Cas9稳定表达的人恶性黑色素瘤细胞；A375-Cas9-574说明书_详细资料

产品信息

Cas9稳定表达的人恶性黑色素瘤细胞；A375-Cas9-574说明书现货供应，质量有保证、价格优惠、实验效果好，我司为您提供免费代测服务，同时提供价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明，欢迎来电咨询选购！

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细胞名称 Cas9稳定表达的人恶性黑色素瘤细胞；A375-Cas9-574说明书
形态特性上皮样
生长特性贴壁生长
特征特性该细胞是采用慢病毒感染的方式使A375细胞稳定表达Cas9-Flag-Neo，经400ug/mlG418筛选得到的单克隆，经Western Blotting验证该克隆可以表达Cas9蛋白，可直接用Crispr技术编辑基因组DNA。
培养条件 DMEM-H: Dulbecco＇s Modified Eagle＇s Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS；1mM丙酮酸钠+4mML-Glutamine；400ug/ml G418
传代方法 1:3~1:8传代；2~3天换液1次。
传代情况 C3
冻存条件基础培养基+5%DMSO+20%FBS

细胞的种类：
Cas9稳定表达的人恶性黑色素瘤细胞；A375-Cas9-574说明书是冻存产品，由液氮直接拿出，干冰运输给客户。一般不推荐这种，也较少使用这种方式，因为复苏手法对于细胞状态影响较大，一旦细胞状态不好，很难说是细胞自身不行，还是复苏没操作好；另外温度对细胞、基因功能状态影响很大，也不是细胞储存的Z好方式，快递时间也很难控制，多种因素影响产品的质量；干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种：
是我们复苏好细胞，QC通过后，T-25灌满培养基常温运输给客户，排除复苏造成影响，常温运输也对细胞影响也不大，只需加25元运费(顺丰)。
质量保证：我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，进口来源，保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。的冻存是细胞培养的基本操作，不同的实验室采用的方法略有差异，但是都会遵循慢冻速溶的宗旨。
细胞培养操作规程：
一．Cas9稳定表达的人恶性黑色素瘤细胞；A375-Cas9-574说明书培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件：气相：空气，95%；二氧化碳，5%。温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
以下是 Cas9稳定表达的人恶性黑色素瘤细胞；A375-Cas9-574说明书的相关产品：
ACRYL-GLIDE玻璃板硅化处理试剂生物技术级透明无色液体RTsigma
139-59-34-基二本醚4-pxenoxyaniline
卢戈液卢戈液25克BR
1-羌基本并三坐一水 1-xy7noxybqnzotriczolq hydrctq 13333-23-9
阿斯巴甜shēng huà shì jì容量：RT5克
二月桂酸二丁基锡，英文名或英文缩写：Dibutyltin dilaurate，级别：CP，20-30目，规格：25克
(木瓜蛋白酶)
xy7noXYPROPYL-B-CYCLODEXTRIN羟丙基-B-环糊精高纯级5G128446-35-5RT
次肖醋铋 BisMuth Subnitnctq (cS);BisMuthyl nitnctq;BisMuth oxynitnctq;BisMuth nitnctq oxidq 1304-82-4
ACESN-基甲酰甲基乙磺酸50毫克FMP，90%
锆shēng huà shì jì容量：RT5克
5036-48-61H-咪唑-1-丙烷胺N-(3-Aminopropyl)-imidazole
3-基-4-羟基本磺酸，英文名或英文缩写：2-Aminopxenol-4-sulfonic acid，级别：2N，200目，规格：25克
五硼酸铵八水合物 Ammonium pentaborate octahydrate 12046-03-6 500G 通用试剂
香柏油 Cedar Oil 8000-27-9 25G 通用试剂
乳糖亚盐培养基(LS)250g用于产气荚膜梭菌确认试验
胆硫乳琼脂(DHL) Deoxycholate Hydrogen Sulfide Lactose Agar 肠道菌选择性培养基，特别是沙门氏菌的选择性分离(GB、SN标准)
三号胆盐 No. 3 Bile Salt 100 用于YZ革兰氏阳性菌的生长
Skirrow琼脂基础250g/瓶用于弯曲菌选择性分离，每培养基中添加20702、20703各添加077%羊血则组成改良Skirrow琼脂incubationmediaSkirrow琼脂基础250g/瓶用于弯曲菌选择性分离，每培养基中添加20702、20703各添加077%羊血则组成改良Skirrow琼脂
Korser氏枸椽酸盐肉汤 100g 用于细菌枸椽酸盐试验(SN标准)
Cas9稳定表达的人恶性黑色素瘤细胞；A375-Cas9-574说明书布鲁氏菌培养基YJ剂每支添加于200mlHB03
O104显色培养基用于大肠杆菌O104的分离和鉴定 1000ml原装 incubation media O104显色培养基用于大肠杆菌O104的分离和鉴定 1000ml原装
枯草芽孢杆菌黄瓜品种抗性水平鉴定支/瓶
MUG快速鉴定大肠试剂5ml*用于快速鉴定大肠杆菌
1%聚山梨醇酯80-玉米粉琼脂培养基 250g 用于鉴定白色念球菌和霉菌(产芽管试验)。
注意事项：
1.Cas9稳定表达的人恶性黑色素瘤细胞；A375-Cas9-574说明书接收到细胞，肉眼观察细胞培养基颜色
，显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议收到时的培养瓶拍一张照片，显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张）。
2.用75%的酒精消毒（建议配置75%的酒精的水是灭菌过的）。
3.严格无菌操作，打开细胞培养瓶。
4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管完全吸出（严禁直接倾倒），放入另一无菌容器中（建议换新的培养基培养细胞）。
5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,显微镜下观察细胞变圆，轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落，加入终止液终止。
6.1000rpm，5min离心，重悬细胞。
7.换新的细胞培养瓶，37℃，5%CO2培养。

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