人恶性黑色素瘤细胞；A-375 A375说明书

人恶性黑色素瘤细胞；A-375 [A375]说明书美国菌种保藏ZX， 又称美国模式菌种收集ZX(ATCC)，是位于马里兰洲洛克菲勒的一家私营的，非赢利性组织。目前它可以提供各种动植物细胞、标准品、菌株达两万多种。ATCC成立于1925年，是世界上zui大的生物资源ZX，由美国14家生化、医学类行业协会组成的理事会负责管理，是一家性、非盈利生物标准品资源ZX。ATCC向发布其获取、鉴定、保存及开发的生物标准品，推动科学研究的验证、应用及进步 ATCC可以提供以下类别生物标准品：细胞株（3000多种）；菌株（15000多种）；动植物病毒株（2500多种）以及重组物质等。
细胞名称  人恶性黑色素瘤细胞；A-375 [A375]说明书
形态特性  上皮细胞 　
生长特性  　贴壁生长
特征特性   A375源自一位54岁女性，是D.J.Giard等人建立的一系列细胞株中的一株。 它在抗胸腺细胞球蛋白、血清处理的NIH 瑞士小鼠中形成类似于恶性黑素瘤的快速增长的皮下肿瘤，在普通成纤维细胞和琼脂上形成克隆。
培养条件  DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 优质胎牛血清，10%　
传代方法   消化3-5分钟。1:2。3天内可长满。
传代情况  P(166+5)
冻存条件  完全培养基+8%DMSO　
支原体检测  　阴性
STR   Amelogenin:X；CSF1PO:11,12；D13S317:11,14；D16S539:9；D18S51:12,17；D19S433:13,14.2；D21S11:29,30；D2S1338:16,24；D3S1358:15,17；D5S818:12；D7S820:9；D8S1179:11,14；FGA:23；TH01:8；TPOX:8,10；vWA:16,17
同工酶

染色体

使用权限 A类
人恶性黑色素瘤细胞；A-375 [A375]说明书操作流程：
1.1 主要试剂与仪器：倒置相差显微镜（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293细胞的复苏培养传代及冻存：
1.2.1 细胞的复苏培养 从液氮罐中取出冻存管,立即投入37℃水浴,并不断的摇动,使之迅速融化。 将溶解的细胞冻存管取出,用酒精消毒后打开,吸出溶有细胞的冻存液,加入事先装好培养液（37℃预热，8～10倍体积）离心管内,稍微吹打混匀,然后1000rpm 5min,去除上清,加入适量培养液,吹打成细胞悬液, 以1×105/ml密度接种于25cm2培养瓶内，在37℃、5％co2及饱和湿度下培养。
1.2.2 细胞传代 原代培养的hek－293细胞48h换液1次，细胞长至60%～70%融合时，用0.25%胰酶消化1～2min，将培养瓶再用手掌轻轻敲打使细胞脱壁、悬浮、分散，为使细胞进一步分散可用吹打管轻轻吹打几次，获得细胞悬液，然后加入倍量的培养基，温和混匀，吸管分装混合液，传代扩增细胞。
1.3 细胞形态的观察 在倒置显微镜下观察并记录细胞的生长情况及形态特征。
1.4 细胞的计数 常规消化细胞，待细胞变圆、脱壁并浮起，加入少量培养基离心，再用pbs重悬并吹打制成细胞悬液。在细胞计数板盖玻片的一侧加微量细胞悬液，用10×物镜观察计数板四角大方格细胞数，按公式计算出细胞数。细胞数/ml原液＝(四方格细胞数之和/4) ×104。
1.5 细胞的贴壁率 指数生长期的细胞，以0.25％胰酶消化成单细胞悬液，计数后分别接种于12个25cm2培养瓶中，每两小时随机取出3瓶细胞，吸除培养基及未贴壁细胞，加入胰消化酶消化、计数已贴壁细胞，取其平均值，按照公式：贴壁率(%)=(已贴壁细胞数/接种细胞数) ×100％，计算贴壁率。
1.6 生长曲线 取指数生长期的细胞用胰酶消化制成单细胞悬液，以1×104/孔接种于24孔板，每孔加入1ml培养基。每天随机取3孔，计数每孔细胞的数目并计算平均值。连续计数10d，绘制细胞生长曲线
人恶性黑色素瘤细胞；A-375 [A375]说明书注意事项：
1. 接收到细胞，肉眼观察细胞培养基颜色，显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议收到时的培养瓶拍一张照片，显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张）。
2.用75%的酒精消毒（建议配置75%的酒精的水是灭菌过的）。
3.严格无菌操作，打开细胞培养瓶。
4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管完全吸出（严禁直接倾倒），放入另一无菌容器中（建议换新的培养基培养细胞）。
5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,显微镜下观察细胞变圆，轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落，加入终止液终止。
6.1000rpm，5min离心，重悬细胞。
7.换新的细胞培养瓶，37℃，5%CO2培养。
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猪抗凝血酶受体(A)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

