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品Pai:百奥莱博
英文名:EMSA Probe Biotin Labeling Kit
编号:YT189
规格:20次
产地:国产|进口
EMSA探针生物素标记试剂盒是一种通过Terminal Deoxynucleotidyl Transferase(TdT)把生物素标记的dUTP添加到单链DNA 3"末端,然后通过退火产生生物素标记的EMSA探针的试剂盒。通常DNA的3"末端被标记后不会干扰基于序列特异性蛋白结合的EMSA检测。
Terminal Deoxynucleotidyl Transferase(TdT)可以在不依赖于模板的情况下催化在DNA的3"-OH端加上dNTP的反应。关于TdT催化双链DNA末端加dNTP的反应效率,3"端突出的双链DNA要比平端或3"端缩进的双链DNA高很多。TdT催化单链DNA末端加dNTP的反应效率要比双链DNA高很多。在适当的条件下,TdT也可以催化RNA 3"末端加NTP的反应。
本试剂盒适合标记纯化的单链DNA,如果用于标记EMSA探针,可以在单链标记后再进行退火。
本试剂盒中提供了已经用生物素标记好的Biotin-Control Oligo,可以用作检测DNA标记效率的对照。
如果每个标记反应的探针量为5pmol,本试剂盒可以用于20个标记反应。
保存条件:
-20℃保存。
注意事项:
需自备用于检测探针标记效率的带正电荷尼龙膜,以及用于生物素检测的相关试剂。
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·EMSA突变探针-CREB(10μM)
编号:YT222
规格:30μl
EMSA突变探针-CREB是用于EMSA(也称gel shift)研究的CREB consensus oligonucleotide的突变体。可以作为EMSA探针-CREB的阴性对照,用于EMSA结合反应中突变探针的冷竞争反应等。
EMSA突变探针-CREB的序列如下:
5"-AGA GAT TGC CTG TGG TCA GAG AGC TAG-3"
3"-TCT CTA ACG GAC ACC AGT CTC TCG ATC-5"
EMSA突变探针-CREB中CREB的公认的结合位点发生了突变,从而使CREB无法和该突变探针结合。在探针冷竞争反应中,正常的标记探针和CREB的结合的条带会被YZ;而在突变探针冷竞争反应(cold competition)中,正常的标记探针和CREB的结合的条带不会被YZ。
1,阴性对照反应(标记探针);2,常规反应(含激活的目的转录因子的核蛋白+标记探针);3,探针冷竞争反应(含激活的目的转录因子的核蛋白+标记探针+标记探针100倍量的未标记探针);4,突变探针的冷竞争反应(含激活的目的转录因子的核蛋白+标记探针+标记探针100倍量的未标记突变探针);5,Super-shift反应(含激活的目的转录因子的核蛋白+标记探针+目的转录因子的特异抗体)。
一个包装的突变探针,如果用于同位素标记EMSA探针的突变探针冷竞争反应,可以进行90-180个突变探针的冷竞争反应。如果用于生物素标记探针的冷竞争时,可以进行约30个冷竞争反应
保存条件:
-20℃保存,一年有效。
注意事项:
避免加热到40℃以上,温度过高会导致双链DNA探针解聚成单链。而单链无法用于EMSA研究。
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·Wortmannin(PI3KYZ剂)
编号:YT356
规格:0.5mg
Wortmannin是一种常用的phosphatidylinositol 3-kinase(PI3K)YZ剂。Wortmannin可以通透细胞,和PI3K的110kD催化亚基相结合,特异性YZPI3K,YZPI3K/Akt信号途径,包括常见的YZAkt磷酸化等。同时Wortmannin也可以YZmyosin light chain kinase等。Wortmannin无明显的抗细菌作用,但具有很强的YZ真菌活性。Wortmannin对于纯化的PI3K的IC50为2-4nM。
Wortmannin分子量为428.43,分子式为C23H24O8,CAS Number:19545-26-7。本产品纯度大于98%。
本Wortmannin为进口分装,用DMSO配制,浓度为20mg/ml,共25μl。
保存条件:
-20℃避光保存,半年有效。
注意事项:
Wortmannin对人体有很强的毒害作用,请注意小心防护。
本Wortmannin在4℃、冰浴等较低温度情况下会凝固而粘在离心管管底、管壁或管盖内,可以20-25℃水浴温育片刻至全部融解后使用。
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75-12-7 去离子甲酰胺 Formamide,Deionized
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108321-42-2 G-418 遗传霉素
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氨三乙酸 Aspartic aminotransferase 139-13-9
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温馨提示:不可用于临床ZL。