酶的活性,但是缺失了 3´ 磷酸酶活性。
来源:
重组 E. coli 菌株,克隆有 T4 多聚核苷酸激酶或修饰的 T4 多聚核苷酸激酶基因。
反应条件:
1X T4 多聚核苷酸激酶反应缓冲液
[70 mM Tris-HCl(pH 7.6 @ 25℃),10 mM MgCl2,5 mM DTT],37℃ 温育。
热失活:65℃ 加热 20 分钟。
注意事项:
达到ZJ酶活力,需要新鲜缓冲液(在旧缓冲液中,由于氧化造成的 DTT 含量减少会降低酶活力)。
放射性标记反应:
50 μl 反应体系中,用 1X T4 多聚核苷酸激酶反应缓冲液、50 pmol 的 γ-[32P] ATP 和 20 单位的酶 37℃ 温育 30 分钟可催化 1-50 pmol 的 5´ 末端磷酸化。[33P] ATP 可代替 [32P] ATP 作标记反应。
CTP、GTP、TTP、UTP、dATP 及 dTTP 均可替代 ATP 作为磷酸供体。
DNA 或 RNA 磷酸化反应(放射性和非放射性)操作流程请联系我们咨询。
要提高平齐末端或 5´ 凹陷末端的磷酸化效率,可在加入 T4 多聚核苷酸激酶前,先将 DNA 溶液于 70℃ 加热 5 分钟,然后冰上冷却,并加入 5%(W/V)的 PEG-8,000。
T4 多聚核苷酸激酶需要 ATP 才能发挥活性,但是为了适用于高活力的放射性标记反应:,在随酶提供的反应缓冲液中不含 ATP。
一般来说,进行激酶反应之后是连接反应。在这种情况下,T4 多聚核苷酸激酶反应在连接酶反应缓冲液中 37℃ 温育 30 分钟即可。反应后的产物可直接进行连接,无需改变缓冲液和进行热失活。如果连接时需要保持其它 DNA 片段的去磷酸化状态,则需要在连接反应前热失活 T4 多聚核苷酸激酶。
质保声明:
T4 多聚核苷酸激酶和 T4 多聚核苷酸激酶(3´ 磷酸酶活性缺失)经过严格的质控检测,确保该产品具有ZG的活性和纯度。
单位定义:
1 单位即 1 个 Richardson 单位,指 37℃条件下,30 分钟内催化 1 nmol 酸不溶性 [32P] 掺入所需要的酶量(1)。
浓度:
10,000 units/ml。
欲咨询购买T4 多聚核苷酸激酶(3´磷酸酶活性缺失)北京厂家,请致电北京百奥莱博科技有限公司,为您提供最全面周到的产品服务,除此之外,我公司正在促销以下产品:
·OneTaq 热启动 2X Master Mix(提供 GC 缓冲液)
编号:M0485L
规格:500次(50μl体系)|100次(50μl体系)
概述:
OneTaq DNA聚合酶是经过优化的 Taq DNA聚合酶与 Deep VentR™ DNA聚合酶的混合物,可用于常规与复杂的 PCR 实验。Deep Vent DNA聚合酶的 3´→5´ 外切酶活性提升了 Taq DNA聚合酶的保真性和聚合能力。OneTaq 反应缓冲液与 High GC Enhancer的配方使得无论模板的 GC 含量高低,都只需最小的优化即能获得ZG的产量。
OneTaq热启动 DNA聚合酶:
OneTaq 热启动 DNA聚合酶利用核酸适配体(aptamer)作为YZ剂,不仅使用方便,而且减少了引物二聚体和其他次级产物对反应的干扰。
这种核酸适配体YZ剂能够与聚合酶发生可逆结合,当温度低于 45℃ 时YZ聚合酶活性,因而能够在室温下建立反应。在正常的热循环条件下 OneTaq 热启动 DNA聚合酶即能被激活,无需额外的高温启动步骤。因此 OneTaq 热启动 DNA聚合酶能够替换常规的或现有的基于 Taq DNA聚合酶的 PCR 反应。
与 OneTaq 热启动 DNA聚合酶一同提供的有标准反应缓冲液、GC 反应缓冲液和 High GC Enhancer。
根据模板的 GC 含量选择缓冲液的建议见下文。
其它剂型:
为了加样方便,OneTaq DNA聚合酶与 OneTaq 热启动 DNA聚合酶均有预混液剂型。预混液有标准或 GC 缓冲液可供选择,High GC Enhancer 随 GC 缓冲液一同提供。此外这些预混液还有 Quick-Load的形式,可用于直接凝胶上样。关于 OneTaq RT-PCR试剂盒或 OneTaq 一步法 RT-PCR试剂盒的详细信息见 90 页。
浓度:
5,000units/ml。
T4 多聚核苷酸激酶(3´磷酸酶活性缺失)北京厂家关键词:T4 多聚核苷酸激酶(3´磷酸酶活性缺失),M0236L,百奥莱博
·Lambda 蛋白磷酸酶(Lambda PP)
编号:P0753L
规格:100KU|20KU
概述:
