佰柯生物科技有限公司是一家专业从事重组蛋白等生物产品的研发和生产的高科技生物公司。
公司主要业务是利用基因工程技术和蛋白质工程技术生产具有生物活性的功能蛋白和小分子肽类,并在此基础上开发YL、畜牧业、化妆品相关的产品。佰柯生物拥有自己独立的研发团队和来自世界顶端科研单位各个领域学术顾问团队,研究领域包括生物化学,分子生物学,基因工程药物,临床医学等多个方向。
公司产品范围涉及广泛,包括:重组蛋白(生长因子、小分子多肽等),多克隆及单克隆抗体系列产品,蛋白质生物化学研究和基因学研究相关分子生物学产品,病毒载体以及ELISA试剂盒和食品安全检测试剂盒等,同时也代理多家国外公司产品在ZG的销售。公司产品质量优异,价格优于同类产品,且应用领域广泛,相信不远的将来,佰柯会被世人所瞩目。
公司官网:
www.backerbiotech.cnRecombinant TEV Protease
英文全称:Recombinant Tobacco Etch Virus Protease (rTEV)
产品内容
产品名称 | 产品编号 | 分子量 | 产品纯度 | 酶活 | 储存条件 |
rTEV | BBR0008 | 28 kDa | > 95% | 50 U/µl | -20℃ |
产品概述
rTEV Protease(重组TEV蛋白酶)来源于烟草蚀纹病毒(TEV)中的Nla,经基因工程改造后,在大肠杆菌中重组表达后纯化获得,分子量为28 kDa。TEV蛋白酶特异性识别E-Xaa-Xaa-Y-Xaa-Q-(G/S)的七氨基酸序列,最普通的是E-N-L-Y-F-Q-G(Glu-Asn-Leu-Tyr-Phe-Gln-Gly),其酶切位点在Q和G或者Q和S之间的肽键。该酶在pH 5.5-8.5和4-30℃的广泛范围内均具有活性。rTEV蛋白酶因具高剪切活性和特异性,已成为融合蛋白表达后去除融合标签的蛋白酶。该酶带His标签,剪切反应完毕后可通过His标签纯化树脂(Ni-NTA Resin)去除。
活性定义
1单位(U)rTEV Protease活性定义为在酶切反应缓冲液中,30℃,pH 8.0条件下反应1小时,将3 μg融合蛋白酶切85%以上所需要的酶量。
使用建议
使用前可通过10 μg~20 μg蛋白样品预酶切以确定ZJ反应条件及酶用量,对于不易酶切的蛋白,可通过增加酶量及延长反应时间的方法获得所需的酶切结果。
产品溶液组分
TEV Protease储存液 | 10×TEV Cleavage Buffer |
50 mM Tris-HCl, pH 8.0 | 500 mM Tris-HCl, pH 8.0 |
50 mM NaCl | 5mM EDTA |
5 mM TCEP | 10 mM DTT |
50%(V / V)Glycerol | |
推荐反应体系
反应物组成 | 反应体系 |
融合蛋白 | 100 µg |
TEV Protease | 0.4 µl |
10×TEV Buffer | 10 µl |
ddH2O | 补至100 µl |
推荐反应条件
4℃反应过夜(12~16小时)。
活性测试
待测融合蛋白200 µg,加入TEV protease 1 µl,4℃反应16小时,取酶切前后样品SDS-PAGE检测。如右图所示>85% 融合蛋白被切割(1泳道为酶切后EGF蛋白,2泳道为酶切前EGF原蛋白)。
储存条件
长期储存于-80℃,可保存2年;或小量分装后保存于-20℃,可保存6个月,避免反复冻融。10×TEV Buffer 置于-20℃保存。
温馨提示:不可用于临床ZL。
资料下载:
TEV.pdf
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