无脊椎动物种属鉴定 PCR Mix100 次保存产品及特点:
易错 PCR(error-prone PCR)是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校对功能的特性,在一定条件下(如不同的 dNTP 浓度、Mg 浓度和 MnCl2存在)能够按较高的机率引入随机引入突变。如果有适当的选择方法,则可从构建的突变库选出所需突变体。易错 PCR 和常规 PCR 的比较如下:本产品就是专门为广大的研究工作者进行易错 PCR 而开发,本产品具有下列特点:
1. 即开即用,十分简单方便,尤其在生物制药和酶学研究领域显示出了它的优越性。
2. 配方经过精心优化,突变率稳定,突变没有趋向性。易错 PCR 的突变率为 0.66% (±0.13%),详见使用手册疑难解答。
3. 比体内基因突变更快捷简单,但如果在 PCR 引物中设计位点,则可使产物克隆到表达载体,也可以用于体内蛋白活性的筛选。
4. 可用于连续易错 PCR(sequential error-prone PCR),只需把上一次易错 PCR 的产物用作下一次易错 PCR 的模板即可,使每一次获得的小突变累积而产生重要的有益突变。
5. 只适用于扩增 1kb 以下的产物,对于 1kb 以上的产物,建议分段扩增。
无脊椎动物种属鉴定 PCR Mix100 次保存变性温度与时间:
模板变性温度是决定 PCR 反应中双链 DNA 解链的温度,达不到变 性温度就不会产生单链 DNA 模板,PCR 也就不会启动。变性温度低则变性不完全, DNA 双链会很快复性,因而减少产量。变性温度太高,又会影响酶的活性。一般情况 下可设为 94℃ 20~30 秒,高温时间应尽量缩短,以保持耐热 DNA 聚合酶的活力, zui高变性温度不宜超过 95℃。 退火温度与时间:退火温度决定 PCR 特异性与产量。温度高特异性强,但过高则引物 不能与模板牢固结合.
无脊椎动物种属鉴定 PCR Mix100 次保存DNA 扩增效率下降;
温度低产量高,但过低可造成引物与模板 错配,非特异性产物增加。合适的退火温度一般在 45~68℃之间。设置特定反应的zui 适退火温度,可根据引物的(G+C)%含量进行推测,一般实验中退火温度比扩增引 物的熔解温度 Tm 低 5℃,退火时间一般为 30~60 秒,足以使引物与模板之间完全结 合,长时间退火没有必要。
无脊椎动物种属鉴定 PCR Mix100 次保存使用方法:
1. 以 30 uL 的标准 PCR 反应体系为例,如果反应体系不是 30 uL,各成分需要等按比例增加或减少。在一干净的 PCR 管中,加入下列成分:易错 PCR Mix, 10× 3 uL 易错 PCR 专用 dNTP, 10× 3 uL MnCl2, 5 mM 3 uL 自备 DNA 模板(10ng/uL) 1 uL PCR 引物(自备,10 uM each) 10 pmol each Taq DNA 聚合酶(5U/uL) 1 -5 U 补水到 30 uL
2. 按已经优化的 PCR 条件进行一定循环数的 PCR(循环数与突变率的关系见下表),然后取 5 uL 电泳检查。如果没有优化的 PCR 条件,一般可以先尝试下面的 PCR 条件: PCR 前变性 94℃ 3 分钟易错 PCR 94℃ 1 分钟 45℃ 1 分钟 循环 30 次(见注) 72℃ 1 分钟注:易错 PCR 一般不需要热启动,也不需要在 PCR 结束后做延伸处理。
13,14-dihydro Prostaglandin F1α (10 mg) 9。alpha。,11。alpha。,15S-trihydroxy-prostan-1-oic acid; PGFα|13,14-dihydro PGF1α; 13,14-dihydro Prostaglandin F1α
MMB018 (10 mg) methyl (1-pentyl-1H-indole-3-carbonyl)-L-valinate
三羟基氨甲烷盐酸盐(5KG) TRIS Hydrochloride, CAS 1185-53-1; MW 157.8
Tetrodotoxin Citrate (1 mg) (4R,4aR,5R,7S,9S,10S,10aR,11S,12S)-2-amino-1,4,4a,5,9,10-hexahydro-12-(hydroxymethyl)-5,9:7,10a-dimethanol-10aH-[1,3]dioxocino[6,5-d]pyrimidine-4,7,10,11,12-pentol, citrate; TTX; Tetrodotoxin Citrate
