供应商:
钰博生物
数量:
1000
保质期:
6个月
保存条件:
密封干燥保存
- 总蛋白抽提试剂盒产品简介:
1. 我们生产的总蛋白抽提试剂是一种传统的细胞组织快速裂解液。蛋白裂解液裂解得到的蛋白样品
可以用于常规的Western、IP等。
2. 总蛋白裂解液的主要成分为SDS、NP-40 、sodium deoxycholate 及aprotinin等多种蛋白酶YZ剂,
可以有效YZ蛋白降解。
3. 用总蛋白裂解液裂解得到的蛋白样品,可以用我们生产的BCA蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度。由
于含有较高浓度的去垢剂,不能用Bradford法测定由本裂解液裂解得到样品的蛋白浓度。 - 总蛋白抽提试剂盒使用方法:
对于培养细胞样品:
1. 取适当量的总蛋白裂解液混匀,在使用前数分钟内,按照 100:1 的比例加入磷酸酶YZ剂、蛋白
酶YZ剂和 PMSF 三联装。
2. 对于贴壁细胞,去除培养液用 PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍,加入适量裂解液,用枪吹打
数下,使裂解液和细胞充分接触,轻轻的摇晃约 5-10 分钟,充分裂解后,10000-14000g 离心 10 分钟,
取上清,即可进行后续操作。
裂解液用量说明: 用于不同规格标准培养板裂解液容量
板规格/表面积 试剂容量
100mm 500-1000μι
60mm 250-500μι
6-well plate 200-400μιper well
24-well plate 100-200μιper well
96-well plate 50-100μιper well
3. 对于悬浮细胞,离心收集细胞,用 PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍,加入适量裂解液,用枪
吹打把细胞吹散,用手指轻弹或旋涡震荡 5-10 分钟以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞
沉淀。如果细胞量较多,必需分装然后再裂解,充分裂解后,10000-14000g 离心 10 分钟,取上清,
即可进行后续操作。
对于组织样品:
1.手术切除的组织块迅速置于预冷的生理盐水中,漂洗数次,以清洁表面的血迹,将组织称量后切成
几个较小的组织块放入组织匀浆器中。
2. 取适当量的总蛋白裂解液混匀,在使用前数分钟内,按照 100:1 的比例加入磷酸酶YZ剂、蛋白酶
YZ剂和 PMSF 三联装。
3. 按组织净重(g):裂解液(ml)=1:10 的比例,加入相应体积的裂解液进行匀浆(如果裂解不充分可
以适当添加更多的裂解液 如果需要高浓度的蛋白样品 可以适当减少裂解液的用量) 。
4. 用匀浆器匀浆,直至充分裂解。
5. 充分裂解后,10000-14000g 离心 3- 5 分钟,取上清,即可进行后续作。
注:总蛋白裂解液的裂解产物中经常会出现一小团透明胶状物,属正常现象。该透明胶状物为含有基
因组 DNA 等的复合物。在不检测和基因组 DNA 结合特别紧密的蛋白的情况下,可以直接离心取上
清用于后续实验;如果需要检测和基因组结合特别紧密的蛋白,则可以通过超声处理打碎打散该透明
胶状物,随后离心取上清用于后续实验。如果检测一些常见的转录因子,例如 NF-kappaB、p53 等时,
通常不必进行超声处理,就可以检测到这些转录因子。
总蛋白抽提试剂盒注意事项:
1. 抽提蛋白的所有步骤都需在冰上或 4℃进行,建议将样品分装成合适的量,然后冷冻干燥或直接
以液体状态置-80℃中保存,不要反复冻融。
2. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。 - 总蛋白抽提试剂盒yb-11224R phospho-ATRIP (Ser68+Ser72)磷酸化系统性红斑狼疮先关蛋白TREX1抗体 浓度1mg/ml
yb-11225R Phospho-ATRIP (Ser224)磷酸化系统性红斑狼疮相关蛋白TREX1抗体 浓度1mg/ml
yb-11241R AP2M1接头相关蛋白复合体AP-2μ链1抗体 浓度1mg/ml
yb-11242R Phospho-AP2M1 (Thr156)磷酸化接头相关蛋白复合体AP-2μ链1抗体 浓度1mg/ml
yb-4901R Annexin A7膜粘连蛋白7抗体 浓度1mg/ml
yb-9823R C3orf153号染色体开放阅读框15抗体 浓度1mg/ml
yb-6336R APOB48R载脂蛋白B受体抗体 浓度1mg/ml
yb-6332R ABCA2三磷酸腺苷结合盒转运蛋白2抗体 浓度1mg/ml
yb-6333R ApoB 载脂蛋白B抗体 浓度1mg/ml
yb-6335R ALOX15B花生四烯酸15脂氧合酶2抗体 浓度1mg/ml
yb-6338R APOC4载脂蛋白C4抗体 浓度1mg/ml
yb-6337R ARH低密度脂蛋白受体衔接蛋白抗体 浓度1mg/ml
yb-7550R AUP1原始广泛存在蛋白1抗体 浓度1mg/ml
yb-9398R ANKRD37锚蛋白重复结构域蛋白37抗体 浓度1mg/ml
yb-7588R A4GALTα1,4-半乳糖基转移酶1 浓度1mg/ml
yb-7642R AGTRAP血管紧张素Ⅱ受体相关蛋白抗体 浓度1mg/ml
yb-7669R AX2R膜粘连蛋白2受体抗体 浓度1mg/ml
yb-0203R ACEI血管紧张素1转换酶YZ剂抗体 浓度1mg/ml
yb-1229R AATF拮抗凋亡转录因子抗体 浓度1mg/ml
yb-0094R AACT-Alpha1α-1抗胰糜蛋白酶抗体 浓度1mg/ml
yb-0096R alpha 1 Antitrypsinα-1抗胰蛋白酶抗体 浓度1mg/ml
yb-1224R ABCB6ATP结合蛋白家族6抗体 浓度1mg/ml
yb-1231R ABCG1三磷酸腺苷结合盒亚家族G1抗体 浓度1mg/ml
yb-0611R Adiponectin receptor 2脂联素受体2抗体 浓度1mg/ml
yb-9741R ANGEL1ANGEL1蛋白抗体 浓度1mg/ml
yb-9742R ANGEL2ANGEL2蛋白抗体 浓度1mg/ml
yb-9743R ANKLE2ANKLE2蛋白抗体 浓度1mg/ml
yb-9744R ANKMY1睾丸特异性锚样蛋白1抗体 浓度1mg/ml
yb-9745R ANKRD13B锚蛋白重复结构域蛋白13B抗体 浓度1mg/ml
温馨提示:不可用于临床ZL。