高 GC DNA 清除剂PCR 级1.5mL使用说明书注意事项:
1.从少量样品(1-10mg组织或102-104细胞)中提取RNA时可加入少许糖原以促进RNA沉淀。例如加800ml TRIzol匀浆样品,沉淀RNA前加5-10μg RNase-free糖原。糖原会与RNA一同沉淀出来,糖原浓度不高于4mg/ml是不影响一链的合成,也不影响PCR反应。
2.匀浆后加之前样品可以在-60至-70℃保存至少一个月。RNA沉淀可以保存于75% 酒精中2-8℃一星期以上或-5至-20℃一年以上。
3.分层和RNA沉淀时也可使用台式离心机,2600×g离心30-60分钟。
高 GC DNA 清除剂PCR 级1.5mL使用说明书操作说明:
1.将待测种子用温水(30-35℃)浸泡2~6h,使种子充分吸胀。
2.随机取种子100粒,沿种胚ZX线纵切为两半,将每粒种子的一半分别置于两个培养皿中,备用。
3.(可选)可将其中一半种子置于沸水中煮沸5min,杀死细胞,作为阴性对照。
4.向含有种子的培养皿中加入TTC溶液,以浸没种子为度。
5.放入30-35℃的恒温箱内保温30min-1h。
6.倒出TTC染色液,用自来水冲洗2~3次,立即观察种子着染况。
高 GC DNA 清除剂PCR 级1.5mL使用说明书主要优级纯、分级纯和化学纯3种:
(1)优级纯(GR:Guaranteed reagent),又称一级品或保证试剂,99.8%,这种试剂纯度Z高,杂质含量Z低,适合于重要精密的分析工作和科学研究工作,使用绿色瓶签。
(2)分析纯(AR),又称二级试剂,纯度很高,99.7%,略次于优级纯,适合于重要分析及一般研究工作,使用红色瓶签。
(3)化学纯(CP),又称三级试剂,≥ 99.5%,纯度与分析纯相差较大,适用于工矿、学校一般分析工作。使用蓝色(深蓝色)标签。
(4)实验试剂(LR:Laboratory reagent),又称四级试剂。
间二甲苯-4-磺酸水合物 2,4-Dimethylbenzenesulfonic acid
木素(脱碱) LIGNINE
降冰片烯 NORBORNENE
降钙素基因(-20℃) ALA-CYS-ASP-THR-ALA-THR-CYS-VAL-THR-HIS-ARG-LEU-ALA-GLY-LEU-LEU-SER-ARG-SER-GLY-GLY-VAL-VAL-LYS-ASN-ASN-PHE-VAL-PRO-THR-ASN-VAL-GLY-SER-LYS-ALA-PHE-NH2
焦磷酸钠 ≥95% Tetrasodium pyrophosphate
焦磷酸铁 Ferric pyrophosphate
角叉胶 CARRAGEENAN
腈化钛 TITANIUM CARBONITRIDE
肼一氢溴酸 HYDRAZINE MONOHYDROBROMIDE
酒石酸美托洛尔 Metoprolol Tartrate
酒石酸氧锑钾 ≥99% Potassium antimonyl tartrate sesquihydrate
菊糖酶(2-8℃) EC 3.2.1.7
橘霉素(4℃) CITRININ
聚(2-丙烯酰胺-2-甲基-1-丙磺酸) POLY(2-ACRYLAMIDO-2-METHYL-1-PROPANESULFonIC ACID)
聚(2-羟乙基甲基丙烯酸甲酯) POLY(2-HYDROXYETHYL METHACRYLATE)
聚(3,4-亚乙二氧基噻吩)-聚(苯乙烯磺酸) Poly(3,4-ethylenedioxythiophene)-poly(styrenesulfonate)
聚(4-乙烯基苯酚) POLY(4-VINYLPHENOL)
聚(4-乙烯吡啶) POLY(4-VINYLPYRIDINE)
聚(苯基异氰酸酯)-联-甲醛 Polymethylene polyphenyl polyisocyanate
聚(对苯乙烯磺酸钠) Poly(sodium-p-styrenesulfonate)
聚(二甲基硅氧烷),双(3-氨基丙基)封端 AMINOPROPYL TERMINATED POLYDIMETHYLSILOXANE
聚(二甲基硅氧烷)二缩水甘油醚 POLY(DIMETHYLSILOXANE), DIGLYCIDYL ETHER TERMINATED
聚(谷氨酸,酪氨酸)钠盐(-20℃) POLY(GLU, TYR) SODIUM SALT
2-甲基-2-丙烯酸丁酯与2-甲基-2-丙烯酸甲酯的聚合物 POLY(METHYL METHACRYLATE-CO-BUTYL METHACRYLATE)
聚(甲基丙烯酸丁酯-合-甲基丙烯酸异丁酯)
48T
C/EBP Alpha(Human CCAAT/enhancer binding protein alpha) ELISA Kit 人CCAAT增强子结合蛋白α 48T
2,3-DPG(Human 2,3-Disphosphoglycerate,2) ELISA Kit 人2,3-二磷酸甘油酸 48T
LUM(Human lumican) ELISA Kit 人基膜聚糖/内腔蛋白 48T
NHE3(Human Na+/H+ exchanger 3) ELISA Kit 人Na+/H+交换体3 48T
OFQ/N(Human orphanin FQ/nociceptin) ELISA Kit 人孤腓肽 48T
ST1(Human Stromelysin-1) ELISA Kit 人基质裂解素 48T
ST2(Human Stromelysin-2) ELISA Kit 人基质裂解素 48T
ST3(Human Stromelysin-3) ELISA Kit 人基质裂解素 48T
高 GC DNA 清除剂PCR 级1.5mL使用说明书LXA4(Human Lipoxin A4) ELISA Kit 人脂氧素A4 48T
PR3-ANCA(Human proteinase-antineutrophil cytoplasmic antibody) ELISA Kit 人蛋白酶3特异性抗中性粒细胞胞质抗体 48T
Beta-LPH(Human Beta-lipotropic hormone) ELISA Kit 人β-促脂素 48T
LTA(Human lipoteichoic acids) ELISA Kit 人脂磷壁酸 48T
AD(Human amiodarone) ELISA Kit 人乙胺碘呋酮 48T
SA(Human Sialic acid) ELISA Kit 人唾液酸 48T
SM(Human sphingomyelin) ELISA Kit 人鞘磷脂 48T
UFC(Human urinary free cortisol) ELISA Kit 人尿游离皮质醇 48T
ASCA(Human Anti-Saccharomyces cerevisiae antibody) ELISA Kit 人抗酿酒酵母抗体 48T
VLA4(Human very late appearing antigen 4) ELISA Kit 人迟现抗原4 48T
AO(Human Acrine Orange) ELISA Kit 人吖啶橙
高 GC DNA 清除剂PCR 级1.5mL使用说明书(1)实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可!固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5):异戊醇(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的:异戊醇(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::异戊醇(25:24:1)抽提两次,:异戊醇(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量
(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)