ChiP 染色质免疫共沉淀

ChIP 实验方案
实验步骤：
1.细胞蛋白与染色质交联：用37%的多聚甲醛处理细胞，并加入SDS Lysis Buffer
2.超声处理裂解DNA：为了将DNA超声为200-1000bp的小片段，此处需多次尝试，直到找到ZJ的超声处理条件。
3.免疫共沉淀蛋白质/DNA：加入目的蛋白的抗体与靶蛋白-DNA复合物相互结合。
4.沉淀：加入ProteinA 结合抗体-靶蛋白-DNA复合物使之沉淀。
5.清洗沉淀复合物：去除非特异性结合。
6.洗脱：得到富集的靶蛋白-DNA复合物
7.解交联：纯化富集的目的DNA片段
8.普通PCR (提供凝胶图片，并提供凝胶光密度分析软件IOD分析结果)
9.荧光定量PCR分析.(提供要检测的目的基因的荧光定量原始文件和实验分析柱形图。并附带实验结果说明) 
 
实验周期：实验耗时长短：30个工作日.
 
实验设计：
 
阳性对照（系统阳性对照，Anti-RNA Polymerase II）
Input对照（DNA片段在沉淀以前，收集下来的对照）    
阴性对照（非免疫IgG血清吸附，Normal Mouse IgG）
实验组1（加入XX抗体交联）
 
客户提供：
1.客户只提供活的细胞样本（细胞数量分装为10份，每份大于1X10⁷）
2.细胞物种信息：
3.CHIP抗体及信息：
4.检测基因名称 ：
 
5.细胞样本运输：干冰运输   
 
 
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