Prostaglandin A1 methyl ester (10 mg) 15S-hydroxy-9-oxo-prosta-10,13E-dien-1-oic acid, methyl ester; PGA1 methyl ester; Prostaglandin A1 methyl ester
5,7,4’-Trihydroxyflavanone; 2,3-dihydro-5,7-dihydroxy-2-(4-hydroxyphenyl)-4H-1-benzopyran-4-one; NGEN Naringenin
G6PDH Cofactor (1 ea) G6PDH Cofactor
生物素标记组蛋白H3多肽(69-89) Biotinylated Histone H3 Peptide (residues 69-89) (100 ul)
Thiamet G (5 mg) 2-(ethylamino)-3aR,6S,7R,7aR-tetrahydro-5R-(hydroxymethyl)-5H-pyrano[3,2-d]thiazole-6,7-diol; Thiamet G
PLX4720 (10 mg) Raf Kinase Inhibitor V; N-[3-[(5-chloro-1H-pyrrolo[2,3-b]pyridin-3-yl)carbonyl]-2,4-difluorophenyl]-1-propanesulfonamide
β-Glycerophosphate (sodium salt hydrate) (50 g) 2-(dihydrogen phosphate)-1,2,3-propanetriol, disodium salt, pentahydrate; β-Glycerophosphate (sodium salt hydrate)
15-keto Prostaglandin E2 Lipid Maps MS Standard (50 mg) 15-keto PGE2, 15-keto Prostaglandin E2 Lipid Maps MS Standard, 9,15-dioxo-11α-hydroxy-prosta-5Z,13E-dien-1-oic acid
Ellman’s Reagent (100 dtn) Ellman’s Reagent
1,2-O-Dihexadecyl-rac-glycerol (500 mg) 2,3-bis(hexadecyloxy)-1-propanol
yenine 3。5马来酰亚胺 [相当于Cy3。5马来酰亚胺] yenine 3。5 Maleimide [equivalent to Cy3。5 Maleimide]
Donepezil (100 mg) 2,3-dixy7no-5,6-dimetxoxy-2[[1-(pxenylmetxyl)-4-piperidinyl]metxyl]-1H-inden-1-one; Aricept ; Donepezil
5(S),6(R)-Lipoxin A4 (100 ug) 5S,6R,15S-trixy7noxy-7E,9E,11Z,13E-eicosatetraenoic acid; 5(S),6(R),15(S)-TriHETE|5(S),6(R)-LXA4; 5(S),6(R)-Lipoxin A4
N6-metxyl-(R)-roscovitine; Amyloid-β Forty-Two Inducer 4 Aftin-4
维生素K加入HB0398中
纤维二糖-多粘菌素E(CC)琼脂 用于创伤弧菌分离培养基
Lambda Broth Lambda Broth 100克 BR
酵母膏-麦芽膏琼脂ISPMedium2(YeastExtractMaltExtractAgar)250g/瓶用于链霉菌属的培养鉴定incubationmedia酵母膏-麦芽膏琼脂ISPMedium2(YeastExtractMaltExtractAgar)250g/瓶用于链霉菌属的培养鉴定
大肠杆菌显色培养基 1000ml 用于快速、准确检测大肠杆菌,培
新生霉素/支*5
Silicatebacteriamedium(withoutAgar)
醋酸盐琼脂 Acetate Agar 250 用于细菌醋酸盐试验
溴甲酚紫葡萄糖肉汤250g/瓶用于低酸性罐头食品无菌检验incubationmedia溴甲酚紫葡萄糖肉汤250g/瓶用于低酸性罐头食品无菌检验
SorbitolMaconkeyAgarBase
无脊椎动物种属鉴定 PCR Mix100 次保存气单胞菌培养基添加剂5支每支添加剂加入气单胞菌培养基基础
50190 胰蛋白胨 BR 400g 酪蛋白胰酶水解而成的胨,培养基原材料 incubation media 50190 胰蛋白胨 BR 400g 酪蛋白胰酶水解而成的胨,培养基原材料
粉红木霉 支/瓶
WagstsumaBloodAgarBase
MaltExtractAgar