Human pyridinoline crosslinks (PYD) ELISA Kit 人胶原吡啶交联(PYD)ELISA试剂盒

Porcinelipoproteinα,Lp-αELISAKit 猪脂蛋白α(Lp-α)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforALT/GPT(MouseAlanineAminoansferase)ELISAKit小鼠丙氨酸转氨酶/谷丙转氨酶规格：48T/96T

血液活化凝血因子10(FACTORXa)活性比色法定量检测试剂盒20次

PlaVitaminB6,VB6ELISAKit植物维生素B6(VB6)ELISA试剂盒规格：96T/48T
小鼠基质金属蛋白酶1(MMP1)ELISA试剂盒 ，英文名： MMP1 ELISA Kit

人6-羟多巴胺(6-OHDA)ELISA检测试剂盒Human6-hydroxydopamine,6-OHDAELISAKit 96T/48T

大鼠细胞色素P4502E1(CYP2E1)免疫试剂盒 Rat cytochrome P450 2E1,CYP2E1 ELISA Kit

英文名称RatSHBGELISAKit大鼠性激素结合球蛋白(SHBG)规格：96T/48T

果类果胶化学比色法定量检测试剂盒20次

ELISAKitPF-3人血小板因子3规格：48T/96T
人胸苷酸合成酶(TS)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

猪凝血因子Ⅱ(FⅡ)免疫试剂盒 Pig coagulation factor Ⅱ,FⅡ ELISA Kit

HumanBcellactivationfactorrfromthetumornecrosisfactorfamilyreceptor,BAFF-RELISAKit 人B细胞活化因子受体(BAFF-R)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

Humanmelanocytestimulatinghormone,MSHELISA试剂盒人黑色素细胞刺激素(MSH)ELISA试剂盒规格：96T/48T

组织一氧化氮(NO)活性比色法定量检测试剂盒50次

Humangrowthhormonereleasinghormone，GHRHELISAKit人促生长激素释放激素(GHRH)ELISA试剂盒规格：96T/48T
人肺泡上皮细胞RNAHPAEpiC miRNA5 μg

FCER1A Others Mouse 小鼠 FcERI / FCER1A 人细胞裂解液 (阳性对照)

人脐静脉内皮细胞完全培养基 100mL

HSC-T6细胞，鼠肝星形细胞 SW620(结肠癌细胞) 人前列腺癌低转移细胞株;PC-3M-2B4

CSF1 Protein Mouse 重组小鼠 M-CSF / CSF-1 蛋白

SW620(人结肠癌细胞) 5×106cells/瓶×2 甲型流感 H7N9 (A/Shanghai/4664T/2013) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照)
人肺泡上皮细胞RNAHPAEpiC miRNA5 μg

FCER1A Others Mouse 小鼠 FcERI / FCER1A 人细胞裂解液 (阳性对照)

人脐静脉内皮细胞完全培养基 100mL

HSC-T6细胞，鼠肝星形细胞 SW620(结肠癌细胞) 人前列腺癌低转移细胞株;PC-3M-2B4

CSF1 Protein Mouse 重组小鼠 M-CSF / CSF-1 蛋白

SW620(人结肠癌细胞) 5×106cells/瓶×2 甲型流感 H7N9 (A/Shanghai/4664T/2013) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照)
人恶性黑色素瘤细胞；A-375 [A375]说明书MMP8 Others Mouse 小鼠 MMP8 / CLG1 CHO细胞裂解液 (阳性对照)

原代表皮角化细胞特制基础无血清培养基Many types of cells包装：500/100ml

EB病毒转化的人B淋巴细胞;KM9801

豹猫肺成纤维样细胞;LCL1 张氏肝细胞，HeLa[Chang Liver]细胞 LLC-PK1细胞，猪肾细胞

人肺成纤维细胞;HFL1

HA Others H6N1 甲型流感 H6N1 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人细胞裂解液 (阳性对照)