单细胞裂解液 (DNA)1mL保存使用方法:
1. 以 30 uL 的标准 PCR 反应体系为例,如果反应体系不是 30 uL,各成分需要等按比例增加或减少。在一干净的 PCR 管中,加入下列成分:易错 PCR Mix, 10× 3 uL 易错 PCR 专用 dNTP, 10× 3 uL MnCl2, 5 mM 3 uL 自备 DNA 模板(10ng/uL) 1 uL PCR 引物(自备,10 uM each) 10 pmol each Taq DNA 聚合酶(5U/uL) 1 -5 U 补水到 30 uL
2. 按已经优化的 PCR 条件进行一定循环数的 PCR(循环数与突变率的关系见下表),然后取 5 uL 电泳检查。如果没有优化的 PCR 条件,一般可以先尝试下面的 PCR 条件: PCR 前变性 94℃ 3 分钟易错 PCR 94℃ 1 分钟 45℃ 1 分钟 循环 30 次(见注) 72℃ 1 分钟注:易错 PCR 一般不需要热启动,也不需要在 PCR 结束后做延伸处理。
单细胞裂解液 (DNA)1mL保存产品及特点:
易错 PCR(error-prone PCR)是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校对功能的特性,在一定条件下(如不同的 dNTP 浓度、Mg 浓度和 MnCl2存在)能够按较高的机率引入随机引入突变。如果有适当的选择方法,则可从构建的突变库选出所需突变体。易错 PCR 和常规 PCR 的比较如下:本产品就是专门为广大的研究工作者进行易错 PCR 而开发,本产品具有下列特点:
1. 即开即用,十分简单方便,尤其在生物制药和酶学研究领域显示出了它的优越性。
2. 配方经过精心优化,突变率稳定,突变没有趋向性。易错 PCR 的突变率为 0.66% (±0.13%),详见使用手册疑难解答。
3. 比体内基因突变更快捷简单,但如果在 PCR 引物中设计位点,则可使产物克隆到表达载体,也可以用于体内蛋白活性的筛选。
4. 可用于连续易错 PCR(sequential error-prone PCR),只需把上一次易错 PCR 的产物用作下一次易错 PCR 的模板即可,使每一次获得的小突变累积而产生重要的有益突变。
5. 只适用于扩增 1kb 以下的产物,对于 1kb 以上的产物,建议分段扩增。
单细胞裂解液 (DNA)1mL保存DNA 扩增效率下降;
温度低产量高,但过低可造成引物与模板 错配,非特异性产物增加。合适的退火温度一般在 45~68℃之间。设置特定反应的zui 适退火温度,可根据引物的(G+C)%含量进行推测,一般实验中退火温度比扩增引 物的熔解温度 Tm 低 5℃,退火时间一般为 30~60 秒,足以使引物与模板之间完全结 合,长时间退火没有必要。
单细胞裂解液 (DNA)1mL保存详细说明书:

11β-Prostaglandin F1β (10 mg) 9。beta。,11。beta。,15S-trihydroxy-prost-13E-en-1-oic acid; 9β,11β-PGF1α|11β-PGF1β|11-epi PGF1β; 11β-Prostaglandin F1β
TZ9 (5 mg) 4-amino-6-(phenylamino)-2-(4-nitnobenzoate)-1,3,5-tri-2-methanol
1000X Gamborg’s维生素混合物溶液(100ML) Gamborg’s Vitamin Mixture, 1000X Solution
Adenosine 5’-(γ-thio)-triphosphate (litxium salt) (1 mg) P’-anhydride with phosphorothioic acid adenosine 5’-(trihydrogen diphosphate), tetralitxium salt; ATPγS; Adenosine 5’-(γ-thio)-triphosphate (litxium salt)
CAY10398 (5 mg) 4-(dimethylamino)-N-[6-(hydroxyamino)-6-oxohexyl]-benzamide; MD 85|PX 089274; CAY10398
(S)-4-ethyl-4-hydroxy-1H-pyrano[3’,4’:6,7]indolizino[1,2-b]quinoline-3,14-(4H,12H)-dione Camptothecin (2 mM)