Lambda 蛋白磷酸酶(Lambda PP)是一种 Mn2+依赖型蛋白磷酸酶,对磷酸化的丝氨酸、苏氨酸和酪氨酸残基均有活性。Lambda PP 也可作用于磷酸化的组氨酸残基。
来源:
重组 E. coli 菌株,携带有 Lambda 噬菌体 ORF221开放阅读框(Dr.D.Barford 惠赠)。
反应条件:
1X 蛋白金属磷酸酶(PMP)缓冲液[50 mM HEPES(pH 7.5 @ 25 ℃),100 mM NaCl,2 mMDTT 和 0.01% Brij 35]。添加 1 mM MnCl2,30℃ 温育。热失活:在 50 mM Na2EDTA 存在的条件下,65℃ 加热 1 小时。
随酶提供的试剂:
10X 蛋白金属磷酸酶(PMP)缓冲液
10X MnCl2(10 mM)
分子量:
25 kDa。
质量保证:
无蛋白酶污染。
单位定义:
1 单位指 50 μl 反应体系中,30℃ 条件下 1 分钟内水解 1 nmol 的对硝基苯酚磷酸盐(50mM,P0757)所需要的酶量。
浓度:
400,000 units/ml。
T4 多聚核苷酸激酶(3´磷酸酶活性缺失)北京厂家关键词:T4 多聚核苷酸激酶(3´磷酸酶活性缺失),M0236L,百奥莱博
·BsmAI限制性内切酶
编号:R0529L
规格:5KU|1KU|500U
在不同反应缓冲液的活性
BalbBuffer 1.1: 50%
BalbBuffer 2.1: 100%
BalbBuffer 3.1: 100%
CutSmart Buffer: 100%
特性
CutSmart、重组酶、省时酶。
反应条件
CutSmart 缓冲液,55℃。
浓度
5,000units/ml。
37℃ 时活性
50%。
甲基化敏感性
对哺乳动物基因组DNA CpG甲基化敏感。
注意事项
BsmAl是Alw26l的完全同裂酶。
在 65℃ 温育活性为 10%。
·T4 RNA 连接酶 2,截短型 K227Q
编号:M0351L
规格:10KU|2KU
特性:
将预腺苷化的 DNA 或 RNA 序列标签连接到任何 RNA 3´ 末端
将单链腺苷化引物连接至小 RNA 上,用于 cDNA 文库构建
将单链腺苷化引物连接至 RNA 上,用于链特异性 cDNA 文库构建
概述:
T4 RNA 连接酶 2,截短型 KQ(T4 Rnl2tr KQ)能特异性将 5´ 末端预腺苷化的 DNA 或 RNA 连接到 RNA 的 3´ OH 末端。反应无需 ATP,但需预腺苷化接头。
T4 Rnl2tr KQ 是 T4 RNA 连接酶 2,截短型(M0242)的双点突变体。K227 的突变降低了赖氨酰腺苷化。由于降低了 T4 Rnl2tr 从接头将腺苷基团转移到 RNA 5´ 磷酸基的活性,K227Q 可以减少 T4 Rnl2tr 非特异性的连接(串联体和环)。在 T4 Rnl2tr K227Q 中进一步突变 R55K,提高了酶的连接活性,使其与野生型 T4 Rnl2tr 连接活性水平一致。
连接反应的背景被降为ZD是因为:不再使用 ATP,而改用预腺苷化接头,同时降低赖氨酰腺苷化酶的活性。该酶已用于二代测序 small RNA 的文库构建中,优化了接头的连接过程。
来源:
重组 E. coli 菌株,携带有 MBP 融合表达的质粒,该质粒克隆有含编码 T4 RNA 连接酶 2 的前 249 个氨基酸编码。T4 Rnl2tr K227Q 将 227 位的赖氨酸突变为谷氨酸。T4 Rnl2tr KQ 分别在 55 和 227 位置进行了突变,精氨酸突变为赖氨酸、赖氨酸突变为谷氨酰胺。
反应条件:
1X T4 RNA 连接酶反应缓冲液
[50 mM Tris-HCl (pH 7.5 @ 25℃),10 mM MgCl2,1 mM DTT],25℃ 温育。
热失活:65℃ 20 分钟。
随酶提供的试剂:
10X T4 RNA 连接酶反应缓冲液
50% PEG 8000
质保声明:
无单链和双链 DNA 核酸外切酶、核酸内切酶、RNase 以及磷酸酶的污染。
单位定义:
200 单位指 10 μl 反应体系中,25℃ 条件下,1 小时能将 80% 的 31-mer RNA 连接到预腺苷化 17-mer DNA 末端 [miRNA 通用克隆接头(S1315)] 所需的酶量。单位活性检测条件请联系我们咨询。
浓度:
200,000 units/ml。
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温馨提示:不可用于临床ZL。