免疫蛋白清除剂20 次使用说明书注意事项：
1.从少量样品（1-10mg组织或102-104细胞）中提取RNA时可加入少许糖原以促进RNA沉淀。例如加800ml TRIzol匀浆样品，沉淀RNA前加5-10μg RNase-free糖原。糖原会与RNA一同沉淀出来，糖原浓度不高于4mg/ml是不影响一链的合成，也不影响PCR反应。
2．匀浆后加之前样品可以在-60至-70℃保存至少一个月。RNA沉淀可以保存于75% 酒精中2-8℃一星期以上或-5至-20℃一年以上。
3．分层和RNA沉淀时也可使用台式离心机，2600×g离心30-60分钟。
免疫蛋白清除剂20 次使用说明书操作说明：
1.将待测种子用温水(30-35℃)浸泡2～6h，使种子充分吸胀。
2.随机取种子100粒，沿种胚ZX线纵切为两半，将每粒种子的一半分别置于两个培养皿中，备用。
3.（可选）可将其中一半种子置于沸水中煮沸5min，杀死细胞，作为阴性对照。
4.向含有种子的培养皿中加入TTC溶液，以浸没种子为度。
5.放入30-35℃的恒温箱内保温30min-1h。
6.倒出TTC染色液，用自来水冲洗2～3次，立即观察种子着染况。
免疫蛋白清除剂20 次使用说明书主要优级纯、分级纯和化学纯3种：
（1）优级纯（GR：Guaranteed reagent），又称一级品或保证试剂，99.8%，这种试剂纯度Z高，杂质含量Z低，适合于重要精密的分析工作和科学研究工作，使用绿色瓶签。
（2）分析纯（AR），又称二级试剂，纯度很高，99.7%，略次于优级纯，适合于重要分析及一般研究工作，使用红色瓶签。
（3）化学纯（CP），又称三级试剂，≥ 99.5%，纯度与分析纯相差较大，适用于工矿、学校一般分析工作。使用蓝色（深蓝色）标签。
（4）实验试剂（LR：Laboratory reagent），又称四级试剂。
重组人 CREB3L1 / OASIS 蛋白 (aa 396-519, His 标签) Recombinant Arginase (ARG)
重组人 R-Spondin 1 / RSPO1 蛋白 Recombinant colony Stimulating Factor 1, Macrophage (MCSF)
重组人 DDR2 Kinase / CD167b 蛋白 (His 标签) Recombinant Macrophage Derived Chemokine (MDC)
重组人 NCF-2 / NCF2 / P67phox 蛋白 (His & GST 标签) Recombinant Macrophage Inflammatory Protein 1 Beta (MIP1b)
重组人 Biotinidase / Biotinase / BTD 蛋白 (His 标签) Recombinant Macrophage Inflammatory Protein 3 Alpha (MIP3a)
重组人 GMPR / GMPR1 蛋白 (His 标签) Recombinant Macrophage Migration Inhibitory Factor (MIF)
重组人 NAPG / Gamma SNAP 蛋白 (His 标签) Recombinant Acid Phosphatase 5, Tartrate Resistant (ACP5)
重组人 CSEN / Calsenilin / KCNIP3 蛋白 (His 标签) Recombinant Anti-Mullerian Hormone (AMH)
重组人 PSME3 / PA28-gamma 蛋白 (His 标签) Recombinant Target Of The Antiproliferative Antibody 1 (TAPA1)
重组人 COMMD8 蛋白 (His 标签) Recombinant Proliferating Cell Nuclear Antigen (PCNA)
重组人 PA28A / PSME1 蛋白 (His 标签) Recombinant Granzyme A (GZMA)
重组人 Phosphomannomutase 2 / PMM2 / CDG1 蛋白 (His 标签) Recombinant Granzyme B (GZMB)
重组人 PSME2 / PA28b 蛋白 (His 标签) Recombinant Granzyme H (GZMH)
重组人 ATP5D 蛋白 (His 标签) Recombinant Granzyme K (GZMK)
重组人 EF1B / EEF1B2 蛋白 (His 标签) Recombinant Clara Cell Protein 16 (CC16)
重组人 CFL1 / N-cofilin 蛋白 (His 标签) Recombinant NADH Dehydrogenase, Quinone 1 (NQO1)
重组人 ECSIT 蛋白 (His 标签) Recombinant Tyrosinase (TYR)
Cy3标记的兔抗豚鼠IgM
Rabbit Anti-Guinea pig IgM/RBITC 罗丹明标记的兔抗豚鼠IgM
Rabbit Anti-Guinea pig IgM/FITC FITC标记的兔抗豚鼠IgM
Rabbit Anti-horse IgG/FITC FITC标记的兔抗马IgG
Rabbit Anti-horse IgG/Gold 胶体金标记的兔抗马IgG
Rabbit Anti-horse IgG/RBITC 罗丹明标记的兔抗马IgG
Rabbit Anti-horse IgG/Cy3 Cy3标记的兔抗马IgG
免疫蛋白清除剂20 次使用说明书Rabbit Anti-horse IgG/Cy5 Cy5标记的兔抗马IgG
Rabbit Anti-horse IgG/Cy5.5 Cy5.5标记的兔抗马IgG
Rabbit Anti-horse IgG/Cy7 Cy7标记的兔抗马IgG
Rabbit Anti-horse IgG/PE PE标记的兔抗马IgG
Rabbit Anti-horse IgG/PE-Cy3 PE-Cy3标记的兔抗马IgG
Rabbit Anti-horse IgG/PE-CY5 PE-CY5标记的兔抗马IgG
Rabbit Anti-horse IgG/APC APC标记的兔抗马IgG
Rabbit Anti-horse IgG/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350标记的兔抗马IgG
Rabbit Anti-horse IgG/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488标记的兔抗马IgG
Rabbit Anti-horse IgG/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555标记的兔抗马IgG
Rabbit Anti-horse IgG/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647标记的兔抗马IgG
Rabbit Anti-horse IgG/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5标记的兔抗马IgG
Rabbit Anti-horse IgG/PE-Cy7 PE-Cy7标记的兔抗马IgG
Rabbit Anti-horse IgG/AP 碱性磷酸酶（AP）标记的兔抗马IgG
Rabbit Anti-horse IgG/HRP 辣根过氧化物酶标记的兔抗马IgG
Rabbit Anti-horse IgG/Bio 生物素标记的兔抗马IgG
Rabbit Anti-human IgG/Bio 生物素标记的兔抗人IgG
Rabbit Anti-human IgG/AP 碱性磷酸酶（AP）标记的兔抗人IgG
免疫蛋白清除剂20 次使用说明书
(1)实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可！固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5):异戊醇(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的:异戊醇(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::异戊醇(25:24:1)抽提两次,:异戊醇(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量
(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
沪公网安备 31011502008050号