PA Assay ADHP (1 ea) PA Assay ADHP
丁酸钠 Sodium Butyrate (1 g)
4-Methylbenzamide oxime (1 g) N-hydroxy-4-methyl-benzenecarboximidamide; p-Toylamideoxime; 4-Methylbenzamide oxime
CAY10678 (1 mg) N-
PB-22 N-pentanoic acid metabolite (5 mg) 5-(3-((quinolin-8-yloxy)carbonyl)-1H-indol-1-yl)pentanoic acid; PB-22 N-pentanoic acid metabolite
Microcystin-LR (500 ug) Cyanoginosin-LR, Microcystin-LR, Toxin T 17 (Microcystis aeruginosa)
Phosphate Buffer (100 dtn) Phosphate Buffer
1-thio-β-D-Glucose (wo7ium salt) (250 mg) Click Tag
5-FAM叠氮化物 5-FAM Azide
UNC0631 (25 mg) N-[1-(cyclohexylmetxyl)-4-piperidinyl]-2-[hexaxy7no-4-(1-metxyletxyl)-1H-1,4-diazepin-1-yl]-6-metxoxy-7-[3-(1-piperidinyl)propoxy] 4-inoneazolinamine
Docosatetraenoyl Ethanolamide (25 mg) N-(2-xy7noxyetxyl)-7Z,10Z,13Z,16Z-docosatetraenamide; DEA; Docosatetraenoyl Ethanolamide
4-(4-Benzofurazanyl)-1,4-dixy7no-2,6-dimetxyl-3,5-pyridinedicarboxylic acid, metxyl, 1-metxylester diester Neurodezine
牛津琼脂(OXA)基础250g用于单增李氏菌的选择性分离(SN标准)
无机盐琼脂培养基 Inorganic Agar 用于纺织品防霉性能测试
固体改良马丁琼脂培养基 Martin Solid,Modified 250克 生物制品无菌试验的霉菌检查
22ubos肉汤基础添加剂5ml×盒每2支用于90ml中incubationmedia22ubos肉汤基础添加剂5ml×盒每2支用于90ml中
CCFA琼脂基础 250g 用于艰难梭菌选择性分离培养
甘露醇卵黄多粘菌素琼脂平板(MYP)2838mX20个用于蜡样芽孢杆菌的菌数测定及分离培养(GB/T4789.28-2003中4.64,GB/T4789.03,SN02和...
土霉素葡萄糖酵母提取物选择性培养基(OGYE培养基) (CM0545) Oxoid incubation media 土霉素葡萄糖酵母提取物选择性培养基(OGYE培养基) (CM0545) Oxoid
炭黑曲霉 分离源:发酵剂 支/瓶
心浸液琼脂250g用于培养营养要求高的微生物
克氏双糖铁琼脂 250g 用于细菌复合生化试验(葡
单细胞裂解液 (DNA)1mL保存脱脂奶蔗糖胰蛋白胨琼脂250g用于致病性嗜水气单胞菌的鉴别培养
50327 麦芽提取粉 BR 400g 培养基原材料,特制适用于培养酵母菌 incubation media 50327 麦芽提取粉 BR 400g 培养基原材料,特制适用于培养酵母菌
海滨芽孢杆菌 产肌苷酸 支/瓶
TerrificBroth
野生酵母培养基 250g 用于野生酵母计数培养
单细胞裂解液 (DNA)1mL保存变性温度与时间:
模板变性温度是决定 PCR 反应中双链 DNA 解链的温度,达不到变 性温度就不会产生单链 DNA 模板,PCR 也就不会启动。变性温度低则变性不完全, DNA 双链会很快复性,因而减少产量。变性温度太高,又会影响酶的活性。一般情况 下可设为 94℃ 20~30 秒,高温时间应尽量缩短,以保持耐热 DNA 聚合酶的活力, zui高变性温度不宜超过 95℃。 退火温度与时间:退火温度决定 PCR 特异性与产量。温度高特异性强,但过高则引物 不能与模板牢固结合