提供商:
上海麒盟生物科技有限公司
服务名称:
细胞毒性检测
规格:
T
1. 技术原理细胞毒性(cytotoxic)是由细胞或化学物质引起的单纯细胞杀伤事件,不依赖于凋亡或坏死的细胞死亡机理。有时需要进行特定物质细胞毒性的检测,比如药物筛选。根据其检测的原理,可以分为三种检测方法:1)MTT或者CCK-8法。原理是正常细胞代谢旺盛,粒体内的琥珀酸脱氢酶,可将四唑盐类物质(如 MTT、XTT、WST-1等 )还原为紫色的结晶状的物质,沉积在细胞周围,然后通过酶标仪读取OD值,从而检测到细胞增值状态。目前CCK-8法因为更为快捷和准确,应用最为广泛。它是利用WST-8在电子耦合试剂存在的情况下被线粒体内的脱氢酶还原成高度水溶性的黄色甲臜产物。颜色的深浅与细胞的增殖成正比,与细胞毒性成反比。使用酶标仪在450nm波长处测定OD值,间接反映活细胞数量。2)LDH法:通过检测细胞培养上清中LDH的酶活性,来检测细胞毒性。3)荧光法:基于蓝色、非荧光性染料刃天青, 接受了来自活细胞线粒体呼吸链中释放的电子时,被还原成粉红色荧光染料(试卤灵);通过对其颜色、荧光的变化的观察来实现检测。产物试卤灵的总量与活细胞 数量成直接比例关系。荧光法比用其他检测法(例如,MTT)具有更高的灵敏度,非常适合于低细胞毒性分析,并且能进行长时间保温(例如24~48小时)。它适合于增殖型和非增殖型细胞,也可用于悬浮和贴壁细胞。2. 技术应用细胞毒性检测,适合于高通量药物筛选,应用于细胞增殖测定、细胞毒性测定、肿瘤药敏试验以及生物因子的活性检测等。3. 服务流程1)
客户与麒盟生物沟通确定所需要进行实验的细胞类型,并提供药物样品。2)麒盟生物根据客户需求选择检测方法,并进行细胞增殖和毒性实验。3)麒盟生物提供实验结果和报告,包括数据分析。CCK-8法检测结果示例1)
2)
CKK-8检测HO-8910PM细胞增殖YZ结构统计图